糖原合成酶激酶3β在肝功能衰竭的变化与意义
本文关键词:糖原合成酶激酶3β在肝功能衰竭的变化与意义
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【摘要】:目的:肝功能衰竭是多种因素引起的严重肝脏损害,是临床常见的严重肝病症候群,病死率极高。多年来,各国学者对肝衰竭的发病机制不断进行探索,目前尚未完全阐明。糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)为糖原合成酶激酶3(glycogen synthase kinase 3,GSK3)的亚型。最新研究证实,GSK3参与炎症的进程,其中GSK3β影响转录因子NF-κB的活性。本研究旨在通过检测GSK3β在肝衰竭的表达,探讨GSK3β对肝衰竭病情演变的影响。方法:1动物实验通过D-氨基半乳糖(D-Galactosamine,D-Gal N)腹腔注射构建小鼠急性肝衰竭(Acute liver failure,ALF)模型。检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transam inase,AST)、总胆红素(Total bilirubin,TB)、凝血酶原时间(Prothrombintime,PT)水平;部分肝组织石蜡包埋后切片,用于苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝脏病理变化;余肝组织经液氮速冻后,-80℃冰箱保存,用于实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-PCR)检测肝组织GSK3βm RNA表达,免疫组织化学染色法检测肝组织GSK3β、p-GSK3β的表达及分布,Western blot检测肝组织GSK3β、p-GSK3β的表达。2临床实验选取2015年1月至2015年10月河北医科大学第三医院门诊或住院患者,共47例,其中慢性乙型病毒性肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者22例(CHB组)、HBV相关慢加急性肝功能衰竭(Acute on chronic liver failure,ACLF)患者25例(ACLF组),另外同期于河北医科大学第三医院体检中心选取20例健康体检者作为健康对照(Healthy control)组。除此之外,收集接受肝移植的ACLF患者肝组织12例、肝组织活检的CHB患者肝组织23例及正常供体肝组织4例。检测入组患者血清ALT、ˉAST、TB、DB、INR、HBV DNA水平;酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assays,ELISA)检测患者血清p-GSK3β、TNFα水平;RT-PCR检测肝组织GSK3βm RNA表达;免疫组织化学染色法检测肝组织GSK3β、p-GSK3β表达及分布;Western blot检测肝组织GSK3β、p-GSK3β的表达。结果:1动物实验部分1.1成功构建小鼠肝衰竭模型实验结果可见正常对照组小鼠毛发有光泽,精神状态好,饮食量多;肝衰竭组小鼠毛发凌乱没有光泽,饮食量、活动减少,精神欠佳,反应迟钝。1.2小鼠血清生化指标肝衰竭组小鼠血清ALT、AST、TB、PT水平高于正常对照组(P均0.01)。1.3肝组织病理学改变正常对照组:肝小叶结构清晰,以中央静脉为轴,肝细胞索呈放射状排列,肝细胞结构完整,大小均匀,无变性及坏死,无炎细胞浸润;肝衰竭组:肝小叶结构紊乱,肝细胞索消失,可见多处出血坏死灶,坏死灶可见细胞核的碎裂及坏死并有大量炎细胞浸润。1.4肝组织GSK3βm RNA的表达肝衰组小鼠肝组织GSK3βm RNA表达水平较正常对照组明显升高(P0.01)。1.5肝组织GSK3β、p-GSK3β的分布与表达免疫组织化学染色结果显示:GSK3β、p-GSK3β主要表达于肝细胞胞浆。Western blot结果显示:正常对照组、ALF组小鼠肝组织GSK3β表达水平无明显差异(P0.05);ALF组小鼠肝组织p-GSK3β蛋白表达较正常对照组明显降低,差异具有统计学意义(P0.01)。2临床实验部分2.1各组研究对象年龄及性别比例具有可比性。ACLF组患者血清ALT、TB、DB、INR水平明显高于CHB组及健康对照组(P0.01);ACLF组患者Alb则明显低于CHB组及健康对照组(P0.01);ACLF组和CHBˉ组AST水平、HBV DNA载量无明显差异(P0.05)。2.2血清TNFα与p-GSK3β水平CHB组血清TNFα水平较正常对照组升高,差异具有统计学意义(P0.05);ACLF组TNFα水平较正常对照组、CHB组明显升高,差异具有统计学意义(P0.01)。CHB组血清p-GSK3β水平较正常对照组降低,差异具有统计学意义(P0.01);ACLF组p-GSK3β水平较正常对照组、CHB组明显降低,差异具有统计学意义(P0.01)。2.3肝组织GSK3βm RNA的表达CHB组GSK3βm RNA表达水平较正常对照组无明显差异(P0.05);ACLF组GSK3βm RNA表达水平较正常对照组、CHB组明显升高(P0.01),差异具有统计学意义。2.4肝组织GSK3β、p-GSK3β的分布与表达免疫组织化学染色结果显示:GSK3β、p-GSK3β主要表达于肝细胞胞浆。蛋白印迹法结果显示:正常对照组、CHB组、ACLF组患者肝组织GSK3β表达水平无明显差异(P0.05);CHB组p-GSK3β表达水平较正常对照组降低,差异具有统计学意义(P0.01);ACLF组p-GSK3β表达水平较正常对照组、CHB组明显下降,差异具有统计学意义(P0.01)。2.5 ACLF患者血清p-GSK3β与TNFα相关性分析ACLF患者血清p-GSK3β与TNFα呈负相关,相关系数为r=-0.761(P0.01)。结论:1 GSK3β通过调节磷酸化/去磷酸化水平参与了肝衰竭的病理生理过程。2 HBV相关ACLF患者GSK3β活性增强,TNFα表达升高,提示GSK3β在HBV相关ACLF中发挥作用,推测其机制可能通过上调TNFα合成和(或)分泌,影响疾病进程。
【关键词】:糖原合成酶激酶3β 肝功能衰竭 肝炎 乙型 慢性 炎症 肿瘤坏死因子α
【学位授予单位】:河北医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R575.3
【目录】:
- 中文摘要4-7
- 英文摘要7-11
- 英文缩写11-12
- 前言12-13
- 材料与方法13-23
- 结果23-25
- 附图25-34
- 附表34-37
- 讨论37-41
- 结论41-42
- 参考文献42-44
- 综述 HBV感染与肾功能损伤44-68
- 参考文献58-68
- 致谢68-69
- 个人简历69
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2 沈耕荣;周霞秋;张春萼;;肝功能衰竭治疗的新进展[J];国外医学(内科学分册);1983年09期
3 ;肝功能衰竭[J];国外科技资料目录.医药卫生;1998年11期
4 谢卫,杨敏杰,吕国忠,许炳元;烧伤合并肝功能衰竭二例[J];江苏医药;2000年08期
5 崔世昌,金瑞,朗振为,庞永立,吴改娥;肝功能衰竭并发黄疸肾68例分析[J];肝脏;2000年04期
6 ;冷冻细胞保衰肝[J];山西医科大学学报(基础医学教育版);2000年03期
7 周霞秋,向晓星;暴发性肝功能衰竭治疗的展望[J];肝脏;2003年04期
8 郭莉萍,林惠凤;分子吸附再循环系统治疗肝功能衰竭患者的护理[J];上海护理;2004年01期
9 邵利红,朴云峰,裴继华;暴发性肝功能衰竭预后高危因素的分析[J];临床肝胆病杂志;2005年04期
10 张平,张正文;水痘-带状疱疹病毒致肝功能衰竭1例[J];临床荟萃;2005年18期
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1 罗国钧;;肝功能衰竭的中西医结合治疗体会[A];中国中西医结合学会第十三次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2001年
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3 ;肝功能衰竭诊疗指南[A];贵州省中西医结合学会2010年消化系病学术交流会暨非酒精性脂肪肝研究进展学习班资料汇编[C];2010年
4 何振扬;;肝功能衰竭与凝血功能障碍[A];中国重症医学的创新与发展——第二届中国医师协会重症医学医师分会暨第九届中国病理生理学会危重病医学专业委员会2010年危重病医学全国会议会刊[C];2010年
5 周锐;潘晨;郑玲;黄祖雄;;骨髓间充质干细胞治疗大鼠暴发性肝功能衰竭及其机制的初步研究[A];第6届全国疑难及重症肝病大会论文集[C];2011年
6 吴伯瑜;黄逢元;郑向真;;过量五倍子鞣质引起肝功能衰竭并多脏器功能衰竭死亡一例报告[A];全国第三届烧伤外科学术交流会议论文摘要[C];1991年
7 崇雨田;林国莉;赵志新;彭晓谋;陈雪娟;高志良;;39例肝功能衰竭患者的离体肝组织病理特点[A];中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议论文汇编[C];2005年
8 董培玲;张斌;陈新月;丁惠国;;阿德福韦停药后肝功能衰竭1例[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(下册)[C];2007年
9 陈家华;殷国平;王佳;;妊娠合并肝功能衰竭剖腹产的麻醉处理[A];2008年第七次华东六省一市麻醉学学术会议暨浙江省麻醉学术年会论文汇编(下册)[C];2008年
10 张金卷;杜智;李涛;朱争艳;高英堂;宋继昌;;大鼠肝干细胞的诱导分离及其对暴发性肝功能衰竭治疗作用的评估[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
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1 通讯员 黄欢邋记者 施嘉奇;暴发性肝功能衰竭将有药可治[N];文汇报;2008年
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1 皮国涛;肝功能衰竭预后影响因素分析[D];新疆医科大学;2015年
2 赵倩;糖原合成酶激酶3β在肝功能衰竭的变化与意义[D];河北医科大学;2016年
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,本文编号:689099
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