HBV共价闭合环状DNA功能化纳米颗粒制备及鉴定

发布时间：2017-09-03 09:02

  本文关键词：HBV共价闭合环状DNA功能化纳米颗粒制备及鉴定

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【摘要】：目的制备HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)功能化磁性纳米颗粒,为进一步建立富集分离和检测cccDNA方法奠定基础。方法通过亲和素修饰纳米颗粒表面,利用亲和素与生物素的亲和作用,将亲和素修饰的纳米颗粒与生物素标记的cccDNA特异性探针偶联,制备cccDNA功能化纳米颗粒,最后用cccDNA探针完全互补的荧光标记序列与功能化纳米颗粒反应,鉴定其特性。结果亲和素修饰的纳米颗粒能结合生物素最大量为1 205ng/mg;通过与亲和素作用,生物素标记cccDNA特异性探针固定在磁性纳米微粒表面,其最大结合生物素标记探针量为3.2×10~(-9) mol/mg;cccDNA功能化纳米颗粒可捕获与其互补的荧光标记寡核苷酸序列,其最大捕获量为2.0×10~(-9) mol/mg,并能通过变性释放出保持生物学活性游离的荧光标记寡核苷酸序列。结论成功构建的cccDNA功能化纳米微粒能有效捕获与其互补的序列,其捕获量能达到cccDNA的分离提取要求。
【作者单位】： 西南医科大学附属中医医院检验科;重庆医科大学检验医学院;
【关键词】： *DNA 病毒 DNA 环状 纳米粒子
【基金】：泸州市重点科技计划项目(2014-S-49) 西南医科大学校级课题(2015-YJ028)
【分类号】：R512.62;R440
【正文快照】： (2016)06-0370-05近年来,纳米技术迅速发展,被广泛应用到生物医学各个研究领域。以纳米或微米级磁性粒子为载体的磁性分离技术主要利用固定在粒子表面的蛋白质或单链核苷酸探针的亲和作用与靶分子或互补序列结合,目标靶分子因与磁性粒子特异性结合后在磁场作用下,通过抗原-抗

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

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2 张志锋;朱宏莉;唐一通;崔婷;耿婷婷;陈超;崔亚丽;;链亲和素-磁性微粒的制备及其应用[J];中国科学(B辑 化学);2006年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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2 侯红萍;张萍;王如福;;生物素-亲和素系统定向固定糖化酶的研究[J];中国食品学报;2014年03期

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4 谢月辉;余睿;班韶;赵冲;孟照辉;;利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2011年02期

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6 孔令青;李勇;高洪;严玉霖;;生物素-亲和素标记技术[J];动物医学进展;2008年04期

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 苏鹏飞;陈国;赵s，

本文编号：784044