三七总皂苷对大鼠重症急性胰腺炎钙超载与NF-κB因子的影响

发布时间：2017-09-19 10:19

  本文关键词：三七总皂苷对大鼠重症急性胰腺炎钙超载与NF-κB因子的影响

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【摘要】：[目的]：观察三七总皂苷注射液干预重症急性胰腺炎模型胰腺腺泡细胞内钙超载与胰腺组织NF-κB因子水平的变化；并探讨钙超载与NF-κB因子两者间的相互关系。[方法]：健康成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠90只,体重约200-250g,随机将其分成三组：假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、三七总皂苷干预组(PNS组),每组各30只：①假手术组(SO组)：开腹后,只翻动十二指肠和胰腺,并关腹；②重症急性胰腺炎组(SAP组)：开腹后,将5%牛磺胆酸钠(1.0mL/kg)采用逆行胰胆管注射法诱导建立SAP模型,逐层关腹。③三七总皂苷干预组(PNS组)：在进行胰腺炎模型建模前,将三七总皂苷注射液(50 mg/ml血塞通注射液(0.1ml/100g))注射入腹腔,注射1h后,同SAP组法建立重症急性胰腺炎模型。三组大鼠分别于术后8h、12h、24h采用乙醚麻醉处死,并收集腹水、血清及胰腺标本。并计算腹水量；采用生化方法检测血清淀粉酶(AMS)活性；HE染色胰腺组织,在光镜下观察胰腺组织并作病理学评分；免疫组化S-P法检测胰腺组织内NF-κB因子的表达量；采用流式细胞仪技术(Flow Cytometry/Financal Capacity Model, FCM)检测胰腺腺泡细胞内Ca2+的荧光强度(Fluorescence Intensity, FI),通过荧光强度来反应腺泡细胞内Ca2+的浓度。采用统计学方法Spearman法分析胰腺腺泡细胞内Ca2+浓度与胰腺组织NF-κB因子表达量的相关性。[结果]：1.血清淀粉酶(AMS)：三组大鼠血清AMS在8h、12h、24h三个时间点之间均有显著差异(P0.05),与SO组相比,SAP组和PNS组均显著升高,比较有统计学差异(P0.05)；与SAP组相比,各时间点PNS组血清AMS均显著降低,比较有统计学差异(P0.05)。2.腹水量：实验研究中,SAP组及PNS组两组建模后在8h、12h、24h三个时间点打开腹腔均可见大量血性腹水产生。与SO组相比,SAP组和PNS组腹水量均显著升高,比较具有统计学意义(P0.05)；与SAP组相比,PNS组各时间点均显著降低,比较具有统计学意义(P0.05)。3.胰腺组织病理学损伤：与SO组相比,SAP组和PNS组均显著升高,比较具有统计学意义(P0.05)；与SAP组相比,PNS组各时间点均显著降低,比较具有统计学意义(P0.05)。4.胰腺细胞内Ca2+荧光强度：采用荧光显微镜观察,可见胰腺腺泡细胞内钙离子呈绿色光显影。通过细胞内Ca2+的荧光强度(Fluorescence Intensity, FI)来反映胰腺细胞内Ca2+的浓度大小。在8h、12h、24h三个时间点,三组大鼠胰腺细胞内Ca2+的荧光强度之间均有统计学差异(P0.05)；与SO组相比,SAP组和PNS组其荧光强度均显著升高,比较具有统计学意义(P0.05)；与SAP组相比,PNS组各时间点均显著降低,比较具有统计学意义(P0.05)。5.胰腺组织NF-κB因子水平变化：胰腺组织通过免疫组化处理后,在光镜下呈现棕黄色,在Image pro plus图像软件下处理,8h、12h、24h三个时间点,与SO组相比,SAP组和PNS组均显著升高,比较具有统计学意义(P0.05)；与SAP组相比,PNS组各时间点均显著降低,比较具有统计学意义(P0.05)。6.相关性分析：应用Spearman相关分析显示：在各时间点大鼠胰腺细胞内Ca2+浓度均与大鼠胰腺组织NF-κB因子水平呈正相关性(P0.05),细胞内Ca2+浓度升高与NF-κB因子水平变化具有相关性。[结论]1.胰腺细胞内钙超载与NF-κB因子的水平在重症急性胰腺炎时明显激活,呈高水平表达；2.腺泡细胞内钙超载与NF-κB因子的水平变化之间呈正相关,这提示细胞内钙超载可能引起急性胰腺炎过程中NF-κB因子的高表达,从而引起一系列炎症反应；3.三七总皂苷可以抑制细胞内的钙超载,进一步减轻炎症反应,有助于治疗急性胰腺炎。
【关键词】：三七总皂苷 重症急性胰腺炎 钙超载 NF-κB
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R576
【目录】：

• 缩略词表(以字母顺序排列)5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-15
• 材料与方法15-25
• 结果25-36
• 讨论36-47
• 结论47-48
• 参考文献48-54
• 综述54-62
• 参考文献59-62
• 攻读学位期间获得的学术成果62-63
• 致谢63

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