乙型肝炎病毒感染相关性肝癌中HBV cccDNA水平与突变关系的研究

发布时间：2017-09-21 08:05

  本文关键词：乙型肝炎病毒感染相关性肝癌中HBV cccDNA水平与突变关系的研究

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【摘要】：目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,ccc DNA)水平与突变关系。方法:运用特异性荧光定量PCR定量分析了12例肝癌组织和癌旁组织中乙肝病毒复制水平的表征因子HBV ccc DNA,HBV total DNA及前基因组RNA(pregenome RNA,pg RNA)的表达水平,再用滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)特异性扩增癌组织中HBV ccc DNA,测序分析了病毒基因组4个编码调控区域pre C/C、RT、X、pre S中ccc DNA序列的突变。最后检测了肿瘤组织ccc DNA的AP位点。结果:HBV ccc DNA在癌组织的表达水平明显低于癌旁组织(3.32 copies/cell vs.9.64 copies/cell,P=0.029),但是HBV总DNA和pg RNA的表达没有明显差异(16.94 copies/cell vs.12.18 copies/cell,P=0.325,75.54 copies/cell vs.22.46 copies/cell,P=0.128);在肝癌组织中,HBV ccc DNA pre C/C和X区间,G-A突变是主要的突变类型;其次,pre C/C和X区域发生G-A突变的位置上,均更倾向于GA二联核苷酸组合方式,在肝癌中所占比例为37.1%和40%。最后,肿瘤组织中APE1酶处理后,HBV ccc DNA水平明显下降(1 011 copies/μl vs.501.8 copies/μl,P=0.058)。结论:HBV ccc DNA水平在癌组织中明显低于癌旁组织,可能与癌组织中HBV ccc DNA发生大量GA突变及形成的AP位点有关。
【作者单位】： 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室;
【关键词】： 乙型肝炎病毒 肝癌 HBV共价闭合环状DNA 序列突变
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81471945) 重庆市科委自然科学基金资助项目(编号:cstc2014jcyj A10075)
【分类号】：R512.62;R735.7
【正文快照】： 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发病的主要危险因素,超过60%的肝癌发生与慢性HBV感染密切相关[1]。HBV共价闭合环状DNA(covalently closedcircular DNA,ccc DNA)不仅是HBV DNA复制转录的模板,也是HBV持续感染的关键因素。HBV c

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本文编号：893319