肠道菌群与小细胞肺癌化疗相关性腹泻关系的研究

发布时间：2017-10-06 13:05

  本文关键词：肠道菌群与小细胞肺癌化疗相关性腹泻关系的研究

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【摘要】：研究背景:小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)是一种高侵袭性的神经内分泌肿瘤,它具有发展迅速、早期出现远处转移、对化疗高度敏感,但容易复发等特点[1],超过半数的患者在确诊时处于广泛期[2-3](Extensive disease,ED)。依据最新NCCN指南,SCLC的治疗仍以全身化疗为主[1]。化疗相关性腹泻(Chemotherapy Induced Diarrhea,CID)是化疗常见的并发症,轻则会导致患者的体质和生活质量的下降,降低患者的依从性,影响化疗的疗效,增加治疗费用,严重时,还可引起患者体内水、电解质紊乱,造成低血容量性休克,进而危及生命[4-7]。目前关于CID的具体发病机制仍不清楚,有研究报道肿瘤CID与肠道菌群的改变有关,探究肠道菌群的改变与SCLC化疗相关性腹泻的关系,对SCLC患者的治疗和生存具有深远意义。目的:探索小细胞肺癌化疗相关性腹泻与肠道菌群变化的关系,为小细胞肺癌化疗相关性腹泻的防治提供新思路。方法:1、样本收集:采集大连医科大学附属第二医院肿瘤科18例经病理确诊为小细胞肺癌患者,化疗前和化疗后出现CID的粪便(其中10例患者经EP方案化疗,8例经IP方案化疗),放置于-80℃冰箱冷冻保存。2、样本DNA提取:分别提取小细胞肺癌患者化疗前和化疗后出现CID粪便样本的肠道微生物基因组DNA。3、聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE):以粪便总DNA为模板,细菌16S r DNA V3区特异性引物进行PCR扩增,扩增产物行1.5%的琼脂糖凝胶电泳,以检测目的条带,进一步行DGGE,对所得DGGE指纹图谱进行分析,对差异比较明显的条带进行切胶测序,以分析其种属类别,探索小细胞肺癌患者化疗前与化疗后出现CID的肠道菌群变化。结果:1、DNA提取情况:18例SCLC患者化疗前和化疗后出现CID的粪便均可提取出DNA,各DNA样本浓度高低不同。2、EP方案化疗组的肠道菌群特征:由聚类分析和PCA主成分分析图可以看出,化疗前组与化疗后组形成了两个聚类群,差异显著。与化疗前组相比,化疗后组肠道细菌丰度增加(P0.05);多样性指数升高(P0.05),差异均无统计学意义。对化疗后亮度明显增高的1、2、3条带进行切胶测序,结果显示,条带1、2可能为普氏粪杆菌(Faecalibacterium prausnitzii),同源性分别为85%和93%;条带3为肺炎克雷伯菌(Klebsiella quasipneumoniae),同源性为99%。3、IP方案化疗组的肠道菌群特征:由聚类分析和PCA主成分分析图可以看出,化疗前组与化疗后组形成了两个聚类群,差异显著。与化疗前组相比,化疗后组肠道细菌丰度降低(P0.05),差异无统计学意义;多样性指数降低(P0.05),差异有统计学意义。对化疗后亮度明显降低的4、5条带进行切胶测序,结果显示,条带4可能为杆菌属(Prevotella stercorea),同源性为94%;条带5可能为Uncultured bacterium,同源性为81%。结论:1、EP方案所致的小细胞肺癌CID化疗前后的肠道菌群差异不显著。2、IP方案所致的小细胞肺癌CID患者肠道菌群的多样性比化疗前降低,差异有统计学意义。3、EP方案化疗后患者的肠道可能更易于肺炎克雷伯菌的定植生长,肠道内肺炎克雷伯菌的数量增加可能与EP方案导致的CID有关。
【关键词】：小细胞肺癌 化疗相关性腹泻 PCR-DGGE 肠道菌群
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2;R574.62
【目录】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-20
• 1. 材料14-16
• 1.1 实验样本收集14
• 1.2 实验试剂14-15
• 1.3 实验仪器15-16
• 1.4 实验数据分析软件16
• 2. 方法16-20
• 2.1 粪便样本DNA提取及浓度检测16-17
• 2.2 PCR-DGGE分析17-19
• 2.3 统计分析19-20
• 结果20-29
• 1. DNA样本提取情况20-21
• 2. 样本DNA PCR扩增情况21
• 3. A组样本化疗前与化疗后出现CID的肠道菌群变化21-25
• 3.1 A组样本化疗前后肠道菌群DGGE分析21-25
• 3.2 切胶测序25
• 4. B组样本化疗前与化疗后出现CID的肠道菌群变化25-29
• 4.1 B组样本化疗前后肠道菌群DGGE分析25-28
• 4.2 切胶测序28-29
• 讨论29-30
• 结论30-31
• 参考文献31-34
• 综述 伊立替康化疗相关性腹泻的研究进展34-42
• 参考文献39-42
• 致谢42-43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：982921