环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究

发布时间：2016-10-18 08:05

  本文关键词：环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究，由笔耕文化传播整理发布。

《天津医科大学》 2013年

环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究

苗青  

【摘要】：目的 体外研究环孢霉素A(CsA)对人晶状体上皮细胞(HLEB-3)抑制,计算CsA对人晶状体上皮细胞的半数有效抑制浓度；定量测定PCNA基因在无CsA处理的对照组与CsA处理的实验组中的表达,进一步探讨CsA抑制人晶状体上皮细胞增殖的分子作用机制,验证CsA与PCNA阳性细胞表达量的关系,为CsA修饰的IOL体内实验提供依据。 方法 体外培养来源于广州中山医科大学眼科中心的人晶状体上皮细胞株HLE B-3细胞。(1)细胞增殖实验的测定观察细胞增殖状态,实验设置10个细胞浓度梯度(0.125×104个/ml、0.25×104个/ml、0.5×104个/ml、1.0×104个/ml、1.5×104个/ml、2.0×104个/ml、2.5x104个/ml、3.0×104个/ml、3.5x104个/ml、4.0×104个/ml)。以2×104个/ml细胞密度种植96孔板,设置实验组与对照组,实验组给予CsA刺激,浓度为1ug/ml、2ug/ml、4ug/ml、8ug/ml、16ug/ml,作用时间24h、48h、72h,对照组无CsA刺激,作用时间24h、48h、72h。每组设2个平行复孔,重复3次。 (2)PCNA基因的表达测定以1×105个/ml的细胞密度接种于24孔板,实验组给予CsA刺激,浓度lug/ml,作用24h、48h,对照组无CsA刺激,应用RT-PCR检测PCNA基因的复制；应用组织免疫学方法检测PCNA阳性细胞的表达。每组设2个平行复孔,重复3次。 (3)RT-PCR结果应用2-△△CT统计量进行分析,免疫组织化学结果分别应用PI及IPP.5.0图像分析法。所有统计学数据,应用SPSS19.0进行统计学分析,检验水准a=0.05。 结果 (1)在低浓度时(1ug/m1)CsA作用24h对人晶状体上皮细胞的增殖抑制实验组与对照组差异不具有统计学意义(P0.05),作用48h对细胞增殖抑制实验组与对照组差异具有统计学意义(P0.05)。CsA作用24h,IC50=71.010±1.851μg/ml,Probit=-2.964+1.601x; CsA作用48h, IC50=25.529±1.407μg/ml,Probit=-1.363+1.969x; CsA作用72h, IC50=17.881±1.252μg/ml,Probit=-5.915+4.723x。CsA对HLEB-3细胞的抑制呈时间依赖性及浓度依赖性。 (2) RT-PCR测定,CsA lug/ml作用24hPCNA表达量实验组与对照组差异不具有统计学意义(P0.05),作用48hPCNA表达量实验组与对照组差异具有统计学意义(P,0.05)。 (3)免疫组织化学测定,CsA lug/ml作用24h、48hPCNA阳性细胞在实验组与对照组中,作用24h差异不具有统计学意义(P0.05)；作用48h差异具有统计学意义(P0.05)。 结论 (1) CsA1ug/ml作用24h,不能对HLE-B3增殖的抑制产生有效作用；在持续作用至48h时,CsA能够有效抑制HLEB-3细胞的增殖。CsA对HLEB-3细胞抑制呈时间依赖性；在有效抑制浓度(1ug/m1)下,CsA对HLEB-3的抑制呈浓度依赖性,其半数抑制率提高。 (2) CsA能够抑制PCNA基因的表达,且呈时间依赖性。环孢霉素A能够抑制PCNA蛋白的表达,且呈时间依赖性。 (3) CsA通过抑制抑制PCNA基因表达抑制HLEB-3细胞增殖。综上,CsA lug/ml持续作用至48h,能有效抑制HLE B-3细胞的增殖,干预后发性白内障的形成,为防治后发性白内障的可行性药物。此结果将为CsA修饰的载药性人工晶状体的体内实验提供依据。

【关键词】：
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R776.1
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 徐积恩;;环孢霉素A的临床应用进展[J];国外医药.合成药.生化药.制剂分册;1991年05期

2 吴冬梅;刘勇;段伟强;岑瑛;;重组人结缔组织生长因子对大鼠背部超长皮瓣成活的影响[J];四川大学学报(医学版);2008年01期

3 申屠形超,姚克,沈凌,周燕,孙朝晖;bFGF对人晶状体上皮细胞增殖的影响[J];眼科新进展;2000年02期

4 李立,汤永强;阿霉素防治兔后囊混浊的实验与临床研究[J];眼科新进展;2001年05期

5 姬红培;吴明星;张唯伟;;后发性白内障的研究进展[J];眼科新进展;2007年08期

6 王杰,康凤英,孙靖,李坤;环孢素A对晶状体上皮细胞的影响[J];眼科研究;2002年05期

7 谭健,姚克,王凯军,徐雯,申屠形超;环孢素A对兔晶状体上皮细胞增殖的影响[J];眼科研究;2005年02期

8 刘欣华,刘奕志,柳夏林,吴明星;成纤维细胞生长因子与后发性白内障的关系[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);2002年02期

9 彭惠,李平华,罗莉霞,骆云鹏,汤为学;碱性成纤维细胞生长因子对兔晶体上皮细胞增殖作用的免疫组织化学研究[J];中国病理生理杂志;2000年10期

10 储榆林,张茂宏,吴梓梁,林果为,徐世荣,李蓉生,周霭祥,殷德厚;再生障碍性贫血的药物治疗[J];中华血液学杂志;1999年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 邵佳;再生障碍性贫血病因病机探讨[J];中医药临床杂志;2005年03期

2 蔡晓燕,贺学姣;大剂量静脉丙球治疗慢性再生障碍性贫血1例[J];中国输血杂志;2001年02期

3 张勇,裴莉,张红宾,张一军,张林生;环孢霉素A治疗再生障碍性贫血疗效观察[J];第三军医大学学报;2001年11期

4 周亚庄;;后囊膜截开防治外伤性白内障术后后囊膜混浊[J];临床医学;2011年06期

5 陈迎月,翁景宁;药物防治后发性白内障研究进展[J];福建医科大学学报;2005年S1期

6 王军;曾琼英;;不同手术方式对白内障术后并发后囊混浊的影响[J];广东医学;2005年11期

7 包睿,柳林;细胞因子与晶状体上皮细胞增殖[J];国际眼科杂志;2004年01期

8 曲勃,张劲松;bFGF对人晶状体上皮细胞系内钙离子及IP3R、RyR的作用[J];国际眼科杂志;2005年02期

9 王智;何湘珍;彭辉灿;肖启国;刘嘉毅;;苦参碱体外对兔晶状体上皮细胞细胞周期的影响[J];国际眼科杂志;2010年02期

10 黄淑环;蔡成才;伍锦泉;梁卓林;梁月雄;;再生障碍性贫血41例临床分析[J];国际医药卫生导报;2006年01期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 白薇;李柳;刘驰;张姗姗;肖海燕;郑春梅;徐述;唐旭东;刘锋;麻柔;;环孢霉素A治疗单纯红细胞再生障碍性贫血血药浓度与疗效关系探讨[A];全国中西医结合血液学学术会议论文汇编[C];2010年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 胡永珍;活髓片治疗再障的临床和实验研究[D];广州中医药大学;2002年

2 于壮;补髓生血冲剂抑制慢性再生障碍性贫血患者骨髓造血细胞凋亡的研究[D];黑龙江中医药大学;2002年

3 曲勃;bFGF诱导的增殖人晶体上皮细胞内Ca～(2+)调控的初步研究[D];中国医科大学;2002年

4 许华;重用龟版治疗肾阴虚再生障碍性贫血的临床分析与实验研究[D];广州中医药大学;2005年

5 谭少健;正常及糖尿病兔后囊膜混浊发生过程中Kistrin调控晶状体上皮细胞胶原代谢的分子机制[D];广西医科大学;2010年

6 王吉昌;低氧预处理的BMSCs移植对超长宽比例随意型皮瓣成活率的影响[D];山东大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杜娟;囊袋内注入5-氟尿嘧啶抑制后囊膜混浊的临床研究[D];郑州大学;2010年

2 韦琦;去整合素Kistrin对糖尿病兔后囊膜混浊过程中晶状体上皮细胞增殖、Connexin43和Ⅳ型胶原表达的早期影响[D];广西医科大学;2011年

3 刘艳玲;富马酸亚铁叶酸分散片的临床前研究[D];西南大学;2011年

4 张荣华;腧穴敷贴配合加味右归补肾方治疗慢性再生障碍性贫血脾肾阳虚证临床观察[D];湖南中医药大学;2011年

5 赵颖;人参皂苷Rg3对人晶状体上皮细胞生长的抑制作用[D];辽宁医学院;2011年

6 李秋实;维拉帕米对体外培养的人晶状体上皮细胞增殖和黏附的抑制作用[D];辽宁医学院;2011年

7 吴雷;补髓生血颗粒治疗慢性再障及对骨髓单个核细胞MEK的影响[D];黑龙江中医药大学;2011年

8 哈玲芳;碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的人晶状体上皮细胞增殖及移行作用的研究[D];宁夏医科大学;2011年

9 赵玲;益髓生血方为主治疗慢性再生障碍性贫血的疗效观察及其机理探讨[D];山东中医药大学;2001年

10 王军;大白鼠急性再生障碍性贫血模型的建立及褪黑素早期干预的初步研究[D];安徽医科大学;2002年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郭海科;晶体上皮细胞清除和抑制与后囊混浊[J];国外医学.眼科学分册;1994年03期

2 郭庆,温进坤;碱性成纤维细胞生长因子[J];生命科学;1997年01期

3 李立,汤永强;阿霉素防治兔后囊混浊的实验与临床研究[J];眼科新进展;2001年05期

4 黄秀榕,祁明信,康可人;榄香烯诱导晶状体上皮细胞凋亡及其细胞和分子机制[J];中国病理生理杂志;2005年05期

5 王兆艳，惠延年，，胡明;环孢霉素A对体外培养人视网膜色素上皮细胞的抑制[J];中华眼底病杂志;1995年01期

6 王冰,翁景宁;腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷体系对晶状体上皮细胞的作用[J];中华眼科杂志;2002年10期

7 周朝晖,何守志,陈香美,陈中华;人工晶体植入术后房水肿瘤坏死因子和白细胞介素1含量的研究[J];中华眼科杂志;1996年04期

8 李立,李绍珍;阿霉素对兔晶体上皮细胞凋亡的诱导[J];中华眼科杂志;1998年06期

9 仇树林;谢祥;胡国栋;;锌对皮瓣缺血再灌注损伤细胞保护作用的研究[J];中国修复重建外科杂志;2005年12期

10 郭海科;人晶体上皮细胞密度及形态学观察[J];中国实用眼科杂志;1995年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 姚刚;谭少健;;整合素在晶状体上皮细胞的表达与后发性白内障的关系[J];西部医学;2007年05期

2 刘建亭;张素华;刘杰为;钱军;;依地酸二钠预防后发性白内障的实验研究[J];临床眼科杂志;2008年01期

3 解芳;钟洪珊;张林;;后发性白内障发生机制研究进展[J];现代生物医学进展;2008年04期

4 冯希敏;张凤妍;张岩;;奥曲肽对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增殖的影响[J];眼科新进展;2010年11期

5 王智;杨静;张明昌;;8-氯腺苷对抑制人晶状体上皮细胞增生的体外研究[J];临床眼科杂志;2006年01期

6 王智;范可顺;;维生素E琥珀酸酯对人晶状体上皮细胞增殖的影响[J];临床眼科杂志;2007年01期

7 向建南;王国华;张海江;霍鸣;;不同的给药途径防治后发性白内障[J];国际眼科杂志;2010年06期

8 姬红培;吴明星;张唯伟;;后发性白内障的研究进展[J];眼科新进展;2007年08期

9 李立!400010,汤永强!400010;阿霉素防治兔后囊混浊的实验与临床研究[J];眼科新进展;2001年05期

10 刘新昌,王銮弟;丝裂霉素C防治兔后发性白内障的实验观察[J];潍坊医学院学报;2005年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 黄秀榕;祁明信;李坤鹏;陈义;;尾加压素Ⅱ体外促进晶状体上皮细胞增殖的细胞信号转导机制[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

2 詹敏;李志英;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞作用的透射电镜观察[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年

3 谢伟英;徐国兴;庄华;;CTGF及其反义寡核苷酸对体外培养的人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2的影响研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年

4 徐国兴;崔丽金;;石决明对体外培养晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用的研究[A];第十届全国中西医结合眼科学术会议暨第五届海峡眼科学术交流会论文汇编[C];2011年

5 俞一波;姚克;吴炜;;急性手机微波辐射对人眼晶状体上皮细胞热休克蛋白表达的影响[A];2007年浙江省眼科学术会议论文集[C];2007年

6 张海燕;杨金玲;张苏炯;夏园玲;屠云松;于燕妮;;多聚赖氨酸与EDTA的交联物防治兔眼后囊膜混浊的实验研究[A];2007年贵州省医学会眼科学分会第五届第三次学术年会论文汇编[C];2007年

7 严京;祁明信;黄秀榕;;阿魏酸钠防护晶状体上皮细胞氧化损伤及其蛋白质组学研究[A];中医药中青年科技创新与成果展示论坛论文集[C];2009年

8 严京;祁明信;黄秀榕;;阿魏酸钠防护晶状体上皮细胞氧化损伤及其蛋白质组学研究[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集（3）[C];2009年

9 詹敏;李志英;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞作用的透射电镜观察[A];第十二届广东省视光学学术会议专题讲座、论文汇编[C];2009年

10 詹敏;李志英;代秋楠;;内障丸加减方对氧化损伤晶状体上皮细胞凋亡及相关基因的影响[A];第十二届广东省视光学学术会议专题讲座、论文汇编[C];2009年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 张中桥;[N];中国医药报;2002年

2 王振岭;[N];中国医药报;2002年

3 余宁宁 李水根;[N];健康报;2003年

4 丁香园;[N];健康报;2005年

5 卢安卫 王其玲 李水根;[N];健康报;2006年

6 宗宇;[N];中国医药报;2006年

7 解放军总医院药材处 周筱青 陈宜鸿;[N];中国高新技术产业导报;2001年

8 陆志城;[N];医药经济报;2006年

9 ;[N];医药养生保健报;2006年

10 刘文山;[N];健康报;2002年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 张一栋;1.8GHz微波辐射对人晶状体上皮细胞蛋白质表达影响的研究[D];浙江大学;2012年

2 张志勇;小窝蛋白-1在高糖诱导的人晶状体上皮细胞凋亡调控中的作用[D];浙江大学;2009年

3 邢星;组织型转谷氨酰胺酶在后囊膜混浊中的作用研究[D];华中科技大学;2010年

4 包秀丽;Wnt信号诱导人晶状体上皮细胞上皮间充质转化和增殖的研究[D];天津医科大学;2012年

5 柳珑;GEFT调节晶状体上皮细胞分化的机制研究[D];湖南师范大学;2011年

6 安小玲;肝细胞生长因子对人晶状体上皮细胞影响的实验研究[D];中国医科大学;2006年

7 刘芳;抗Ⅳ型胶原抗体偶联金雀异黄素抑制后发障的研究[D];中国医科大学;2007年

8 陶津华;表皮生长因子对体外培养的人晶状体上皮细胞移行和粘附的作用的实验研究[D];中国医科大学;2006年

9 张瑞君;PKB及其调节因子FGF、PTEN在晶状体上皮细胞增殖中的作用[D];中国医科大学;2005年

10 谭少健;正常及糖尿病兔后囊膜混浊发生过程中Kistrin调控晶状体上皮细胞胶原代谢的分子机制[D];广西医科大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 苗青;环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究[D];天津医科大学;2013年

2 李凤至;激活素A抑制人晶状体上皮细胞增殖的实验研究[D];吉林大学;2011年

3 冯希敏;LY294002对bFGF诱导的兔眼晶状体上皮细胞增殖的影响[D];郑州大学;2010年

4 金海鹰;晶状体上皮细胞端粒酶活性及衰老、凋亡的实验研究[D];暨南大学;2003年

5 李丹;PI3K抑制剂LY294002对人晶状体上皮细胞增殖的影响[D];中国医科大学;2010年

6 李姗姗;七叶皂苷钠体外对大鼠紫外线所致晶状体上皮细胞NF-κB表达的影响[D];兰州大学;2011年

7 赵瑞苓;外源表达人激活要素受体ⅡA对人晶状体上皮细胞增殖的影响[D];吉林大学;2012年

8 刘亚会;人晶状体上皮细胞中bax的表达与白内障形成的相关性研究[D];大连医科大学;2010年

9 赵颖;人参皂苷Rg3对人晶状体上皮细胞生长的抑制作用[D];辽宁医学院;2011年

10 魏远建;晶状体上皮细胞内Ca~(2+)浓度变化对AQP1表达及细胞活性的影响[D];福建医科大学;2013年

  本文关键词：环孢霉素A对人晶状体上皮细胞抑制的体外研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：144298