乙酰胆碱酯酶（AChE）缺失对年龄相关性黄斑变性疾病（AMD）的保护作用

  本文关键词：乙酰胆碱酯酶（AChE）缺失对年龄相关性黄斑变性疾病（AMD）的保护作用，由笔耕文化传播整理发布。

《南昌大学医学院》 2015年

乙酰胆碱酯酶（AChE）缺失对年龄相关性黄斑变性疾病（AMD）的保护作用

徐曼  

【摘要】：目的:探讨乙酰胆碱酯酶缺失对年龄相关性黄斑变性疾病的细胞凋亡的保护作用及机制。方法:培养人视网膜色素上皮细胞株(ARPE19)至对数生长期,加入碘酸钠浓度梯度:0.1mM,1mM,10mM。培养24h后,进行乙酰胆碱酯酶(AchE)免疫荧光检测及MTT法进行细胞活力检测,找出最佳浓度。然后体外实验,沉默人视网膜上皮细胞株(ARPE19)的AChE基因及预处理乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEI)多奈哌齐两种方法;体外实验采用AChE-/+和AChE+/+老鼠经尾静脉注射25mg/kg碘酸钠,之后进行AChE、Cleaved Caspase-3的免疫荧光、TUNEL法检测凋亡数量、Cell ROS及提取各实验组的蛋白后用蛋白印迹法检测各实验组AChE、Cleaved Caspase-3和NOX2表达量。结果:MTT值,碘酸钠组的细胞活力明显低于对照组,且具浓度依赖性。碘酸钠组的乙酰胆碱酯酶(AChE)表达量也明显高于对照组,且具有浓度梯度性,差异具有统计学意义(P0.01)。TUNEL法细胞凋亡数明显少于对照组,且差异具有统计学意义(P0.05)。蛋白印迹和免疫荧光检测得出在体外体内缺失AChE后,NOX2表达量也相应少于对照组,Cell ROS实验也证明其ROS含量也相应少于对照组,差异具有统计学意义(P0.05),说明其氧化应激反应被抑制。结论:碘酸钠诱导ARPE19细胞凋亡过程中,乙酰胆碱酯酶表达量增高,且具有浓度梯度性。缺失AChE后,其凋亡细胞数量减少,并且氧化应激反应被抑制。

【关键词】：
【学位授予单位】：南昌大学医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R774.5
【目录】：

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