不同病程糖尿病大鼠视网膜病理改变及其VEGF、PEDF的动态表达

  本文关键词：不同病程糖尿病大鼠视网膜病理改变及其VEGF、PEDF的动态表达，由笔耕文化传播整理发布。

《宁夏医科大学》 2013年

不同病程糖尿病大鼠视网膜病理改变及其VEGF、PEDF的动态表达

李小璐  

【摘要】：目的：观察不同病程糖尿病大鼠视网膜的病理改变并对其VEGF、PEDF的动态表达进行研究，以探讨糖尿病发展过程中视网膜发生的病理改变及其VEGF、PEDF在糖尿病视网膜病变发展中的意义。 方法：雄性SD大鼠123只，随机分为正常对照1个月组（CON1组）、正常对照3个月组（CON2组）、正常对照5个月组（CON3组），每组各20只，糖尿病1个月组（DM1组）、糖尿病3个月组（DM2组）和糖尿病5个月组（DM3组），每组各21只。DM1组、DM2组及DM3组大鼠通过一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病模型。于成模后1个月、3个月、5个月分别随机抽取相应糖尿病组及正常对照组大鼠，通过透射电镜切片技术、视网膜HE染色、EB染色视网膜铺片、视网膜EB含量测定来观察不同病程糖尿病大鼠视网膜的病理改变。同时，用免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR及Western-blot技术检测大鼠视网膜VEGF、PEDF的动态表达。 结果：糖尿病1个月组大鼠视网膜细胞超微结构已出现改变，且随病程延长，糖尿病大鼠视网膜细胞病变逐渐加重。视网膜HE染色示随病程延长糖尿病大鼠视网膜各层细胞病理改变加重。EB染色视网膜铺片显示正常对照组视网膜血管形态正常；DM1组大鼠视网膜血管走行较规则；DM2组大鼠视网膜血管走行出现迂曲，部分血管形态出现改变，伴少量荧光渗漏；DM3组大鼠视网膜血管迂曲明显，走行紊乱，管径粗细不均，出现大量荧光渗漏。各糖尿病组大鼠视网膜EB含量均大于正常对照组， DM1组、DM2组、DM3组视网膜EB含量分别为15.786±1.848（ng/mg）、21.596±1.922（ng/mg）、26.310±2.179（ng/mg），即随时间延长，视网膜EB含量增大，且差异有统计学意义（P0.05）。视网膜免疫组化显示视网膜VEGF阳性染色随病程进展而增强，，且MOD值也不断增大，CON1组、CON2组、CON3组、DM1组、DM2组、DM3组视网膜MOD值分别为0.215±0.019、0.225±0.024、0.215±0.021、0.302±0.031、0.523±0.047、0.748±0.078，且各比较组间差异均有统计学意义（P0.05）；PEDF阳性染色随病程进展而减弱，且MOD值也不断减小，CON1组、CON2组、CON3组、DM1组、DM2组、DM3组视网膜MOD值分别为0.908±0.073、0.915±0.031、0.898±0.029、0.735±0.087、0.607±0.055、0.187±0.039，且各比较组间P0.05。qPCR示随病程延长，糖尿病组大鼠视网膜VEGF mRNA表达量与正常对照组相比不断增多，CON1组、CON2组、CON3组、DM1组、DM2组、DM3组VEGF表达量分别为0.105±0.014、0.099±0.129、0.106±0.012、0.372±0.037、1.031±0.095、2.364±0.198，且各比较组间P0.05；糖尿病组大鼠视网膜PEDF mRNA表达量与正常对照组相比不断减少，CON1组、CON2组、CON3组、DM1组、DM2组、DM3组视网膜PEDF表达量分别为2.643±0.188、2.589±0.136、2.533±0.1521.528±0.093、0.905.±0.111、0.254±0.077，且各组间P0.05。Western-blot示随病程进展，糖尿病组大鼠视网膜VEGF蛋白含量增加，PEDF蛋白含量减少。CON1组、CON2组、CON3组、DM1组、DM2组、DM3组VEGF蛋白表达量分别为0.328±0.028、0.317±0.048、0.331±0.035、0.436±0.034、0.651±0.028、0.793±0.026，各比较组间P0.05；PEDF表达量分别为0.796±0.063、0.802±0.034、0.799±0.041、0.605±0.086、0.424±0.065、0.263±0.067，且各比较组间P0.05。 结论：1.糖尿病大鼠视网膜细胞超微结构病理改变是最早能观察到的视网膜组织病变，且其病变程度随病程进展而加重；2.糖尿病大鼠视网膜血管形态结构在糖尿病病程中、后期开始发生病变，且随病程进展而加重；3.糖尿病大鼠血-视网膜屏障功能在病程初期已出现损害，且其严重程度随病程进展而加重；4.视网膜VEGF、PEDF表达失衡在糖尿病初期就已存在，随病程进展，VEGF表达不断增多，PEDF表达不断减少，即二者的失衡存在于糖尿病发展全程。

【关键词】：
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1;R587.2
【目录】：

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