地塞米松联合曲安奈德对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用
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《河北联合大学》 2014年
地塞米松联合曲安奈德对兔视网膜缺血再灌注损伤的保护作用
李杏
【摘要】:目的探讨地塞米松联合曲安奈德玻璃体腔注射在兔视网膜缺血再灌注损伤(retina ischemia-reperfusion injury, RIRI)中的作用,为地塞米松联合曲安奈德在治疗RIRI方面提供实验依据,并为临床治疗具有RIRI病理过程的疾病探索新的治疗途径。 方法体重2.0~2.5kg的纯种日本大耳白兔81只,健康雄性,随机分为3组。第1组5只,为正常对照组,不做任何处理。另2组为实验损伤组76只,其中右眼为损伤治疗组,左眼为损伤对照组,均通过前房灌注升高眼内压的方法制作RIRI模型,伤后立即右眼玻璃体腔注射地塞米松与曲安奈德的混合液100ul(体积比1:1),左眼玻璃体腔注射等量的乳酸钠林格注射液作为对照。实验损伤组分别于缺血即时、再灌注后6h、12h、24h、48h、72h、1w每个时间点各取4只兔子活体行眼底照相及造影,正常对照组任选2只兔子用于眼底照相及眼底荧光血管造影(fundus fluorescein angiography, FFA)。另外,实验损伤组分别于再灌注后1h、6h、12h、24h、48h、72h、1w每个时间点各取6只兔处死后立即取眼球组织,行HE染色,免疫组化检测wt-p53和Caspase-3蛋白的表达,正常对照组取3只兔行此检测;实验损伤组另取6只兔于造模前、造模后1h、6h、12h、24h、48h、72h、1w重复行光学相干断层扫描(optical coherence tomography, OCT)检查,精确测量视网膜厚度。所得结果进行图像分析,数据资料均用SPSS17.0软件包进行统计分析。 结果1眼底照相:正常兔视网膜呈橘红色,血管走行良好;缺血后视网膜颜色苍白,血管闭塞;再灌注后视网膜呈暗红色,血管扩张,视网膜逐渐水肿并可见白色棉絮状渗出,24h表现最重。损伤治疗组与损伤对照组同一时间点相比,视网膜水肿及白色棉絮状渗出程度轻。2FFA检查:正常眼底血管造影未见荧光素渗漏;高眼压后荧光素积存于视盘,视网膜血管未见荧光素充盈;再灌注后视盘及视网膜血管恢复充盈,可见荧光素渗漏及无灌注区,24h荧光素渗漏达最大量;损伤治疗组与损伤对照组同一时间点比较,血管闭塞程度轻,荧光素渗漏少。3OCT检查:损伤对照组与损伤治疗组损伤后1w视网膜厚度分别与损伤前相比均变薄,差异有统计学意义(P0.05);损伤后1w时间点,损伤对照组视网膜厚度薄于损伤治疗组,差异有统计学意义(P0.05)。损伤前到损伤后24h时间段,组间处理因素、时间因素、处理因素和时间因素交互效应差异均有统计学意义(P0.05);损伤后24h~1w时间段,组间处理因素、时间因素、处理因素和时间因素交互效应差异均有统计学意义(P0.05)。4HE染色:正常兔视网膜三层细胞分界清楚,细胞排列整齐而紧密损伤对照组再灌注后视网膜水肿逐渐加重,细胞间隙逐渐增大,核固缩散在分布于视网膜神经节细胞层及内核层,上述现象以24h最严重;48~72h视网膜水肿逐渐减轻,视网膜神经节细胞及内核层细胞数量减少;1w时视网膜水肿完全消失,视网膜神经节细胞及内核层细胞明显减少,神经纤维层及内丛状层萎缩变薄。损伤治疗组再灌注后各时间点视网膜病理变化与损伤对照组一致,但较损伤对照组轻。5wt-p53和Caspase-3蛋白免疫组织化学染色:正常视网膜未检测到棕黄色的阳性细胞。损伤对照组再灌注后1h神经节细胞层偶见阳性细胞;6h阳性细胞数开始增多,主要在视网膜神经节细胞层;12h阳性细胞数进一步增多,主要在视网膜神经节细胞层,内核层也有少量阳性细胞;24h阳性细胞数达高峰,,此时除在神经节细胞层外,内核层也见部分阳性细胞;48h仍见大量阳性细胞;72h已明显下降;1w时基本未见阳性细胞。损伤治疗组wt-p53和Caspase-3阳性细胞数变化趋势同损伤对照组,但在6~72h期间,同一时间点损伤治疗组wt-p53和Caspase-3阳性细胞数明显少于损伤对照组(P0.05)。损伤对照组和损伤治疗组组内相邻时间点之间比较差异有统计学意义(p0.05),wt-p53和Caspase-3阳性细胞数均在24h达高峰。 结论1视网膜水肿是RIRI的表现之一,细胞凋亡可能是RIRI的最终结局;2地塞米松联合曲安奈德通过减轻视网膜水肿及抑制细胞凋亡保护RIRI;3OCT检查在评估RIRI的程度及治疗效果中具有极高的应用价值。
【关键词】:
【学位授予单位】:河北联合大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R774.1
【目录】:
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