兔自身免疫性干眼调节性T细胞及细胞因子的研究

  本文关键词：兔自身免疫性干眼调节性T细胞及细胞因子的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《天津医科大学》 2013年

兔自身免疫性干眼调节性T细胞及细胞因子的研究

边领斋  

【摘要】：目的 干眼是眼科最常见疾病之一,而自身免疫性干眼如Sjogren's综合征(Sjogren's syndrome, SS)相关干眼是泪液缺乏型干眼的主要原因。干燥综合征的发病机制尚未明确,研究认为免疫调节、激素、基因、病毒、神经和环境改变等众多因素均参与了SS的致病过程。近年研究指出,调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)功能异常促进了干燥综合征的发生发展。本文的研究目的是建立稳定的兔自身免疫性干眼模型,结合临床表现、组织病理,对泪液系统内调节性T细胞及相关细胞因子的表达进行分析,研究调节性T细胞在自身免疫性干眼发病中所起作用。 方法 1.分离提纯兔泪腺上皮细胞,对分离的原代细胞进行活性鉴定并培养。 2.泪腺上皮细胞独立培养2天后,分离自体外周血淋巴细胞,以1：1比例将二者混合培养。BrdU检测外周血淋巴细胞的增殖比率。 3.诱导兔自身免疫性干眼：将激活的自体淋巴细胞经耳缘静脉回输供体兔体内。回输细胞前及回输后2周、4周、6周、8周分别观察兔角膜染色、泪膜破裂时间、泪液分泌等临床体征,回输细胞4周后处死,收集双侧上泪腺、下泪腺及结膜进行组织病理HE染色。 4.取泪腺组织提取总RNA, real-time PCR检测细胞因子IL-6、IL-10、IL-17、TNF-a、TGF-β、IFN-γ的表达。 5.流式细胞仪检测泪腺组织、脾脏中CD4+CD25+Treg比例变化。 6.免疫磁珠分选CD4+CD25+Treg,使其与泪腺上皮细胞及外周血T淋巴细胞混合共培养,BrdU检测CD4+CD25+Treg对效应T细胞是否起到抑制作用。 结果 1.成功分离获得纯度较高的兔泪腺上皮细胞。 2.建立兔泪腺上皮细胞与自体外周血淋巴细胞的混合共培养体系,自体外周血淋巴细胞被泪腺上皮细胞激活,BrdU检测增殖比率为3.71。 3.成功建立兔自身免疫性干眼模型：激活的淋巴细胞回输回体内可以诱导产生兔自身免疫性干眼。与正常组相比,干眼模型组泪液分泌显著减少(P0.05),泪膜破裂时间缩短(P0.05),荧光素钠染色显示角膜弥漫点状着色。静脉注射激活的淋巴细胞4周后,泪腺和结膜组织HE染色均显示淋巴细胞浸润。 4. real-time PCR结果显示,与对照组相比,干眼模型组泪腺中炎性因子IL-6、IL-17、TNF-a、IFN-γ的表达呈不同程度增加,抑炎因子IL-10,TGF-p的表达明显降低(P0.05)。 5.流式细胞术检测结果显示,在兔干眼模型中,脾脏和泪腺组织中CD4+CD25+Treg细胞比例降低。 6. CD4+CD25+Treg可以抑制泪腺特异性效应T细胞的增殖。 结论 经自体泪腺细胞刺激激活的外周血淋巴细胞通过耳缘静脉回输后可诱导稳定的兔干眼模型,在兔干眼发病过程中,CD4+CD25+Treg细胞免疫抑制作用减弱,Th17细胞功能亢进,细胞因子TNF-a、IFN-γ、IL-10、TGF-β、IL-6参与泪腺中炎症反应。

【关键词】：
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R777.34
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘冬梅,毕宏生,卢秀珍;超声乳化治疗白内障合并干眼23例临床观察[J];山东医药;2004年09期

2 Scot E.Moss ,Ronald Klein ,Barbara E.K.Klein;干眼在老龄人群中的发病率[J];眼科新进展;2005年03期

3 陈继敏;谈老年干眼症[J];家庭医学;1995年08期

4 汤萍,汤萌;虎红染色剂在干眼诊断中的应用[J];中国实用眼科杂志;2003年02期

5 张汗承，周祖廉，赵成荣，李燕先;干眼病记分分级和人工泪疗效评价的研究[J];眼科研究;1994年01期

6 吕帆,瞿佳;干眼症的临床诊断研究[J];中国实用眼科杂志;2002年07期

7 雷澄;罗晓亮;;准分子激光原位角膜磨镶术后干眼和屈光回退的相关性(英文)[J];国际眼科杂志;2009年11期

8 施立红;泪管阻塞法治疗老年性干眼20例报告[J];交通医学;1997年01期

9 赵萍;宋秀君;赵霞;;雌雄激素对去卵巢雌鼠泪腺TGF-β_1表达的影响[J];眼科研究;2009年04期

10 刘祖国,罗丽辉,程冰,张振平,张梅,肖启国,王智崇,黄挺,陈家祺,张志红;干眼仪在干眼诊断中的价值初步评价[J];中国实用眼科杂志;2003年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张玥;刘政;刘明;侯玉芬;王彬;;清热活血中药对深静脉血栓形成大鼠血清炎症细胞因子的影响研究[A];中华中医药学会周围血管病分会学术大会论文集（二）[C];2009年

2 庞勇;李雁;邹卓成;林军;何列涛;刘运珠;;益肾调督针法对脑梗塞恢复期细胞因子的影响[A];泛中医论坛·思考中医2006——经典中医的特色和优势论文集[C];2006年

3 张理涛;于广新;张玉环;卢桂玲;;牛磺酸对寻常性银屑病患者外周血单一核细胞产生细胞因子的影响[A];中华中医药学会皮肤科分会第四次学术年会;全国中医、中西医结合皮肤病诊疗新进展高级研修班论文集[C];2007年

4 张玉敏;石新钢;郭丽;段志文;马明月;裴秀丛;;DEHP对原代淋巴细胞Th1/Th2平衡的影响[A];中国环境诱变剂学会第14届学术交流会议论文集[C];2009年

5 吴稚冰;许亚萍;马胜林;吴伟;冯建国;姜初明;楼中平;;旋转磁场对大鼠放射性食管炎的防治[A];2009年浙江省放射肿瘤治疗学学术年会论文汇编[C];2009年

6 丁进;冯媛;朱平;;强直性脊柱炎患者单核/巨噬细胞分泌的细胞因子的研究[A];全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编[C];2009年

7 张玉环;廉信;邢艳玲;刘艳华;;雷公藤多苷对变应性接触性皮炎患者细胞因子表达影响的研究[A];中华医学会2009年全国变态反应学术会议论文汇编[C];2009年

8 孙华;赵慧;张捷;包飞;魏镜;王道海;张云祥;;电针百会、足三里对抑郁症患者血清中炎性细胞因子水平的影响[A];中国针灸学会2009学术年会论文集（下集）[C];2009年

9 侯桂华;;猪皮片移植对HLA-DR4转基因小鼠细胞因子产生的影响[A];山东免疫学会、山东微生物学会医学微生物学专业委员会、山东省医学会微生物学和免疫学专业委员会、山东省医药生物技术学会2001年学术年会论文汇编[C];2001年

10 林俊杰;邱颖婕;冯明亮;马庆;范华骅;钱开诚;;多合一浓缩血小板在保存期中的活化情况的研究[A];第三届全国血液免疫学学术大会论文集[C];2003年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 董晨　顾德宁;[N];新华日报;2004年

2 吴一福;[N];中国医药报;2005年

3 杨慎峭 刘旭光 余曙光;[N];中国医药报;2005年

4 许沈华;[N];家庭医生报;2007年

5 赵喜明;[N];中国医药报;2004年

6 新言;[N];科技日报;2005年

7 陈金伟;[N];中国医药报;2006年

8 科文;[N];中国医药报;2006年

9 正;[N];中国高新技术产业导报;2001年

10 曹阳;[N];健康报;2007年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 宋春辉;模拟HCV HVR1免疫7肽对人不同免疫细胞分泌细胞因子影响的初步研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2008年

2 戴钟铨;模拟失重条件下骨相关细胞因子对前成骨细胞的调控作用研究[D];第四军医大学;2011年

3 刘占国;应用全血细胞因子谱评估肾移植受者免疫状态[D];南方医科大学;2010年

4 敬晓棋;乳腺炎细胞因子及T淋巴细胞亚群研究[D];西北农林科技大学;2013年

5 吕琼霞;运输应激对猪免疫机能的影响及其调控机理初探[D];南京农业大学;2009年

6 林云斌;昆母汤对RA滑膜成纤维细胞增殖及细胞因子表达的影响[D];广州中医药大学;2013年

7 郭慧;Toll样受体介导角膜真菌感染炎症反应的作用及基因沉寂治疗研究[D];山东大学;2010年

8 姜春来;细胞因子对HIV-1疫苗DNA prime/MVA boost的加强作用[D];吉林大学;2005年

9 岳欣;CIK细胞治疗恶性实体瘤的临床前研究[D];天津医科大学;2005年

10 张晓红;T-依赖性B淋巴细胞激活机制的探讨[D];中国协和医科大学;1993年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 常静;干眼患者结膜IL-1β的表达和意义[D];山西医科大学;2012年

2 张贺;干眼Ⅰ号方治疗肝肾阴虚型干眼的疗效观察[D];北京中医药大学;2010年

3 姬亚鹏;IL-2与白内障超声乳化术后干眼的相关研究[D];中南大学;2011年

4 董学梅;中药治疗白内障超声乳化术后干眼的临床观察[D];南京中医药大学;2012年

5 侯乐;逍生散颗粒剂对干眼免疫、内分泌及泪膜影响的研究[D];中国中医科学院;2012年

6 陈妍遐;转化生长因子β1在干眼患者眼表的表达研究[D];山西医科大学;2012年

7 官宇;大连眼科门诊眼干涩患者调查[D];大连医科大学;2011年

8 边领斋;兔自身免疫性干眼调节性T细胞及细胞因子的研究[D];天津医科大学;2013年

9 邓妮妮;蒸发过强型干眼的抗炎对比研究[D];广西医科大学;2010年

10 张亚;海藻糖对大鼠蒸发过强型干眼作用机制及疗效的实验研究[D];辽宁医学院;2011年

  本文关键词：兔自身免疫性干眼调节性T细胞及细胞因子的研究，由笔耕文化传播整理发布。