TFDG、EGCG、EGC对高糖诱导的人晶状体上皮细胞的作用及机制的研究
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《湖南农业大学》 2014年
TFDG、EGCG、EGC对高糖诱导的人晶状体上皮细胞的作用及机制的研究
牛丽
【摘要】:糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)是全世界流行的一种代谢性疾病,糖尿病性白内障(Diabetic Cataract, DC)是糖尿病最常见的并发症之一,该病的发生可能与糖、脂肪酸、氨基酸以及核苷等多个代谢途径相关。茶叶富含茶多酚等多种功能物质,具有较强的降血糖和抗氧化作用,并可用于拮抗高浓度葡萄糖导致的细胞损伤。本文研究了高糖对人晶状体上皮细胞(HLECs)的损伤及TFDG、EGCG、EGC对高糖致损细胞的修复作用。通过MTT试验筛选葡萄糖造模的最佳浓度和时间以及TFDG、EGCG、EGC对造模细胞保护作用的浓度,采用硝酸还原法和比色法检测细胞内SOD、CAT、 GSH-Px、iNOS的活性及MDA、NO含量,并利用RT-PCR检测细胞MnSOD、iNOS、NF-kB、 Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA表达量,结果表明:(1)一定浓度范围内的葡萄糖可促进HLEC细胞增殖,随着葡萄糖的浓度升高,作用时间增加,就会对细胞造成氧化损伤。其中,50mM高糖处理HLEC细胞24h可导致细胞形态发生变化,细胞存活率下降;(2)8~32μM浓度的TFDG、EGCG以及16~64μ M浓度EGC处理高糖诱导的HLEC细胞24h后,细胞存活率随处理浓度的增加而上升,呈剂量依赖关系,其中32μM浓度EGCG的促进能力最强;(3)16~64μM浓度的TFDG、EGCG、EGC处理高糖诱导的HLEC细胞24h后,使细胞体内SOD、CAT、GSH-Px、iNOS的活性显著提高,MDA、NO的含量下降;(4)50mM高糖诱导的HLEC细胞24h后,HLEC细胞Bax、Caspase-3mRNA的表达量上升,NF-kB、Bcl-2表达量下降,Bax: Bel-2比率上调;32μM TFDG、16μM EGCG、32μMEGC处理高糖诱导的HLEC细胞24h,发现Bax:Bcl-2比率下调,抑制了细胞凋亡。研究表明TFDG、EGCG、EGC在体外实验中对高糖诱发的正常细胞损伤具有逆转修复作用,可进一步进行动物试验或临床研究。
【关键词】:
【学位授予单位】:湖南农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R587.2;R776
【目录】:
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本文关键词:TFDG、EGCG、EGC对高糖诱导的人晶状体上皮细胞的作用及机制的研究,由笔耕文化传播整理发布。
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