视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达及靶基因预测

发布时间：2016-11-14 13:35

  本文关键词：视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达及靶基因预测，由笔耕文化传播整理发布。

《浙江大学》 2013年

视网膜神经节细胞放射损伤后miRNAs的差异表达及靶基因预测

朱美娟  

【摘要】：[目的]研究不同剂量的x放射线对视网膜神经节细胞(RGCs)生存率的影响；初步筛查x放射线照射后的RGCs中差异表达的miRNAs,并预测其靶基因。 [方法]用OGy、2Gy、4Gy、Gy、8Gy的X放射线照射生长24h的RGCs,每日在倒置相差显微镜下观察各组细胞的密度和形态变化。MTT法检测照射后第5天各组RGCs的存活率。应用miRNA芯片检测6Gy和0GyX放射线照射后第3天的RGCs中差异表达的miRNAs。qRT-PCR验证芯片结果的准确性。应用Targetscan和microRNAorg两种靶基因预测软件预测表达差异较明显的5种miRNAs的靶基因。 [结果] X线照射后前4天各组的细胞密度和细胞形态均无明显差别,但第5天,4Gy、6Gy和8Gy照射组的细胞密度降低,细胞形态也发生了变化。MTT示4Gy、6Gy和8Gy照射组的细胞存活率比OGy对照组明显降低(p0.01)。miRNA芯片结果显示6Gy照射组中差异表达的miRNAs有37个,其中上调的有16种,下调的有31种。其中6种miRNAs (miR-192、-34a*、-877、-34c、-34a、-22)上调1.5倍以上,6种miRNAs (miR-212、-338、-219-5p、-503、-210、miR-505*)下调至0.667倍以下。qRT-PCR证明芯片的结果可靠。靶基因软件预测的5种miRNAs的靶基因参与细胞生长、发育、分化、凋亡和抗凋亡等过程。 [结论]8Gy的x放射线能造成RGCs损伤；总剂量6GY的x放射线能够引起RGCs中一些miRNAs的表达变化；差异表达的miRNAs可能通过调控其靶基因参与在RGCs的放射损伤过程中。

【关键词】：
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1
【目录】：

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