AngⅡ、醛固酮致心肌纤维化及Wnt1在其中的作用

发布时间：2016-12-16 08:53

  本文关键词：MMP-2和TIMP-1在闭角型青光眼患者房水中的定量研究，由笔耕文化传播整理发布。

《中国人民解放军医学院》 2014年

AngⅡ、醛固酮致心肌纤维化及Wnt1在其中的作用

谢永进  

【摘要】：目的探讨大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CFs)经血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ,Ang Ⅱ)、醛固酮及其受体拮抗剂干预后CFs细胞活性的改变以及对细胞中致心肌纤维化相关基因表达的影响，同时深入研究Wnt1基因在该过程中的作用，为预防和控制心肌纤维化提供新的理论依据。 方法采用胶原酶II消化法、差速贴壁法提取纯化CFs，在AngⅡ、醛固酮及其受体拮抗剂作用下，应用Cell Counting Kit-8（CCK-8）活细胞计数试剂盒检测成纤维细胞活性，逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerasechain reaction, RT-PCR)方法检测细胞中靶基因及相关基因mRNA表达的变化，Western blot方法检测细胞中靶基因及相关基因蛋白表达的变化。经AngⅡ、醛固酮干预的心肌成纤维细胞，应用RNAi技术敲低Wnt1基因表达后，分别应用CCK-8、RT-PCR、Western blot方法检测细胞活性、靶基因及相关基因表达的变化。 结果与对照组比较，AngⅡ、醛固酮独立干预可明显促进CFs细胞活性增加，AngⅡ、醛固酮联合干预的细胞增殖活性较AngⅡ、醛固酮单独干预更高，且AngⅡ、醛固酮的受体拮抗剂氯沙坦、螺内酯可显著抑制AngⅡ、醛固酮诱导的细胞增殖效应；与对照组比较，，AngⅡ、醛固酮可显著促进心肌成纤维细胞I型胶原前胶原A1（collagen, type I, alpha1，Col1a1）、III型胶原前胶原A1（collagen, type III, alpha1，Col3a1）、基质金属蛋白酶1(matrixmetalloproteinase1，MMP1) mRNA和蛋白表达，同时抑制基质金属蛋白酶组织抑制因子1(tissue inhibitors of the factor matrix metalloproteinase1，TIMP1)mRNA和蛋白表达；和醛固酮组比较，AngⅡ组在促进心肌成纤维细胞Col1a1、Col3a1、MMP1基因表达增加和TIMP1减低方面作用更强；氯沙坦、螺内酯可显著抑制AngⅡ、醛固酮诱导的Col1a1、Col3a1、MMP1mRNA和蛋白表达的增加，同时升高TIMP1mRNA和蛋白表达。经AngⅡ、醛固酮干预的心肌成纤维细胞，利用Wnt1-siRNA敲低Wnt1基因后，细胞增殖活性明显降低，靶基因Wnt1及胶原基因Col1a1、Col3a1表达均相应减低。 结论AngⅡ、醛固酮可促进体外培养大鼠CFs细胞数量增殖和增加细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原表达，AngⅡ、醛固酮同时干预时具有协同和叠加效应，且AngⅡ在促进心肌胶原表达方面较醛固酮更强；而它们的拮抗剂氯沙坦、螺内酯可抑制这些效应，其作用机制可能通过影响MMPs/TIMPs的平衡，使心脏胶原合成与分解代谢紊乱，增加CFs细胞增殖活性，促进心脏纤维化，而氯沙坦、螺内酯可通过抑制CFs细胞增殖和胶原表达抑制心肌纤维化。体外培养的心肌成纤维细胞转染Wnt1-siRNA后，AngⅡ、醛固酮的促细胞增殖活性明显减低，胶原蛋白表达明显降低，Wnt信号通路可能参与AngⅡ、醛固酮促心肌纤维化的信号转导过程。

【关键词】：
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R542.23
【目录】：

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1 曹中;王邦宁;;缬沙坦 螺内酯及其合用对心力衰竭大鼠细胞因子 胶原产生的影响[J];安徽医学;2010年04期

2 张乃菊;陈天平;祝晓光;;乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞的原代培养[J];蚌埠医学院学报;2010年06期

3 周宝尚;张璟;;Wnt信号通路与肾脏纤维化[J];重庆医学;2011年28期

4 张冀东;崔炜;王永利;张海林;武宇洲;鲁静朝;杨晓红;都军;刘凡;谢瑞芹;;钙调神经磷酸酶在醛固酮致心肌成纤维细胞增殖中的作用[J];第四军医大学学报;2007年20期

5 时义宝;褚俊;;基质金属蛋白酶及其组织抑制物与心血管疾病的关系[J];安徽医药;2012年12期

6 施学强;武永康;董伦;宿建辉;顾学文;张恒柱;申林海;于波;;人脑胶质瘤wnt1、β-catenin、gsk-3β的表达[J];苏州大学学报(医学版);2007年06期

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1 刘强;顾永昊;孙思勤;;MMP-2和TIMP-1在闭角型青光眼患者房水中的定量研究[J];安徽医药;2014年11期

2 吴艳君;王俊;;白介素-6与心力衰竭患者心肌重构的关系研究[J];中华全科医学;2014年03期

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2 邢姗姗;代谢综合征心肌纤维化发病机制及药物干预的研究[D];山东大学;2008年

3 王立英;牛磺酸抑制心肌成纤维细胞的增殖作用及机制研究[D];吉林大学;2013年

4 马景涛;低剂量螺内酯与厄贝沙坦联合应用对大鼠心肌肥厚性重构的干预研究[D];河北医科大学;2014年

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6 刘艳;PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂影响乳腺癌干细胞对内分泌治疗和靶向治疗耐药性的研究[D];天津医科大学;2014年

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1 曹中;王邦宁;;缬沙坦 螺内酯及其合用对心力衰竭大鼠细胞因子 胶原产生的影响[J];安徽医学;2010年04期

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3 林瑶;牛勃;解军;颜真;;SiRNA对大鼠钙调神经磷酸酶活性及VSMCs增殖的影响[J];第四军医大学学报;2006年18期

4 张冀东;崔炜;王永利;张海林;武宇洲;鲁静朝;杨晓红;都军;刘凡;谢瑞芹;;钙调神经磷酸酶在醛固酮致心肌成纤维细胞增殖中的作用[J];第四军医大学学报;2007年20期

5 谢双伦;王景峰;聂如琼;袁沃亮;李飞;林茂欢;;以转录因子AP-1为靶点的decoy ODNs对大鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的抑制作用[J];南方医科大学学报;2008年05期

6 刘树立;徐洪涛;杨连赫;李庆昌;韦强;王恩华;;Axin过表达下调β-catenin和TCF-4表达并抑制肺癌BE1细胞的增殖和侵袭[J];中国肺癌杂志;2009年04期

7 闫喆;姚芳;段惠军;谭会斌;张春霞;邢玲玲;;Wnt/β-catenin信号途径在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2009年04期

8 杜武勋;朱明丹;冯利民;宋启刚;魏营;马朋;刘长玉;刘梅;;芪参益气滴丸干预急性心肌梗死后早期心室重构的临床研究[J];中国循证心血管医学杂志;2008年01期

9 林晓忠;欧爱华;任毅;;高血压病住院患者中医辨病、辨证分布规律初步分析[J];新中医;2008年03期

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2 袁军;贾汝汉;包艳;;醛固酮对系膜细胞合成纤溶酶原激活剂抑制物-1的影响[J];中华医学杂志;2007年34期

3 贾汝汉;袁军;;醛固酮与肾纤维化(下)[J];中国中西医结合肾病杂志;2007年10期

4 王煊,蔡德鸿;血管分泌的醛固酮与糖尿病血管并发症[J];国外医学(内分泌学分册);2000年03期

5 刘云涛;;醛固酮对心血管的影响[J];当代医学;2009年21期

6 李晓东;郭志军;赵慧娟;张林霞;孙东立;;大鼠肾小球系膜细胞合成分泌醛固酮并表达醛固酮受体研究[J];山西医药杂志;2006年06期

7 宣兵;钟景页;胡永霞;;醛固酮刺激心肌成纤维细胞增殖的实验研究[J];西南军医;2006年04期

8 ;血管醛固酮[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);1995年03期

9 丁伟,刘礼斌,许曼音,陈家伦;糖皮质激素可治性醛固酮增多症——一个中国人家系的临床研究[J];中华内分泌代谢杂志;2000年06期

10 赖凌云,顾勇,陈靖,郁胜强,马骥,杨海春,林善锬;大鼠系膜细胞醛固酮的合成及其对细胞外基质生成的影响[J];中华医学杂志;2003年21期

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2 罗洋;组织醛固酮在肾间质纤维化过程中作用的实验研究[D];中国协和医科大学;2005年

3 姚丽;醛固酮致肾脏损害机制的研究[D];中国医科大学;2005年

4 刘抗寒;醛固酮诱导DOT1/AF9调控ET1表达在糖尿病肾病发病机制中的作用[D];中南大学;2010年

5 孙巧玲;肾脏组织醛固酮在环孢素A慢性肾毒性中作用的研究[D];中国协和医科大学;2008年

6 任艺虹;抗醛固酮治疗对原发性高血压的干预研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年

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8 胡晓军;醛固酮合酶基因多态性与高血压病及左室结构关系的研究[D];武汉大学;2004年

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1 黎晓磊;非糖尿病慢性肾脏病患者醛固酮逃逸的发生率及相关因素分析[D];南方医科大学;2010年

2 刘智楠;醛固酮对人近端肾小管上皮细胞血小板反应蛋白-1表达及增殖的影响[D];河北医科大学;2008年

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4 李艳芳;醛固酮的血管效应及地塞米松的调制作用[D];浙江大学;2008年

5 李娟;原发性醛固酮增多症血清醛固酮与炎症因子水平的关系[D];石河子大学;2011年

6 白嵩;醛固酮对豚鼠心脏电生理影响[D];河北医科大学;2013年

7 谢永进;醛固酮对胎儿心脏成纤维细胞增殖、胶原表达及相关基因的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2011年

8 杨磊;NF-κB在醛固酮致大鼠肾损伤中的作用及相关机制初步探讨[D];复旦大学;2011年

9 李源;多巴胺D_3受体对醛固酮介导的促血管平滑肌细胞增殖和迁移作用的影响及机制[D];第三军医大学;2013年

10 王健;醛固酮对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子表达及增殖的影响[D];河北医科大学;2005年

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本文编号：215005