KGF-2对角膜基质细胞的修复作用及其相关机制研究

发布时间：2017-03-20 18:09

  本文关键词：KGF-2对角膜基质细胞的修复作用及其相关机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：角质化细胞生长因子-2(KGF-2),也叫做成纤维细胞生长因子-10(FGF10),是成纤维细胞生长因子家族中的一员。KGF-2对角膜上皮组织具有高度特异性,加速上皮细胞的再生、迁移和角膜基质纤维的修复,从而促进角膜的损伤修复,并且不会出现过度增生而形成疤痕。角膜基质细胞会分泌一定量的KGF-2,但是伤口的及时愈合需要补充外源性KGF-2,从而促进角膜细胞的增值和迁移。因此,角膜基质细胞作为上皮细胞的支架,研究KGF-2对角膜基质细胞的作用及其机制,对于拓展KGF-2的促角膜损伤修复作用及其临床应用具有重大意义。 本研究通过体外原代培养了人角膜基质细胞,MTT法检测了KGF-2促角膜基质细胞增殖的作用,用Western Blot法检测了ERK1/2和p38的磷酸化蛋白表达水平,通过大鼠角膜碱烧伤模型研究了KGF-2体内促角膜损伤修复的作用及其机制。MTT结果表明KGF-2对角膜基质细胞的增值有明显的促进作用且呈剂量-效应依赖性,且浓度为100ug/m1时达到最优增值效应。Western Blot结果显示在200ug/ml肝素介导下,100ug/ml KGF-2作用角膜基质细胞5min时,ERK1/2和p38的磷酸化程度表现出最强,随后磷酸化程度逐渐减弱,并且ERK1/2和p38具有一定的协同作用。动物实验结果显示,分别选用12.5、25、50ug/ml的KGF-2治疗后,7d时角膜损伤程度较对照组相比明显减轻,角膜厚度降低,炎症程度明显减轻,基质层纤维排列疏松;14d时无炎症复发,基质层纤维排列疏松、整齐,与正常角膜无明显差别,而bFGF用药组则出现基质层细胞过度增生,上皮表现波浪状、凹凸不平。总之,在细胞水平,KGF-2表现出促进角膜基质细胞的增值和迁移；在分子水平,KGF-2通过ERK1/2和p38信号通路协调促进细胞的增值和迁移；在动物水平,KGF-2表现出加速角膜上皮的再生与修复和角膜基质纤维的修复,抑制角膜基质细胞的过度增生和炎症发生,从而利于角膜损伤修复。 本课题是关于KGF-2促角膜损伤修复机制的研究,为KGF-2在眼科临床试验的应用奠定了基础。
【关键词】：KGF-2 ERK1/2 p38 细胞增值 细胞迁移
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R772.2
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-6
• 符号说明6-7
• 目录7-8
• 第一章 前言8-16
• 1.1 角质化细胞生长因子-2的研究进展8-10
• 1.2 角膜损伤修复的研究进展10-12
• 1.3 MAPK信号通路的概述12-15
• 1.4 研究的价值与意义15
• 1.5 实验路线设计15-16
• 第二章 材料与方法16-26
• 2.1 材料与试剂16-19
• 2.2 实验方法19-26
• 第三章 结果与分析26-38
• 3.1 KGF-2冻干粉活性的测定26-27
• 3.2 人角膜基质细胞的原代培养27-28
• 3.3 KGF-2 mRNA在人角膜基质细胞中的表达28
• 3.4 KGF-2对人角膜基质细胞的促增值作用28-29
• 3.5 KGF-2对人角膜基质细胞的促迁移作用29
• 3.6 Western Blot检测KGF-2作用不同情况下ERK1/2的磷酸化29-31
• 3.7 KGF-2对人角膜基质细胞中p38磷酸化的影响31-32
• 3.8 KGF-2作用人角膜基质细胞下ERK1/2和p38途径的协同作用32-33
• 3.9 用大鼠角膜碱烧伤模型研究KGF-2的促角膜损伤修复作用33-38
• 第四章 讨论38-40
• 4.1 细胞水平的研究38
• 4.2 分子水平的研究38-39
• 4.3 动物水平的研究39-40
• 结论40-41
• 参考文献41-46
• 致谢46-47
• 作者简历47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 王晓杰;周鑫;田海山;马吉胜;焦悦;张睿;蔡敏倩;钱焕文;李校X;;重组人角质细胞生长因子-2对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用[J];吉林大学学报(医学版);2010年04期

2 谷艳娇;包翠芬;魏嘉;梁佳;高志安;;ERK1/2和p-ERK1/2在肺癌组织中的表达及意义[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2009年03期

3 毛成毅;岳松涛;马瑜;杜娟;林俐;陈芳;李增鹏;郑继军;;ERK1/2抑制剂PD98059对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响[J];山东医药;2010年01期

4 高丽昌;李婷婷;李富勇;唐禄;李海燕;王晓杰;李校X;;ERK1/2信号通路在角质细胞生长因子-2诱导角膜基质细胞增殖中的作用[J];中国药理学通报;2011年10期

5 刘琳,李永平,黄树其,林健贤,张文忻;角质细胞生长因子2促进兔角膜碱烧伤上皮愈合机制的研究[J];中华眼科杂志;2005年04期

6 陈蔚东;蒋青;陈东阳;徐华;张亚峰;;p38阻断剂对鼠关节炎软骨细胞金属蛋白酶表达的作用[J];中国医学科学院学报;2007年06期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 王晓杰;重组人角质细胞生长因子-2克隆表达及其对角膜损伤修复机制研究[D];吉林大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 焦悦;肝素对KGF-2介导的NIH3T3增殖及信号转导机制研究[D];吉林农业大学;2011年

  本文关键词：KGF-2对角膜基质细胞的修复作用及其相关机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：258227