基于巯基壳聚糖的眼部缓控释制剂的研究

发布时间：2017-03-26 16:02

  本文关键词：基于巯基壳聚糖的眼部缓控释制剂的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目前,眼后段疾病的治疗仍是临床上的一大难题,例如增殖性视网膜病变、葡萄膜炎、巨细胞病毒性视网膜炎等。阿霉素(Doxorubicin, DOX)是一种抗增殖药物,有文献报道其对增殖性视网膜病变有显著疗效。由于眼部结构的特殊性要求药物有良好的黏附性、渗透性和稳定性。因此,研究开发具有较高生物利用度、给药方便的新型眼部制剂显得尤为重要。壳聚糖(Chitosan, CS)是一类应用普遍的生物相容性材料,巯基化改造后所得巯基壳聚糖(Thiolated chitosan, TCS),为另一类新型高分子黏附材料,其水溶性、黏附性等大大提高,同时具有在体凝胶特性,更有利于其眼用新制剂的开发。透明质酸(Hyaluronan, HA)是一种在广泛分布于生物体内的天然蛋白多糖,具有良好的生物相容性和降解性。国内外对HA作为纳米材料的研究已久,但还未有TCS与HA构成纳米粒子的眼部研究。本论文首次选用了TCS和HA作为纳米粒合成的材料进行研究,并且本文首次将阿霉素以纳米粒的形式进行眼部研究。 研究目的：通过制备巯基化壳聚糖与透明质酸钠交联的纳米粒包载阿霉素的眼部制剂(DOX-NPs),降低阿霉素的生物毒性,并提高其在角膜及巩膜中的渗透性及滞留时间,从而增强其生物利用度。 研究内容： (1)阿霉素DOX荧光分析方法的建立 建立了DOX纳米粒体外荧光检测方法并进行方法学考察,其专属性、日间、日内精密度、回收率等均符合要求,为后面的DOX稳定性考察及制剂相关检测提供方法学依据。。 (2)巯基壳聚糖TCS的合成和透明质酸HA的降解 按照实验室自研方法,制备出高巯基含量为838.71±5.13μmol/g的TCS。将分子量约为500wDa的HA经过盐酸降解,透析纯化后通过高效凝胶色谱分析法(HPGPC法)对其进行评价,得到分子量约为50wDa的低分子量HA,且分子量分布均匀。 (3)载药纳米粒的制备及评价 本论文采用离子交联法制备出的载药纳米粒包封率88.35%,粒径为257nm,体外释放度结果显示纳米粒较游离药物有明显的缓控释作用,在PBS中的粒径及包封率变化不大,稳定性良好,证实该制剂各方面性能均符合标准。 (4)纳米粒对人角膜上皮细胞(HCE)的细胞毒性实验及细胞摄取实验 采用噻唑蓝比色法发现DOX-NPs较相同浓度下DOX游离药的毒性降低许多,对细胞几乎无显著性毒性,所选用的合成材料也对HCE细胞无毒性。而细胞摄取实验发现,HCE细胞对DOX-NPs的摄取率显著高于游离DOX,并且呈时间依赖性。 (5)动物局部给药实验 通过对比DOX溶液和包载DOX-NPs的大鼠角膜和巩膜透过性,进一步确证纳米粒能增加DOX的角膜和巩膜透过程度。 总结：本论文合成了TCS与HA交联包裹的DOX-NPs,具有良好的缓控释效应,稳定性能好,生物毒性低,角膜及巩膜的渗透性良好,在未来的眼部应用中有良好的前景。
【关键词】：纳米粒 巯基壳聚糖 透明质酸钠 眼部传递系统 体内、外实验
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R94;R77
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-14
• 第一章 绪论14-29
• 1.1 眼部纳米制剂的简介14
• 1.2 眼部治疗的主要屏障14-19
• 1.3 壳聚糖类眼用纳米粒的简介19-26
• 1.4 阿霉素治疗眼部疾病的研究进展26-27
• 1.5 本课题的立体依据及研究思路27-29
• 第二章 阿霉素体外分析方法的建立29-36
• 2.1 材料29-30
• 2.1.1 药品和试剂29-30
• 2.1.2 实验仪器30
• 2.2 方法30-31
• 2.2.1 荧光分析条件30
• 2.2.2 样品处理方法30
• 2.2.3 方法专属性30
• 2.2.4 标准曲线的绘制30-31
• 2.2.5 精密度试验31
• 2.2.6 回收率实验31
• 2.3 结果31-34
• 2.3.1 方法专属性31-32
• 2.3.2 标准曲线的绘制32-33
• 2.3.3 精密度试验33
• 2.3.4 回收率实验33-34
• 2.4 讨论34-35
• 2.5 小结35-36
• 第三章 TCS的合成及HA的降解36-44
• 3.1 材料36-37
• 3.1.1 药品和试剂36
• 3.1.2 实验仪器36-37
• 3.2 方法37-39
• 3.2.1 TCS的合成及表征37-39
• 3.2.2 HA的降解39
• 3.3 结果39-42
• 3.3.1 TCS的合成及表征39-41
• 3.3.2 HA的降解及分子量测定41-42
• 3.4 讨论42-43
• 3.5 小结43-44
• 第四章 TCS/HA纳米粒的制备及表征44-57
• 4.1 材料44-45
• 4.1.1 药品和试剂44
• 4.1.2 实验仪器44-45
• 4.2 方法45-46
• 4.2.1 DOX-NP的制备45
• 4.2.2 纳米粒包封率和载药量的测定45-46
• 4.2.3 纳米粒的粒径分布及分散性系数46
• 4.2.4 体外释放度的研究46
• 4.2.5 纳米粒稳定性考察46
• 4.3 结果46-54
• 4.3.1 各种方法制备DOX-NP的结果分析46-51
• 4.3.3 纳米粒质量评价51-54
• 4.4 讨论54-56
• 4.5 小结56-57
• 第五章 HCE人角膜上皮细胞毒性及摄取实验57-65
• 5.1 材料57-59
• 5.1.1 药品和试剂57
• 5.1.2 实验仪器57-58
• 5.1.3 溶液配制58-59
• 5.1.4 TCS溶液配制及纳米粒制备59
• 5.1.5 统计分析方法59
• 5.2 方法59-61
• 5.2.1 HCE细胞的处理59-60
• 5.2.2 细胞毒性实验60-61
• 5.2.3 细胞摄取61
• 5.3 结果61-63
• 5.3.1 TCS/HA纳米粒和DOX溶液对HCE细胞增殖活力的影响61-62
• 5.3.2 细胞摄取62-63
• 5.4 讨论63-64
• 5.5 小结64-65
• 第六章 DOX纳米粒的体外药效学考察65-70
• 6.1 材料65-66
• 6.1.1 实验试剂65
• 6.1.2 实验仪器65-66
• 6.1.3 实验动物66
• 6.1.4 纳米粒制备及DOX溶液配制66
• 6.2 方法66-67
• 6.3 结果67-68
• 6.3.1 TCS/HA纳米粒角膜透过性研究67-68
• 6.3.2 TCS/HA纳米粒巩膜透过性研究68
• 6.4 讨论68-69
• 6.5 小结69-70
• 全文总结及展望70-72
• 参考文献72-80
• 硕士期间发表论文80-81
• 致谢81-82

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 ;Transfection of mEpo gene to intestinal epithelium in vivo mediated by oral delivery of chitosan-DNA nanoparticles[J];World Journal of Gastroenterology;2004年01期

2 吴秋惠;吴皓;王令充;嵇晶;陈士勇;;载药微球设计中常用的天然多糖材料的研究进展[J];中国新药杂志;2011年24期

  本文关键词：基于巯基壳聚糖的眼部缓控释制剂的研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：269008