晶状体上皮细胞光损伤与活性氧作用及TGF-β2/Smad3信号传导通路的研究

发布时间：2021-02-18 03:23

　　目的：白内障是全世界首位的致盲性眼病,虽然不同的损伤因子导致白内障的通路和机制各不相同,但是它们大多通过一共同的中间产物——活性氧,累积的光暴露诱发的活性氧自由基所导致的晶状体上皮细胞凋亡与老年性白内障的发生关系密切,另外TGF-β2/Smad3信号传导通路与白内障及晶状体上皮细胞凋亡之间的关系得到越来越多的关注。本研究采用发光二极管（light emitting diode,LED）光源制作晶状体上皮细胞（lens epithelial cell,LEC）光损伤模型,探讨LEC光损伤与活性氧和TGF-β2/Smad3信号传导通路之间的关系,本研究进一步观察了具有活性氧清除作用的丹参素和阻断TGF-β2/Smad3信号传导通路对LED光源诱导人晶状体上皮细胞光损伤所致凋亡的影响,进一步评价了活性氧和TGF-β2/Smad3信号传导通路在以上过程中的作用。方法：本研究包括三部分：1.使用LED光源20000勒克斯照度Oh、6h、12h、24h照射LEC,使用流式细胞术检测LEC内活性氧的表达及细胞凋亡情况,分别使用Real-time PCR和Western blotting检测BAX和T... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、LED光源诱导人晶状体上皮细胞光损伤模型的建立
    1.1 对象和方法
        1.1.1 细胞系
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 主要仪器
        1.1.4 实验方法
    1.2 结果
        1.2.1 光镜下细胞形态观察及荧光显微镜下细胞ROS荧光观察
        1.2.2 流式细胞术细胞内ROS荧光检测
        1.2.3 流式细胞术细胞凋亡检测
        1.2.4 Real-time PCR检测
        1.2.5 Western印记检测
        1.2.6 MTT检测
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、丹参素对LED光源诱导人晶状体上皮细胞光损伤影响的研究
    2.1 对象和方法
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 实验方法
    2.2 结果
        2.2.1 丹参素对HLEB-3细胞作用浓度筛选
        2.2.2 光镜下细胞形态观察及荧光显微镜下细胞ROS荧光观察
        2.2.3 流式细胞术细胞内ROS荧光检测
        2.2.4 流式细胞术细胞凋亡检测
        2.2.5 Real-time PCR检测
        2.2.6 Western印记检测
        2.2.7 MTT检测
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、TGF-β2/Smad3信号传导通路在LED光源诱导人晶状体上皮细胞光损伤中作用的研究
    3.1 对象和方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 结果
        3.2.1 Smad3 siRNA重组质粒的鉴定
        3.2.2 Western印记检测细胞在转染Smad3 siRNA后Smad3蛋白的表达情况
        3.2.3 流式细胞术细胞凋亡检测
        3.2.4 Real-time PCR检测
        3.2.5 Western印记检测
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 TGF-β/SMAD信号传导通路与白内障发生发展关系的研究进展
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]丹参水溶性部位抑制血管内皮细胞凋亡的作用及机制研究[J]. 赵启韬,郭庆梅,邬元红,王鹏,孟冰雪.  山东中医药大学学报. 2012(04)
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[6]转化生长因子β2（TGF-β2）在老年性白内障与正常晶状体上皮细胞中mRNA表达的差异[J]. 李桂荣,周鸿雁,张文松.  中国实验诊断学. 2011(07)
[7]丹参素对血管内皮细胞氧化应激损伤保护作用的实验研究[J]. 王朔,王振杰,赵峰.  现代中西医结合杂志. 2011(20)
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[9]TGF-β1和（或）三氧化二砷作用于HL-60细胞后P27Kip1表达及凋亡情况的研究[J]. 于锦香,孟艳立,李艳.  中国实验血液学杂志. 2010(04)
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本文编号：3038961