顺铂损伤后毛细胞再生来源及SHH信号通路在毛细胞再生过程中调控作用的研究

发布时间：2021-02-24 03:02

　　[背景]铂类抗癌药是临床常见的具有耳毒性的药物。随着铂类抗癌药物研究的迅速发展,顺铂已成为癌症化疗不可缺少的药物之一。然而大剂量的顺铂可导致双耳感音神经性耳聋,且给药的浓度越高其风险也越大,顺铂引起的感音神经性聋是影响肿瘤患者化疗剂量、时间甚至治疗效果的重要因素,开展动物实验以探索顺铂耳毒性的发生机制,为应用顺铂的患者提供听觉保护,是研究顺铂耳毒性的最终目的。在实验中发现相对于新霉素损伤,顺铂损伤可以延缓毛细胞的再生,但对于顺铂能否抑制增殖再生,若能抑制,其机制是如何仍未能明确。有研究证实,Shh在耳蜗发育和毛细胞形成过程中起调节作用,而在毛细胞再生过程中,Shh信号通路起到的作用及机制仍不十分清楚。本课题组前期研究中发现Shh信号通路与顺铂损伤后毛细胞的再生过程存在一定的关系。有鉴于此,我们利用顺铂建立斑马鱼耳毒性模型以研究斑马鱼幼鱼在顺铂损伤后侧线毛细胞的再生来源,并进一步研究Shh信号通路在斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生过程中的表达及意义。[目的]探究斑马鱼幼鱼在顺铂损伤后侧线毛细胞的再生及其来源;以及Shh信号通路在顺铂损伤后斑马鱼幼鱼侧线毛细胞再生过程中的表达及作用。[方法]（1）... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

斑马鱼体表侧线毛细胞分布

显微镜高倍镜下计数毛细胞数目。配鱼后选取发育正常的５ｄｐｆ斑马鱼??幼鱼进行观察，经ＦＭ１－４３ＦＸ染色后，可以发现在斑马鱼幼鱼体表规律排列着??红色光点（图１－２，Ａ），其排列位置与神经丘分布一致，选取与０１神经丘相对应??的一个光点放大至２００倍，可以清楚的观察到“光亮点”是由形态规则的毛细胞??呈向心性聚集于神经丘中央区，即表现为毛细胞细胞膜红色光圈（图１－２，Ｂ）。顺??铂处理２４小时后经ＦＭ１－４３ＦＸ染色，神经丘相应位置未发现红色光圈染色，提??示丰细朐某本涸亡？??图１－２受精后５大（５ｄｐｆ）斑与鱼幼鱼ＦＭ１－４３ＦＸ染色情况??用３ｕｍｏＩ／Ｌ浓度ＦＭ１－４３ＦＸ对发育正常的５ｄｐｆ斑马鱼进行染色，图Ａ为斑马鱼整体??神经丘毛细胞染色情况，图Ｂ为单个神经丘（Ｏｌ）染色情况。??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＦＭ１－４３ＦＸ?ｉｎ?５ｄｐｆ?ｚｅｂｒａｆｉｓｈ?ｌａｔｅｒａｌ?ｌｉｎｅ?ｈａｉｒ?ｃｅｌｌｓ．??Ｈａｉｒ?ｃｅｌｌｓ?ｗａｓ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｗｉｔｈ?３ｕｍｏｌ／Ｌ?ＦＭ１－４３ＦＸ?ｔｏ?ｏｂｓｅｒｖｅ?ｔｈｅ?５ｄｐｆ?ｚｅｂｒａｆｉｓｈ?ｌａｔｅｒａｌ?ｌｉｎｅ??ｎｅｕｒｏｍａｓｔ．?（Ａ）?ｔｈｅ?ｈｏｌｉｓｔｉｃ?ｖｉｅｗ?ｏｆ?ｚｅｂｒａｆｉｓｈ?ｌａｔｅｒａｌ?ｌｉｎｅ?ｎｅｕｒｏｍａｓｔ?ａｆｔｅｒ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＦＭ１－４３ＦＸ??ｉｎ?ｈａｉｒ?ｃｅｌｌｓ．?（Ｂ）?Ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ＦＭ１－４３

６．７５０±０．８２９１，说明顺铂损伤后４８小时内侧线神经丘中央区不断有新生的毛细??胞。且数目逐渐增多，各组两两对比差异具有统计学意义，顺铂处理组与对照??组侧线毛细胞数量相比较，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０００１）（图１－３）。??１６??

【参考文献】：
期刊论文
[1]三甲基锡的神经毒性和耳毒性[J]. 于进涛,丁大连,孙虹,殷善开,Richard Salvi.  中华耳科学杂志. 2013(04)
[2]攻克感音神经性耳聋治疗难题的基础研究[J]. 杨仕明,吴南.  中华耳科学杂志. 2013(03)

博士论文
[1]组蛋白H3K9二甲基化参与斑马鱼神经丘发育和毛细胞再生[D]. 林勤.复旦大学 2011

硕士论文
[1]斑马鱼药源性耳毒模型的建立及应用[D]. 赵壮.北京协和医学院 2011



本文编号：3048677