小鼠真菌性角膜炎的拉曼光谱分析及真菌毒素检测

发布时间：2021-03-24 11:31

　　目的:建立小鼠茄病镰刀菌性角膜炎模型后，观察在真菌性角膜炎（fungalkeratitis, FK）病变发展中角膜组织中生化物质及真菌毒素的表达情况，以进一步探讨FK的发生、发展机制。方法：按照随机数表法将BALB/C小鼠分成2组：一组为真菌感染组（即实验组）：另一组为损伤对照组（即对照组）。两组均采用“改良角膜表面镜片法”造模。在真菌感染后第1、3、5、7、12天采用半定量方法分别对角膜的临床表现进行评分，并对角膜刮片物行病原学检查。同时在相应时间点取下小鼠实验眼角膜，用拉曼光谱分析离体角膜在相应病程中生化物质组成的变化情况。采用高效液相色谱串联质谱法检测镰刀菌酸（FA）、伏马菌素B1（FB1）、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）和玉米赤霉烯酮（ZEN）4种真菌毒素在不同病程中的感染角膜组织中的表达。结果：1.实验组小鼠角膜均成功感染接种的真菌，具有典型的FK临床表现。在真菌感染早期，角膜表现为弥漫性炎症反应，随后浸润混浊加重，第3天角膜呈灰白色混浊，第5天时角膜溃疡灶扩大，表面干燥、略隆起，新生血管从周边角膜开始长入，第7天时病变好转，溃疡灶面积缩小，第12天时病变稳定，角膜病灶瘢痕化，... 

【文章来源】：福建医科大学福建省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

茄病镰刀菌菌落

13图1 茄病镰刀菌菌落图2 茄病镰刀菌镜下图（×400 倍）4.2 角膜刮片物镜检与培养结果分别将造模后第1、3、5、7、12天获取的2组小鼠角膜刮片物行10%KOH湿片检查，结果为：实验组第1、3天均可见茄病镰刀菌菌丝，而第5、7、12天检查均未见菌丝；对照组于相应时间点检查均未见菌丝。病原菌培养结果，实验组：在感染后第1、3天均有真菌生长，同时经鉴定为所接种的茄病镰刀菌，第5、7、12天培养无真菌生长；对照组于相应时间点均未见真菌生长。刮片物革兰染色及

14细菌培养在实验组与对照组所有时间点均未见细菌。图3 角膜刮片真菌培养4.3 小鼠茄病镰刀菌性角膜炎临床表现造模后第1天（图4.1a），裂隙灯下可见感染组小鼠实验眼结膜混合性充血，结膜囊内可见大量分泌物，角膜表面略粗糙，基质浸润，前房存。对照组角膜表现为弥漫性水肿。接种后第2天，结膜混合充血加重，角膜浸润范围较前增大，密度增高，角膜灰白色混浊欠均匀，溃疡灶仍不明显。造模后第3天（图4.1b），浸润扩展至全角膜，质地致密，角膜呈均匀的灰白色混浊，少数可见免疫环和卫星灶。造模后第4天，病变加重，溃疡形成，角膜中央可见坏死组织。造模后第5天（图4.1c）

【参考文献】：
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本文编号：3097645