外伤性增殖性玻璃体视网膜病变的蛋白质组学分析以及分子机制研究
发布时间：2021-04-13 09:23
背景:作为眼外伤的一种严重的并发症,增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是视网膜复位术后失明的主要原因,其主要特征是眼外伤后视网膜色素上皮细胞过度的增殖,迁移和收缩。PVR的形成机制很复杂,目前对其理解仍然不够透彻。在PVR中,蛋白表达谱发生了明显变化,蛋白质组学作为一种鉴定和定量技术可为包括PVR在内的多种疾病的早期诊断和临床治疗提供分子标志和作用靶点,基于此我们可将差异表达的蛋白进行深入研究。目的:首先,对外伤性PVR患者的视网膜和正常人眼的视网膜进行蛋白质组学分析,以找出两种状态下视网膜组织中存在的差异表达蛋白,力求为外伤性PVR的发病机制提供新的依据,并为PVR的预防和治疗寻找新的突破口。接着,在人视网膜色素上皮细胞（Human retinal pigment epithelial,RPE）系ARPE-19细胞中敲降人视网膜特异性ATP结合盒转运体（ABCA4）的表达,研究其对RPE细胞活力、增殖、凋亡和迁移能力的影响,为外伤性PVR的防治提供新思路。方法:在蛋白质组学分析中,（1）获取实验组和对照组视网膜标本,并用BCA法对其蛋白浓度定量;（2）运用SDS-PAGE和考马斯亮蓝染...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２外伤性ＰＶＲ组和对照组样品ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图??
?第二章蛋白质组学筛选外伤性ＰＶＲ中的差异蛋白与验证???括：受体调节器活动（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），酶调节活性（ｅｎｚｙｍｅ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ），抗氧化活性（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ），催化活性（ｃａｔａｌｙｔｉｃ），分子传感器??活性（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），载体活性（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），结构分子活??性（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｍｏｌｅｃｕｌｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），受体活性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），蛋白质结舍转录因??子活性（ｐｒｏｔｅｉｎ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），核酸结合转录因子活性??（ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｂｉｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），电子载体活性（ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?），化学引诱物活性（ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?），金属伴侣活性??（ｍｅｔａｌｌｏｃｈａｐｅｒｏｎｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），绑定（ｂｉｎｄｉｎｇ），通路调节活性（ｃｈａｎｎｅｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?）；注释的蛋白质共富集９个细胞组分，包括：高分子配合物??（ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｃｏｍｐｌｅｘ），膜包围腔（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｅｎｃｌｏｓｅｄ?ｌｕｍｅｎ），细胞器??（ｏｒｇａｎｅｌｌｅ），细胞连接（ｃｅｌｌ?ｊｕｎｃｔｉｏｎ），细胞（ｃｅｌｌ?），突触（ｓｙｎａｐｓｅ?），膜（ｍｅｍｂｒａｎｅ），??胞外区（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａ
??利用Ｇｅｎｅ?Ｃｌｕｓｔｅｒ?３．０软件对２４１个差异蛋白进行层次聚类分析，其具体结??果见图２．６。在横向的层次聚类树中，对照组和实验组中３次生物学重复分别分??类于同一分支下，说明３次实验具有良好的重复性。在纵向层次聚类树中，主??要表现为两个分支。上分支包含１５３个差异蛋白，以上蛋白质在外伤性ＰＶＲ患??者中的表达量明显低于对照组，它们包括：Ｑ５６２Ｒ１?（ＨＵＭＡＮ?Ｂｅｔａ－ａｃｔｉｎ－ｌｉｋｅ??ｐｒｏｔｅｉｎ
【参考文献】：
期刊论文
[1]姜黄素抑制视网膜色素上皮细胞增生的实验研究[J]. 林沛文. 中外医学研究. 2014(07)
[2]增生性玻璃体视网膜病变的发病机制及治疗研究进展[J]. 苗景鹏,魏文斌. 国际眼科纵览. 2013 (06)
[3]增殖性玻璃体视网膜病变发病因素的研究进展[J]. 贾媛媛,高晓唯. 医学综述. 2009(20)
[4]姜黄素对培养的人胚胎视网膜色素上皮细胞增殖活性的影响[J]. 龚凌,姜德咏,朱晓华,郭丽花. 眼科学报. 2004(04)
[5]金雀异黄素诱导培养人视网膜色素上皮细胞凋亡[J]. 王海燕,惠延年,王雨生,杜红俊,马吉献,张鹏. 第四军医大学学报. 2003(21)
[6]增生性玻璃体视网膜病变玻璃体切割液内的细胞凋亡[J]. 刘兵,惠延年,黄蔚. 中华眼底病杂志. 1999(02)
[7]增生性玻璃体视网膜病变眼玻璃体中差异蛋白质组的鉴定[J]. 于靖,王方. 中华实验眼科杂志. 2011 (04)
本文编号：3135040
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２．２外伤性ＰＶＲ组和对照组样品ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图??
?第二章蛋白质组学筛选外伤性ＰＶＲ中的差异蛋白与验证???括：受体调节器活动（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），酶调节活性（ｅｎｚｙｍｅ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ），抗氧化活性（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ），催化活性（ｃａｔａｌｙｔｉｃ），分子传感器??活性（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），载体活性（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），结构分子活??性（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｍｏｌｅｃｕｌｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），受体活性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），蛋白质结舍转录因??子活性（ｐｒｏｔｅｉｎ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），核酸结合转录因子活性??（ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｂｉｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），电子载体活性（ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?），化学引诱物活性（ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?），金属伴侣活性??（ｍｅｔａｌｌｏｃｈａｐｅｒｏｎｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），绑定（ｂｉｎｄｉｎｇ），通路调节活性（ｃｈａｎｎｅｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?）；注释的蛋白质共富集９个细胞组分，包括：高分子配合物??（ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｃｏｍｐｌｅｘ），膜包围腔（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｅｎｃｌｏｓｅｄ?ｌｕｍｅｎ），细胞器??（ｏｒｇａｎｅｌｌｅ），细胞连接（ｃｅｌｌ?ｊｕｎｃｔｉｏｎ），细胞（ｃｅｌｌ?），突触（ｓｙｎａｐｓｅ?），膜（ｍｅｍｂｒａｎｅ），??胞外区（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａ
??利用Ｇｅｎｅ?Ｃｌｕｓｔｅｒ?３．０软件对２４１个差异蛋白进行层次聚类分析，其具体结??果见图２．６。在横向的层次聚类树中，对照组和实验组中３次生物学重复分别分??类于同一分支下，说明３次实验具有良好的重复性。在纵向层次聚类树中，主??要表现为两个分支。上分支包含１５３个差异蛋白，以上蛋白质在外伤性ＰＶＲ患??者中的表达量明显低于对照组，它们包括：Ｑ５６２Ｒ１?（ＨＵＭＡＮ?Ｂｅｔａ－ａｃｔｉｎ－ｌｉｋｅ??ｐｒｏｔｅｉｎ
【参考文献】：
期刊论文
[1]姜黄素抑制视网膜色素上皮细胞增生的实验研究[J]. 林沛文. 中外医学研究. 2014(07)
[2]增生性玻璃体视网膜病变的发病机制及治疗研究进展[J]. 苗景鹏,魏文斌. 国际眼科纵览. 2013 (06)
[3]增殖性玻璃体视网膜病变发病因素的研究进展[J]. 贾媛媛,高晓唯. 医学综述. 2009(20)
[4]姜黄素对培养的人胚胎视网膜色素上皮细胞增殖活性的影响[J]. 龚凌,姜德咏,朱晓华,郭丽花. 眼科学报. 2004(04)
[5]金雀异黄素诱导培养人视网膜色素上皮细胞凋亡[J]. 王海燕,惠延年,王雨生,杜红俊,马吉献,张鹏. 第四军医大学学报. 2003(21)
[6]增生性玻璃体视网膜病变玻璃体切割液内的细胞凋亡[J]. 刘兵,惠延年,黄蔚. 中华眼底病杂志. 1999(02)
[7]增生性玻璃体视网膜病变眼玻璃体中差异蛋白质组的鉴定[J]. 于靖,王方. 中华实验眼科杂志. 2011 (04)
本文编号：3135040
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