鼻咽癌靶向肽修饰的rES对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响

发布时间：2021-05-12 02:10

　　目的探讨鼻咽癌靶向肽（NTP）修饰的重组人血管内皮抑素（rES）对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响,为鼻咽癌的靶向治疗提供新思路。方法合成pET-28a-rES与pET-28a-rES-NTP质粒,并通过大肠杆菌表达系统制备rES与rES-NTP重组蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质免疫印迹（WB）鉴定重组蛋白。建立人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠移植瘤模型,酶联免疫吸附试验检测重组蛋白注射后不同时间点在肿瘤组织中的含量。将致瘤成功的裸鼠随机分为对照组、rES组、rES-NTP组3组,3组分别隔日尾静脉注射100μL的生理盐水、rES重组蛋白（15 mg/kg）、rES-NTP重组蛋白（15 mg/kg）,共给药4周。测量移植瘤的体积与重量;免疫组织化学染色法检测移植瘤中CD31的表达;荧光定量PCR、WB检测移植瘤中VEGF、HIF-1ɑmRNA与蛋白质的表达。结果 rES与rES-NTP重组蛋白的理论分子量分别为22.48 kd、23.33 kd,经SDS-PAGE与WB鉴定正确。尾静脉注射后5 min、30 min、1 h、3 h、6 h时,rES-NTP组在肿瘤组织中的含量... 

【文章来源】：西部医学. 2020,32(09)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验细胞与动物
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 方法
        1.3.1 质粒的构建
        1.3.2 蛋白的表达与鉴定
        1.3.3 动物模型的构建
        1.3.4 实验分组
        1.3.5 酶联免疫吸附试验检测重组蛋白在肿瘤组织中的含量
        1.3.6 移植瘤体积与重量的测量
        1.3.7 免疫组织化学染色法检测移植瘤中CD31的表达
        1.3.8 蛋白质免疫印迹检测移植瘤中VEGF与HIF-1ɑ的表达
        1.3.9 荧光定量PCR检测移植瘤中VEGF与HIF-1ɑ的表达
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 rES-NTP质粒的构建与重组蛋白的表达
    2.2 rES-NTP重组蛋白的靶向验证
    2.3 3组肿瘤生长体积和重量的差异
    2.4 3组肿瘤组织中CD31表达的差异
    2.5 3组肿瘤组织中VEGF及HIF-1ɑ表达的差异
3 讨论
4 结论与启示


【参考文献】：
期刊论文
[1]晚期胃癌抗血管生成治疗的研究进展[J]. 邹子骅,张弘纲.  癌症进展. 2019(10)
[2]人血清白蛋白在蛋白多肽类药物长效化中的应用[J]. 徐欢,周美玲,葛琳,王志明.  中国生物工程杂志. 2019(01)
[3]Hypoxia inducible factor（HIF） in the tumor microenvironment:friend or foe?[J]. Yanqing Huang,Daniel Lin,Cullen M.Taniguchi.  Science China（Life Sciences）. 2017(10)
[4]长效化融合蛋白药物及其药动学分析技术的研究进展[J]. 邵莉,马晓慧,王相阳,徐寒梅.  中国生物工程杂志. 2017(04)
[5]重组人内皮抑素对鼻咽癌细胞CNE2增殖及凋亡的影响[J]. 马静,王小燕,张铁松,杨洁,任艳鑫,林垦,李正才,李晓江.  中国耳鼻咽喉颅底外科杂志. 2012(05)



本文编号：3182528