sCD40L对眼眶成纤维细胞增殖及透明质酸合成酶mRNA表达的影响
本文关键词:sCD40L对眼眶成纤维细胞增殖及透明质酸合成酶mRNA表达的影响,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:通过利用sCD40L刺激体外培养的正常人和甲状腺相关性眼病(TAO)患者的眼眶成纤维细胞,比较两者之间增殖情况以及TAO组和正常组中加入sCD40L培养后,3种HAS基因的表达情况,初步探讨sCD40L在TAO发病中的作用。方法:原代培养5例TAO患者和2例正常对照组的眼眶成纤维细胞;MTS比色法检测不同浓度sCD40L在不同时间刺激眼眶成纤维细胞后,对其增殖的影响;实时荧光定量PCR技术检测在不同时间用不同浓度的sCD40L刺激5例体外培养的TAO患者和2例正常对照组的眼眶成纤维细胞3种HAS基因表达水平的影响。结果:(1)TAO患者及正常人眼眶成纤维细胞体外培养成功。(2)浓度在25ng/ml及以上的sCD40L可刺激眼眶成纤维细胞增殖,较正常人眼眶成纤维细胞增殖明显,并与浓度成正比,且当刺激浓度100ng/ml浓度时,达到最大刺激作用,细胞数量不在随浓度增高而增加,提示该作用存在饱和现象。正常人50ng/ml及以上浓度方有较弱的促增殖作用。(3) 12.5~100ng/mlsCD40L对培养的TAO患者眼眶成纤维细胞HAS1和HAS2基因表达无明显变化,而HAS3表达量随sCD40L浓度加大而增加,100ng/ml浓度的sCD40L在3小时时可使HAS3表达量增大为对照组的3.5倍,在24小时,效应更加明显,约为对照组的6倍。正常人眼眶成纤维细胞的HAS1,HAS2和HAS3的mRNA表达均无明显变化。结论:sCD40L对TAO患者眼眶成纤维细胞的生长和HAS3基因的表达均有刺激作用,提示sCD40L可能通过促进HAS3 mRNA的表达来促进TAO患者眼眶成纤维细胞合成和分泌HA,从而促进了TAO的发生发展。
【关键词】:甲状腺相关性眼病 眼眶成纤维细胞 透明质酸合成酶 sCD40L
【学位授予单位】:第二军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R581;R771.3
【目录】:
- 摘要5-6
- Abstract6-7
- 缩略词表7-8
- 第一部分 soluble CD40L对眼眶成纤维细胞增殖的影响8-22
- 前言8-10
- 材料与方法10-15
- 结果15-19
- 讨论19-21
- 结论21-22
- 第二部分 三种透明质酸合成酶基因甲状腺相关性眼病患者眼眶成纤维细胞和正常人眼眶成纤维细胞中的表达22-37
- 前言22-24
- 材料与方法24-28
- 结果28-34
- 讨论34-36
- 结论36-37
- 第三部分 临床应用37-46
- 资料与方法39-40
- 统计分析40-41
- 结果41-44
- 讨论44-46
- 综述46-53
- 参考文献53-63
- 致谢63
【共引文献】
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,本文编号:321936
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