角膜内皮细胞在机体死后的命运及其机制研究

发布时间：2021-06-23 21:16

　　目的:观察机体死后角膜内皮在不同死亡间隔和温度下结构和功能的改变并探究机体死后角膜内皮细胞的存活机制。方法:C57BL/6小鼠脱颈处死后,尸体分别置于4℃冰箱中和25℃室内,放置12h、24h、48h、72h。在不同的死亡间隔（PMI）下,对小鼠眼前节进行裂隙灯检查,抽取房水做细菌培养;通过眼球石蜡切片苏木素-伊红（HE）染色、角膜内皮N-cadherin和Na+-K+-ATPase免疫荧光染色、角膜内皮扫描电镜（SEM）来观察角膜内皮结构和功能的改变;利用Live and dead染色评估角膜内皮活细胞率并通过标记凋亡细胞的TUNEL染色和程序性坏死标记物P-RIP3（the receptor-interacting protein family）的免疫荧光染色对细胞的死亡方式进行探究。利用转录组测序技术（RNA-seq）及 quantitative Real-time RT-PCR（q-RT-PCR）来检测机体死后12h兔角膜内皮基因表达谱的变化。通过腹腔注射治疗性TNF-α抗体,依那西普,观察其对死后小鼠角膜内皮的保护作用。结果:小鼠死后,低温维持了眼球的正常形态和一定的前房深度... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１?ＴＮＦＲ１激活后的信号通路＿??Ｆｉｇ．１．１?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ａｆｔｅｒ?ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＴＮＦＲ１．??

图３．１?ｍＲＮＡ建库简要流程??备；??分析??基本分析和高级分析。基本分析，表达量分析，差异基因分析等；和通路／疾病富集，差异基因共文结果部分用到的分析方法作一分析??

２４ｈ角膜厚度开始下降，至７２ｈ甚至比正常组更薄；值得注意的是，随着死亡时??间的延长，角膜上皮仅最表层细胞脱落，细胞层数并未出现明显减少，仅细胞体??积减小（图４．２）。以上眼部的死后组织学变化规律均重复三次以上。??以上结果说明低温维持了眼球正常的形态至７２ｈ，延缓了自溶、腐败等过程??对其结构的破坏；而常温下４８ｈ前房即出现细菌，眼球出现严重的萎缩变形，预??示着腐败自溶的过程开始。??３２??


本文编号：3245671