间充质干细胞来源exosomes对角膜移植排斥的作用研究

发布时间：2021-07-11 02:03

　　目的虽然穿透性角膜移植（penetrating keratoplasty,PKP）手术较其他器官移植手术成功率要高,但术后排斥反应在手术失败原因中仍占首位。间充质干细胞来源的Exosomes（mesenchymal stem cells derived exosomes,MSCs-exo）可以表达来源细胞免疫功能,参与免疫调控。在前期实验的基础上,本研究应用MSCs-exo对大鼠角膜移植免疫排斥模型进行治疗,观察不同路径、不同剂量、不同时间给予MSCs-exo对角膜移植排斥反应发生和转归的干预情况,明确exosomes治疗途径及治疗机理。方法1.全血贴壁法分离培养Wistar大鼠骨髓来源MSCs,并鉴别Wistar大鼠骨髓来源间充质干细胞。分离提纯并鉴别MSCs来源Exosomes,BCA法测定蛋白浓度,按需配置exosomes浓度。2.Wistar大鼠提供供体植片,Lewis大鼠作为受体,构建大鼠穿透性角膜移植免疫排斥动物模型。随机分为以下几组:A组:模型组（亦为空白对照组）。B组:术后结膜下注射MSCs组。C组:术后结膜下注射PBS组。D组:术后结膜下注射MSCs来源Exosome... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

MSCs细胞

成脂分化

图 1A. MSCs 细胞 图 1B. 成脂分化 图 1C. 成骨分化1.2.3 间充质干细胞来源 exosomes 的鉴定1.2.3.1 MSCs-exo 的电镜观察扫描电镜下观察超速离心方法获得微粒的形态，可见其具有 exosomes 典型电镜表现，粒子纯度较高，电镜下呈圆形或茶托型或一侧凹陷的半球形的双层模样结构（图 2）。1.2.3.2 MSCs-exo 的粒子直径测算随机选取 15 个电镜下具有典型形态的 Exosomes 截图，根据标尺记录其直径。发现粒子直径大小范围在 45nm~100nm 之间（图 2）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Biology of chronic graft-vs-host disease:Immune mechanisms and progress in biomarker discovery[J]. Richard B Presland.  World Journal of Transplantation. 2016(04)
[2]Mechanism of immune tolerance induced by donor derived immature dendritic cells in rat high-risk corneal transplantation[J]. Xiao-Wei Gao,Yan Fu,Wen-Jing Li,An-Jie Du,Xia Li,Xu-Dong Zhao.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2013(03)



本文编号：3277106