P物质调控胰岛素样生长因子促进糖尿病角膜上皮创伤愈合的机制研究

发布时间：2021-07-18 14:26

　　目的:通过糖尿病大鼠和体外模拟人角膜缘干细胞高糖环境,探讨高糖引起的角膜缘干细胞的迁移能力和细胞表型转变,并探究P物质促进糖尿病角膜病变创伤后修复的分子机制。研究方法:1.动物实验:取30只SPF大鼠进行糖尿病造模,15只为糖尿病组,15只为P物质组。另取15只SPF大鼠为对照组,刮除三组大鼠角膜上皮观察上皮创伤愈合情况,并进行HE染色和波形蛋白（Vimentin）、β连环蛋白（β-catenin）及P63蛋白的免疫组化染色。2细胞及分子实验:取人角膜缘干细胞进行高糖培养24小时后,加入P物质,48小时后划痕实验和transwell分析检测对照组、高糖组和P物质组角膜缘干细胞的增殖及迁移功能,western-blot及细胞免疫荧光法检测角膜缘干细胞波形蛋白（Vimentin）、β连环蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶（MMP9）、吻蛋白（FAK）及胰岛素样生长因子1（IGF-1）的表达及胞内定位。免疫共沉淀法检测IGFBP—IGF-1复合体的浓度探讨P物质促进IGF-1信号通路的作用机制。实验结果:1.糖尿病大鼠在刮除角膜上皮后,愈合速度较正常对照组明显延迟,在24h时原已修复... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．角膜上皮愈合面积百分比图??正常组大鼠刮除上皮后，上皮修复迅速，在４８ｈ即完成上皮修复

而糖尿病大鼠的角膜上皮明显变薄，表层上皮缺失或仅残留１层，翼状上??｜?皮细胞形态各异、细胞连接疏松、排列紊乱，基底细胞层细胞失去其原有高柱??状细胞形态，细胞变小，呈多边形或短柱状，排列紊乱。（图３）??２３??

角膜基底细胞层可见Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和卩－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白高表达，而表层上皮和翼状上皮??层表达量极低。而糖尿病大鼠的角膜基底细胞的Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ｐ－ｃａｔｅｎｉｎ蛋白表达??明显降低，其表达量与表层上皮和翼状上皮层类似。（图４）??２４??

【参考文献】：
期刊论文
[1]2型糖尿病患者角膜知觉改变及其影响因素[J]. 季迅达,朱皓皓,许速.  中国实用眼科杂志. 2007 (12)
[2]共焦显微镜观察糖尿病性视网膜病变患者角膜细胞的变化[J]. 马山,孙先勇,张杰,刘秀花,吴国庆.  中国实用眼科杂志. 2013 (05)



本文编号：3289755