绿原酸对视网膜色素上皮细胞氧化损伤保护作用的实验研究

发布时间：2017-04-29 10:18

  本文关键词：绿原酸对视网膜色素上皮细胞氧化损伤保护作用的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：研究绿原酸（chlorogenic acid，CGA）对过氧化氢（Hydrogen peroxide）处理的人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19）细胞抗氧化损伤的保护作用，为将来临床上利用绿原酸治疗老年黄斑变性提供实验依据。 方法：过氧化氢(H2O2)以浓度和时间梯度作用于ARPE-19，通过MTT法检测细胞活性，建立ARPE-19细胞氧化损伤模型。采用MTT法检测CGA对ARPE-19细胞的增殖及毒性作用。实验分3组：正常对照组，H2O2模型组，CGA+H2O2干预组。应用紫外分光光度计法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化；Hoechst33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。 结果：1．H2O2以浓度和时间梯度诱导ARPE-19细胞凋亡，建立氧化损伤模型适宜条件为500μmol/L的H2O2作用HRPE细胞24h。2.绿原酸各浓度组ARPE-19细胞活性与空白对照组比较，差异无统计学意义；绿原酸各浓度干预组细胞活性较H2O2模型组高，，在CGA浓度为100μmol/L,活性最高，选此浓度进行后续实验。3.与正常对照组相比，H2O2模型组SOD活性、GSH含量下降， MDA含量增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)；与H2O2模型组相比，CGA干预组的SOD活性及GSH含量均升高，MDA含量下降，差异有统计学意义(P＜0.05)。4.与正常对照组比较，H2O2模型组的凋亡率显著增加，差异具有统计学意义；与H2O2模型组比较，CGA干预组的凋亡率下降，差异有统计学意义。 结论：H2O2可以对ARPE-19细胞产生氧化损伤，引起细胞凋亡，CGA对ARPE-19细胞无促增殖及毒性作用并对ARPE-19细胞的氧化损伤有保护作用，可以降低H2O2诱导的ARPE-19细胞凋亡率；
【关键词】：绿原酸 视网膜色素上皮细胞 氧化损伤 凋亡
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R774.5
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料与方法11-18
• 2.1 实验材料11-13
• 2.1.1 实验细胞11
• 2.1.2 实验试剂11
• 2.1.3 实验仪器11-12
• 2.1.4 实验主要试剂配制12-13
• 2.2 实验方法13-17
• 2.2.1 细胞传代培养13
• 2.2.2 MTT 法检测细胞活力13-14
• 2.2.3 实验分组14-15
• 2.2.4 Annexin V-FITC/PI 检测细胞凋亡15
• 2.2.5 Hoechst33258 染色观察细胞凋亡15-16
• 2.2.6 细胞氧化应激指标的测定16-17
• 2.3 统计学分析17-18
• 第3章 结果18-27
• 3.1 过氧化氢对细胞活力的影响18-20
• 3.1.1 H_2O_2浓度对 ARPE-19 细胞活力的影响18-19
• 3.1.2 H_2O_2 作用时间对 ARPE-19 细胞活力的影响19-20
• 3.2 绿原酸对 ARPE-19 细胞增殖的影响20-21
• 3.3 绿原酸对 H_2O_2氧化损伤 ARPE-19 细胞活性的影响21-23
• 3.4 Annexin V-FITC 检测 ARPE-19 细胞凋亡23-24
• 3.5 Hoechst33258 染色观察细胞凋亡24-25
• 3.6 绿原酸对 H_2O_2氧化损伤 ARPE-19 细胞 SOD 活性、MDA 含量、GSH 含量的影响25-27
• 第4章 讨论27-32
• 4.1 ARPE-19 细胞氧化损伤模型的建立27-28
• 4.2 绿原酸对 ARPE-19 细胞增殖的影响28-29
• 4.3 绿原酸对 H_2O_2诱导的 ARPE-19 细胞氧化应激损伤的保护29-32
• 第5章 结论32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-38
• 攻读学位期间的研究成果38-39
• 综述39-47
• 参考文献45-47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：334702