碱烧伤致小鼠角膜病变及HIF-1α和AQP1表达的研究
发布时间：2021-09-25 14:42
角膜碱烧伤是临床上常见的眼部损伤,碱烧伤后引起角膜持续溃疡及新生血管,进而破坏角膜高度透明及无血管状态,因此一直受到关注。然而,碱烧伤后角膜伤口愈合过程仍不清楚。缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）是参与低氧反应的关键因子,在缺血性视网膜病变中能引发血管生成,水通道蛋白1（aquaporin1,AQP1）在眼睛各组织广泛表达,与眼部多种病理学过程相关。由于两者在眼部损伤病理中的重要作用,近来引起人们的普遍关注。本研究首先对小鼠角膜碱创伤后的病理表现进行探究,其次利用免疫荧光染色和qRT-PCR技术检测HIF-1α和AQP1在角膜碱创伤后各时期的表达情况。结果显示,碱创伤后的小鼠角膜表层出现空泡,基质层纤维排布杂乱。正常组HIF-1α和AQP1分别在角膜上皮基底膜及内皮层有弱表达;碱烧伤后1 d、4 d和7 d HIF-1αmRNA表达上调,创伤后1 d和7 d AQP1 mRNA表达上调。为明确在碱性烧伤后AQP1对小鼠角膜基质细胞在伤口修复时的影响,本实验通过MTT实验及流式细胞术得到一定浓度的CoCl2用于...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠角膜组织HE染色图
24图 3-2 小鼠视网膜组织 HE 染色图。A 、B、C、D、E 分别为对照及角膜碱创伤后 1 d、4 d、7 d、14 d 各时间段 HE 结果，A1、B1、C1、D1、E1 分别为上述图片区域放大图，图中 RGC表示视网膜节细胞层，INL、ONL 分别为视网膜内外核层；F 为角膜碱创伤后各时间段视网膜节细胞数量相比于对照组的数量统计，G 为角膜碱创伤后各组视网膜外核层与内核层厚度比率统计。结果采用平均值±标准差（mean ± standard deviation）表示，n = 3。与对照组对比，*P < 0.05，* *P < 0.01.Figure 3-2 The HE staining of Retinal. A, B, C, D and E were the results of the control groupand 1 d, 4 d, 7 d and 14 d after the alkali burn of corneal respectively. A1, B1, C1, D1 were partialenlarged view of the above picture respectively. RGC represents the retinal ganglion cell layer,and INL represents the retinal inner nuclear layer, and ONL represents the retinal outer nuclearlayer in the figure. F represents the number of retinal ganglion cells in each group after cornealalkali burns compared with control group. G represents the ratio of the the thickness of the outernuclear layer to the inner nuclear layer in each group after corneal alkali burn. Data werepresented as mean ± standard deviation, n = 3.*P < 0.05,* *P < 0.01, and compared with thecontrol group.
对照组数量对比，差异具有统计学意义。视网膜外核层与内核层厚度比率统计结果发现在碱创伤后 1 d 其数值上升，说明视网膜组织发生一定程度水肿，之后其它各时期与对照组别的正常组织相比，外核层与内核层厚度比率无明显变化（图3-2）。3.2 小鼠角膜碱烧伤后 HIF-1α 和 AQP1 的表达为了得到碱创伤后 HIF-1α 和 AQP1 在角膜上的变化情况，我们采用免疫荧光染色和 qRT-PCR 技术对其进行了探究。免疫荧光染色结果为，我们的对照组中，HIF-1α 仅在角膜上皮基底膜有表达；碱灼伤后 1 d ，HIF-1α 在角膜上皮层开始有表达，碱创伤后 4 d 和 7 d，除在眼角膜上皮层的有出现外，在基质层也出现表达，至碱创伤后 14 d，HIF-1α 只在角膜上皮层有表达，其余各层无 HIF-1α出现（图 3-3）。免疫荧光染色结果展示，对照实验中，AQP1 仅在角膜内皮层有表达，角膜受到碱创伤后 4 d 和 7 d， AQP1 在内皮细胞和基质层细胞中都有表达，至碱创伤后 14 d，AQP1 仅在内皮层有出现（图 3-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]血管内皮生长因子靶向抗体对大鼠角膜碱烧伤后新生血管抑制作用的研究[J]. 王群,姜严明,赵杰,侯宝杰,吕明,黄一飞. 眼科新进展. 2017(11)
[2]角膜新生血管对角膜损伤神经再生影响的研究[J]. 王平,李坤,张阳,张敬学,武珅,刘谦,邹煦妍,李纳. 眼科. 2017(02)
[3]氯化钴低氧对黑色素瘤细胞系迁移能力及FSTL1表达分泌的影响[J]. 任方元,李莲,姜芳馨,冯靖,陈宝元,曹洁. 天津医药. 2016(03)
[4]HIF-1α pathway: role, regulation and intervention for cancer therapy[J]. Georgina N.Masoud,Wei Li. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)
[5]Clinical correlates of common corneal neovascular diseases: a literature review[J]. Nizar Saleh Abdelfattah,Mohamed Amgad,Amira A Zayed,Hamdy Salem,Ahmed E Elkhanany,Heba Hussein,Nawal Abd El-Baky. International Journal of Ophthalmology. 2015(01)
[6]Ⅱ型糖尿病患者角膜的共聚焦显微镜观察[J]. 马聪慧,王丽娅,李晶. 眼科. 2011(03)
[7]结膜碱性烧伤致干眼模型的探讨[J]. 黄佳,杨水平,陈敏,陈剑,王彦平. 广东医学. 2008(05)
本文编号：3409921
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
小鼠角膜组织HE染色图
24图 3-2 小鼠视网膜组织 HE 染色图。A 、B、C、D、E 分别为对照及角膜碱创伤后 1 d、4 d、7 d、14 d 各时间段 HE 结果，A1、B1、C1、D1、E1 分别为上述图片区域放大图，图中 RGC表示视网膜节细胞层，INL、ONL 分别为视网膜内外核层；F 为角膜碱创伤后各时间段视网膜节细胞数量相比于对照组的数量统计，G 为角膜碱创伤后各组视网膜外核层与内核层厚度比率统计。结果采用平均值±标准差（mean ± standard deviation）表示，n = 3。与对照组对比，*P < 0.05，* *P < 0.01.Figure 3-2 The HE staining of Retinal. A, B, C, D and E were the results of the control groupand 1 d, 4 d, 7 d and 14 d after the alkali burn of corneal respectively. A1, B1, C1, D1 were partialenlarged view of the above picture respectively. RGC represents the retinal ganglion cell layer,and INL represents the retinal inner nuclear layer, and ONL represents the retinal outer nuclearlayer in the figure. F represents the number of retinal ganglion cells in each group after cornealalkali burns compared with control group. G represents the ratio of the the thickness of the outernuclear layer to the inner nuclear layer in each group after corneal alkali burn. Data werepresented as mean ± standard deviation, n = 3.*P < 0.05,* *P < 0.01, and compared with thecontrol group.
对照组数量对比，差异具有统计学意义。视网膜外核层与内核层厚度比率统计结果发现在碱创伤后 1 d 其数值上升，说明视网膜组织发生一定程度水肿，之后其它各时期与对照组别的正常组织相比，外核层与内核层厚度比率无明显变化（图3-2）。3.2 小鼠角膜碱烧伤后 HIF-1α 和 AQP1 的表达为了得到碱创伤后 HIF-1α 和 AQP1 在角膜上的变化情况，我们采用免疫荧光染色和 qRT-PCR 技术对其进行了探究。免疫荧光染色结果为，我们的对照组中，HIF-1α 仅在角膜上皮基底膜有表达；碱灼伤后 1 d ，HIF-1α 在角膜上皮层开始有表达，碱创伤后 4 d 和 7 d，除在眼角膜上皮层的有出现外，在基质层也出现表达，至碱创伤后 14 d，HIF-1α 只在角膜上皮层有表达，其余各层无 HIF-1α出现（图 3-3）。免疫荧光染色结果展示，对照实验中，AQP1 仅在角膜内皮层有表达，角膜受到碱创伤后 4 d 和 7 d， AQP1 在内皮细胞和基质层细胞中都有表达，至碱创伤后 14 d，AQP1 仅在内皮层有出现（图 3-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]血管内皮生长因子靶向抗体对大鼠角膜碱烧伤后新生血管抑制作用的研究[J]. 王群,姜严明,赵杰,侯宝杰,吕明,黄一飞. 眼科新进展. 2017(11)
[2]角膜新生血管对角膜损伤神经再生影响的研究[J]. 王平,李坤,张阳,张敬学,武珅,刘谦,邹煦妍,李纳. 眼科. 2017(02)
[3]氯化钴低氧对黑色素瘤细胞系迁移能力及FSTL1表达分泌的影响[J]. 任方元,李莲,姜芳馨,冯靖,陈宝元,曹洁. 天津医药. 2016(03)
[4]HIF-1α pathway: role, regulation and intervention for cancer therapy[J]. Georgina N.Masoud,Wei Li. Acta Pharmaceutica Sinica B. 2015(05)
[5]Clinical correlates of common corneal neovascular diseases: a literature review[J]. Nizar Saleh Abdelfattah,Mohamed Amgad,Amira A Zayed,Hamdy Salem,Ahmed E Elkhanany,Heba Hussein,Nawal Abd El-Baky. International Journal of Ophthalmology. 2015(01)
[6]Ⅱ型糖尿病患者角膜的共聚焦显微镜观察[J]. 马聪慧,王丽娅,李晶. 眼科. 2011(03)
[7]结膜碱性烧伤致干眼模型的探讨[J]. 黄佳,杨水平,陈敏,陈剑,王彦平. 广东医学. 2008(05)
本文编号：3409921
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yank/3409921.html
最近更新
教材专著
