IL-33/ST2信号通路在真菌性角膜炎免疫反应中的研究

发布时间：2021-10-13 09:01

　　目的：观察IL-33及其相关的前炎症因子在真菌性角膜炎角膜上皮中的表达,探讨IL-33/ST2信号通路在真菌性角膜炎免疫反应中的作用及意义。方法：（1）2011年9月至2013年7月就诊于青岛大学附属医院并行角膜移植术的真菌性角膜炎患者30例（30眼）为实验组。健康供体角膜30例（30眼）为对照组,应用免疫组织化学染色法检测IL-33蛋白水平的表达（2）原代培养的正常人角膜上皮细胞为对照组,烟曲霉菌菌丝刺激组为实验组,分别于刺激后不同时间点检测IL-33及相关前炎症因子的表达。真菌刺激前用外源合成的人IL-33、S-ST2和MAPK/p38信号通路的阻断剂SB203580预处理细胞,观察相关前炎症因子的表达变化。分别用荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫组织化学染色法检测各因子mRNA及蛋白水平的表达。结果：（1）IL-33在真菌性角膜炎患者角膜上皮组织中蛋白水平的表达明显多于正常人（2）烟曲霉菌菌丝刺激角膜上皮细胞后IL-33及相关前炎症因子TNF-α. IL-6mRNA及蛋白表达均升高,各组间比较差异有统计学意义（3）外源合成的人IL-33预处理细胞后TNF-α、I... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第1章 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 研究资料
        1.1.2 实验细胞及菌种
        1.1.3 实验所需试剂及耗材
            1.1.3.1 获取角膜组织所需材料
            1.1.3.2 细胞培养所需试剂材料
            1.1.3.3 真菌培养所需试剂
            1.1.3.4 real-time RT-PCR所需试剂及耗材
            1.1.3.5 免疫组织化学染色所需试剂
            1.1.3.6 ELISA试剂盒
        1.1.4 主要仪器
    1.2 研究方法
        1.2.1 人角膜上皮组织切片制备
        1.2.2 烟曲霉菌菌丝抗原刺激液的制备
        1.2.3 细胞培养
        1.2.4 Real-time RT-PCR
        1.2.5 免疫组织化学染色
        1.2.6 酶联免疫吸附试验(ELISA)
    1.3 结果观察及统计学处理
第2章 结果
    2.1 烟曲霉菌的形态学观察结果
    2.2 IL-33在真菌性角膜炎患者角膜上皮中的表达
    2.3 真菌刺激角膜上皮细胞产生IL-33
    2.4 真菌刺激的角膜上皮细胞通过IL-33/ST2产生前炎症因子
    2.5 MAPK/p38信号通路参与了IL-33的诱导
第3章 讨论
结论
参考文献
附图
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]The roles of surfactant protein D during Aspergillus fumigatus infection in human corneal epithelial cells[J]. Cheng-Ye Che, Wen-Yan Jia, Qiang Xu, Na Li, Li-Ting Hu, Nan Jiang, Jing Lin, Qing Wang, Gui-Qiu Zhao Department of Ophthalmology, the Affiliated Hospital of Qingdao University, Qingdao 266003, Shandong Province, China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2012(01)
[2]Effects of COX-2 inhibitor NS-398 on IL-10 expression in rat fungal keratitis[J]. Na Li,Cheng-Ye Che,Li-Ting Hu,Jing Lin,Qing Wang,Gui-Qiu Zhao Department of Ophthalmology,the Affiliated Hospital of Qingdao University,Qingdao 266003,Shandong Province,China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2011(02)
[3]穿透性角膜移植治疗高危真菌性角膜溃疡51例（英文）[J]. 赵桂秋,姜楠,胡丽婷,车成业.  中国组织工程研究与临床康复. 2009(18)
[4]人角膜上皮细胞Toll样受体介导的炎性细胞因子的表达[J]. 高建鲁,吴欣怡.  中华眼科杂志. 2006(07)
[5]镰刀菌和曲霉菌性角膜溃疡的组织病理学特点[J]. 白海青,金梅玲,赵桂秋,孙为荣.  中华眼科杂志. 2004(05)
[6]我国角膜基础和临床研究的现状及发展[J]. 谢立信.  中华眼科杂志. 2010 (10)

博士论文
[1]白细胞介素33在角膜上皮细胞免疫炎症反应中的作用[D]. 林静.青岛大学 2013
[2]Toll样受体介导的TSLP在过敏性结膜炎中的作用和调控机制研究[D]. 张丽丽.青岛大学 2013

硕士论文
[1]Mincle在大鼠角膜上皮抗烟曲霉菌感染固有免疫阶段作用的研究[D]. 陈文俊.青岛大学 2013
[2]Dectin-1受体在真菌性角膜炎角膜上皮中的表达[D]. 李翠.青岛大学 2012



本文编号：3434354