CNTF对角膜神经修复的作用及机制研究

发布时间：2021-12-24 16:54

　　目的通过体外正常小鼠原代三叉神经节细胞培养模型和正常小鼠上皮损伤修复模型,检测CNTF对小鼠三叉神经节中p-STAT3的表达情况,并研究其在小鼠角膜神经再生过程中的机制。方法体外培养正常小鼠原代三叉神经节细胞,分为正常组,AGE组/Stattic组,AGE+睫状神经生长因子（CNTF）组/Stattic+睫状神经生长因子（CNTF）组,通过Western Blot检测三叉神经节细胞中p-STAT3的表达情况,通过免疫荧光染色检测三叉神经节细胞轴突生长变化。体内利用链脲佐菌素（STZ）诱导I型糖尿病小鼠,通过免疫荧光染色和Western Blot检测糖尿病小鼠中p-STAT3的表达情况。正常小鼠结膜下注射药物,分为正常对照组,Stattic组和Stattic+CNTF组,通过WesternBlot检测小鼠三叉神经节中p-STAT3的表达情况,并建立小鼠上皮损伤修复模型,通过荧光素钠染色观察CNTF对上皮及神经修复的影响。结果在体外培养的三叉神经节细胞中,与正常组相比,AGE组p-STAT3表达降低,三叉神经节细胞轴突生长明显减少（P<0.05）;与AGE组相比,加入CNTF后三叉神... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１小鼠三！神经中ＡＧＥ的表达??

ＳＴＡＴ３和ＮＦ２００，结果＆示糖尿病小鼠Ｈ叉神经节细胞中荧光强度明显減弱，表??明Ｐ－ＳＴＡＴ３的表达在糖尿病小鼠三叉神经节细胞中较少，ＳＴＡＴ３倩号通路活化??增加〔图２ｋ??ｐ－ＳＴＡＴ－３?ＮＦ２００?ｍｅｒｇｅ??纖??ｍｍｍ??图２小鼠三叉神经中ｐ－ＳＴＡＴ３的表达（免疫荧光）??２２??

分别提取正常Ｃ５７小鼠和糖尿病小鼠三叉神经中的总蛋白，行Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ，??结果显示，与正常Ｃ５７小鼠（０．２６６±０．０６６３）相比，糖尿病小鼠威叉神经中ｐ－??３丁八丁３表达量（０．１３５５±０．０４７２）显著下降（卩＜０．０５）（图３）。??Ｃｏｎ?Ｄｉａ??０．００４＾?＊??ｐ－ｓｔａｔ３?二二二，?＝?￣????ｑ?０．００３－?Ｉ??＾?｜?〇?０．００２－??ｓｔａｔ３?—?￣［￣??ＧＡＰＤＨ?痛〇〇〇〇上＿＾??，???。’，??图３小鼠三叉神经中ｐ－ＳＴＡＴ３的表达（Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ）??３?ＡＧＥ减弱三叉神经节细胞轴突生长，ＣＮＴＦ可促进被减弱的轴突生??长??体外培养原代小鼠三叉神经节细胞，分为三组，第一组直接用Ｌａｍｉｎｉｎ对８??孔板进行包被，其他两组在包被过程中加入ＭＧ０２００｜ｉＭ，使Ｌａｍｉｎｉｎ糖基化成??为Ｌａｍｉｎｉｎ－ＡＧＥｓ，细胞收集完成后在第三组中加入ＣＮＴＦ５０ｎｇ，培养４８ｈ后对??三叉神经节细胞轴突行免疫荧光染色

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3550856