HMGB1信号通路分子在糖尿病视网膜病变中的表达

发布时间：2022-01-26 18:47

　　目的：通过建立2型糖尿病（type2DM）大鼠模型及体外培养人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cell, ARPE-19），探讨HMGB1信号通路分子在糖尿病视网膜病变（DR）中的蛋白表达情况，为DR的防治研究提供新的思路。方法：选择8周龄的健康雄性SD大鼠，高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射2型糖尿病大鼠模型。造模成功12周后处死大鼠获取视网膜标本，蛋白质印迹及免疫组化技术检测HMGB1及其受体的蛋白表达，酶联免疫吸附试验测定HMGB1信号通路下游信号分子的蛋白表达，Evans-Blue评价BRB的渗透性。培养ARPE-19细胞（10-20代），分为低糖组（5.5mmol/L D-葡萄糖）、高糖组（25mmol/L D-葡萄糖）、高渗对照组（5.5mmol/L D-葡萄糖加20mmol/L甘露醇）、高糖+HMGB1拮抗剂组（25mmol/L D-葡萄糖+100ug/mL HMGB1中和性抗体）、高糖+IgG对照组（25mmol/L D-葡萄糖+100ug/mL IgG抗体）。蛋白质印迹及免疫细胞化学技术检测HMGB1及其受体的蛋白表达，酶联免疫... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

A：HMGB1及其受体RAGE/TLR2/TLR4在正常大鼠和2型糖尿病大鼠视网膜中的蛋白表达B：Western条带的灰度值分析（目标蛋白/Actin-beta）注：*,p<0.05；**，p<0.01；WT，正常对照组；DM，2型糖尿病组；

RAGE/TLR2/TLR4 in retinas of normal control and type 2 diabetic rats. B:The ratio of the scanned immunoblots of target proteins to that ofActin-beta. Notes：*, p< 0.05；**，p< 0.01；WT，normal control group；DM，type 2 diabetic group；IHC 检测视网膜 HMGB1 及其受体的表达定位HMGB1 及其受体 RAGE/TLR4 在正常对照大鼠及 2 型糖尿病大鼠视网膜中均达。HMGB1 和 RAGE 主要表达在视网膜神经节细胞层、内核层、RPE 色素层，TLR4 主要表达在视网膜色素上皮层，TLR2 因为抗体的不稳定性无法确体表达部位（如图 1.2 所示）。

验结果高糖对 ARPE-19 细胞活力的影响如图 2.1 所示，在处理 24、48、72h 时，高糖组 ARPE-19 细胞活力较低糖组，高糖组 ARPE-19 细胞活力亦较高渗对照组降低，差异均具有统计学意义（p<。然而，在 0h 及 12h，高糖组与低糖组及高渗对照组的 ARPE-19 细胞活力无学差异（p>0.05）。在实验的任何时间点，低糖组和高渗对照组 ARPE-19 细胞均无统计学差异（p>0.05）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]高糖对视网膜色素上皮细胞Toll样受体2表达的影响[J]. 陈雪梅,张学东,宗元娟,沈强.  第三军医大学学报. 2012(01)
[2]辛伐他汀对早期糖尿病大鼠视网膜白细胞黏附的影响[J]. 郑天生,张学东,张美珍.  眼科研究. 2007(03)
[3]糖尿病视网膜病变的防治策略[J]. 黎晓新.  中华眼科杂志. 2008 (01)



本文编号：3610991