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Ⅰ型单纯疱疹病毒感染内耳神经元的体外实验研究

发布时间:2022-02-21 17:59
  第一部分 Ⅰ型单纯疱疹病毒感染螺旋神经元的体外实验研究目的:建立Ⅰ型单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus-1, HSV-1)在体外螺旋神经元培养体系中的裂解性感染(lytic infection)模型及潜伏感染(latent infection)再激活(Viral reactivation)模型。方法:出生4-6天的Sprague-Dawley大鼠,解剖出蜗轴,进行消化分离后种植于96孔板内。一部分神经元培养4天后直接加入表达内源性绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)的低滴度HSV-1,形成裂解性感染,相差显微镜及荧光显微镜下观察神经元及胶质细胞形态变化和GFP表达情况:另一部分培养的神经元在第二天加入含有阿昔洛韦(Acyclovir, ACV)的培养液,第4天加入HSV-1后并继续培养于含有ACV的培养液中,形成潜伏感染,第8天撤去ACV,将培养液换成含有曲古抑菌素(Trichostatin A, TSA)的培养液,荧光显微镜下每日观察GFP表达情况,计数呈GFP阳性的96孔板的孔数。搜集裂解性感染模型及潜伏感染模型的细胞上清... 

【文章来源】:复旦大学上海市211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】:78 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 Ⅰ型单纯疱疹病毒感染螺旋神经元的体外实验研究
    材料与方法
    结果
        1. 螺旋神经元体外培养
        2. 螺旋神经元的HSV-1裂解性感染
        3. 螺旋神经元的HSV-1潜伏感染
        4. 螺旋神经元的HSV-1潜伏感染再激活
    讨论
    小结
第二部分 非甾体消炎药对Ⅰ型单纯疱疹病毒感染体外培养前庭神经元的影响
    材料与方法
    结果
        1. 生理状态下前庭神经元即可表达COX-1和COX-2
        2. 相差显微镜下前庭神经元的辨认
        3. HSV-1诱导前庭神经元COX的表达
        4. 前庭神经元培养体系NSAIDs药物对HSV-1复制的抑制作用呈浓度依赖性
        5. 外源性PGE_2能一定程度逆转NSAIDs药物的抑制作用
        6. 吲哚美辛对前庭神经元内呈潜伏感染的HSV-1再激活的影响
    讨论
    小结
全文总结
    一. 内容总结
    二. 研究创新点
参考文献
缩略词
综述
    参考文献
研究生期间发表论文
致谢



本文编号:3637779

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