晶状体上皮细胞中Hsf4b/S299磷酸化修饰的信号通路研究

发布时间：2022-07-07 12:50

　　背景先天性白内障是导致儿童失明的主要原因之一,大约0.3-1.5/1000的儿童患先天性白内障,在胚胎发育早期,基因功能失调导致晶状体发育异常,是先天性白内障发生的主要原因。目前先天性白内障的致病基因有30多个。其中转录因子基因突变和功能缺陷是诱发先天性白内障的病因之一,如Pax6、Fox E3、Six3、Prox1、Sox2/3、Maf、Pitx3、AP-2a和Hsf4,这些转录因子的激活和失活决定着晶状体发育进程。Hsf4是调控新生儿期晶状体发育的一个关键转录因子。Hsf4敲除的小鼠和斑马鱼会导致晶状体发育异常以及白内障相关表型,主要病理改变为晶状体前囊上皮非正常增生、纤维细胞内变性蛋白堆积和纤维细胞终末分化障碍,因此,Hsf4的转录调控对维持新生儿期晶状体正常发育至关重要,但是我们对Hsf4的转录活性的调控机制还不清楚。Hsf4属于热休克转录因子家族,该家族成员主要通过转录调控热休克蛋白的表达应激外界环境刺激。在哺乳动物细胞中,该家族成员有Hsf1、Hsf2、Hsf3和Hsf4。Hsf1是诱导热休克反应的主要转录调控因子。Hsf4有Hsf4a和Hsf4b两个亚基,Hsf4b是特异... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
1 材料与方法
    1.1 实验仪器
    1.2 抗体和主要试剂
    1.3 主要试剂配制
        1.3.1 细菌培养的主要试剂
        1.3.2 分子试剂配方
        1.3.3 Western blot所用试剂
        1.3.4 细胞培养试剂的配方
    1.4 实验方法
        1.4.1 分子生物学方面
        1.4.2 细胞培养
        1.4.3 免疫印迹(Western Blot)
        1.4.4 C57小鼠剥离晶状体
        1.4.5 核质分离
        1.4.6 免疫沉淀实验
        1.4.7 组织免疫荧光
2 实验结果
    2.1 订制的Hsf4b/S299位点的磷酸化抗体能特异性识别S299磷酸化的Hsf4b
    2.2 顺铂(cis)、MG132和EGF可诱导Hsf4b/S299磷酸化
    2.3 ERK 1/2激酶促进Hsf4b/S299位点的磷酸化修饰
    2.4 MEK 1-ERK 1/2激活的Hsf4b/S299位点的磷酸化
    2.5 Mek 1-ERK 1/2介导的Hsf4b/S299位点的磷酸化抑制Hsf4b的活性
    2.6 Hsf4b和p-Hsf4b/S299在C57小鼠晶状体中的时空表达
    2.7 ERK 1/2激酶参与晶状体中Hsf4b/S299位点的磷酸化修饰及其活性
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Epidemiology and molecular genetics of congenital cataracts[J]. Jun Yi 1, Jun Yun 1, Zhi-Kui Li 2,Chang-Tai Xu 3, Bo-Rong Pan 4 1Department of Vascular Endocrine Surgery, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China 2Department of Respiratory, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China 3Department of Anatomy and Editorial Office of Chinese Journal of Neuroanatomy, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China 4Outpatient Department of Oncology, Institute of Tumour, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China.  International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2011(04)



本文编号：3656447