Slit2对人脉络膜微血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响

发布时间：2017-05-28 06:07

  本文关键词：Slit2对人脉络膜微血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的： 观察腺病毒介导的Slit2及Slit2ShRNA转染缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial cells RPE）对人脉络膜微血管内皮细胞(Human choroidal microvascular endothelial cell,HCMEC)增殖的影响，观察外源性Slit2蛋白对人HCMEC细胞迁移和管腔形成的影响，并研究探讨Slit2/Robo4信号通路在脉络膜新生血管（Choroidalneovascularization,CNV)中的可能作用，为CNV提供新的治疗方向。 方法： 1.体外培养人RPE细胞、人HCMEC细胞，，200μmol/L氯化钴建立化学缺氧模型，观察缺氧条件下Slit2及Slit2ShRNA转染的RPE细胞对HCMEC细胞增殖的影响； 2.RT-PCR、免疫组化鉴定Slit2、Robo1、Robo4、Rac1、cdc42在HCMEC细胞上的表达； 3.Western-blot检测不同浓度外源性Slit2蛋白（0ng/ml、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL、125ng/mL、150ng/mL）对人HCMEC细胞Robo4表达的影响； 4.外源性150ng/mlSlit2对VEGF诱导的人HCMEC细胞迁移和管腔形成的影响； 5. Western-blot检测Rac1、cdc42的表达。 结果： 1.Slit2组光吸收值(A值)在24h、48h均高于其他组(与缺氧组P=0.001，其余P=0.000），Slit2ShRNA组光吸收值(A值)在24h、48h均低于其他组（48h与缺氧组P=0.003，与空腺病毒组P=0.008，其余P=0.000）； 2.Slit2、Robo4、Rac1、cdc42表达于人HCMEC细胞上； 3.在外源性不同浓度的Slit2（0ng/ml、50ng/mL、75ng/mL、100ng/mL、125ng/mL、150ng/mL）作用下，随着Slit2蛋白浓度的增加，Robo4表达增加； 4.外源性150ng/ml Slit2蛋白可以抑制VEGF诱导的人HCMEC细胞的迁移和管腔形成； 5.实验组2中Rac1表达高于阳性对照组，差异有统计学意义（p0.05)，阴性对照组与实验组1差异无统计学意义（p0.05)。四组中cdc42的表达差异无明显统计学意义（p0.05)。 结论： 1.Slit2的高表达可明显促进HCMEC细胞的增殖，沉默RPE细胞中的Slit2的表达后，会明显抑制HCMEC细胞的增殖。 2.外源性Slit2蛋白抑制VEGF诱导的人HCMEC细胞的迁移和管腔形成，Slit2/Robo4信号通路可能通过影响下游信号分子Rac1从而达到抑制作用。
【关键词】：视网膜色素上皮细胞 人脉络膜微血管内皮细胞 Slit2 Robo4 血管内皮生长因子
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R773.4
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 前言11-13
• 第一部分 缺氧条件下 Slit2 及 Slit2 ShRNA 转染的 RPE 细胞对 HCMEC 细胞增殖的影响13-20
• 1 材料与方法13-16
• 2 结果16-18
• 3 讨论18-19
• 4 结论19-20
• 第二部分 Slit2/Robo4 信号通路对 HCMEC 细胞迁移和管腔形成的影响20-32
• 1 材料与方法20-26
• 2 结果26-30
• 3 讨论30-31
• 4 结论31-32
• 全文结论32-33
• 参考文献33-35
• 文献综述35-39
• 参考文献37-39
• 致谢39-40
• 硕士研究生在读期间发表论文40-41

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 陈军;于东风;刘弋;杨锦雷;;Slit2/Robo1蛋白在直肠癌中的表达及与微血管密度的关系[J];安徽医药;2011年06期

2 张晓梅;王彬杰;王巍;王小丹;付小玻;马洪梅;张楠;;Transwell小室共培养条件下缺氧时视网膜色素上皮细胞对内皮细胞增殖的影响[J];哈尔滨医科大学学报;2011年04期

3 黄莉芸;周希瑗;;腺病毒介导的slit2 shRNA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞中血管内皮生长因子表达的影响[J];中国生物制品学杂志;2014年03期

4 杨淑萍;卢雪峰;王仲;洪彬骅;张永生;;Slit2与MVD及食管癌生物学行为关系的研究[J];医学与哲学(临床决策论坛版);2009年01期

  本文关键词：Slit2对人脉络膜微血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：402047