玻璃酸钠模拟粘蛋白功能和重建生理泪膜的机制研究

发布时间：2017-07-08 15:18

  本文关键词：玻璃酸钠模拟粘蛋白功能和重建生理泪膜的机制研究

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【摘要】：目的： 本研究拟分析玻璃酸钠在兔干眼模型中的治疗效能，阐明其模拟粘蛋白功能和重建生理泪膜的机制。 材料和方法： 健康新西兰兔48只，体重2.5kg-3kg，电脑随机分为4组，每组12只，选取右眼作为实验眼，A组为0.1%玻璃酸钠滴眼液治疗组，B组为0.3%玻璃酸钠滴眼液治疗组，C组为生理盐水对照组，D组为空白对照组，分别颈部皮下注射氢溴酸东莨菪碱注射液1.0mg/kg，4次/天，连续35天，每天8点、11点、14点和18点进行注射。注药7天后：A组滴0.1%玻璃酸钠滴眼液，B组滴0.3%玻璃酸钠滴眼液，C组滴生理盐水，连续28天。注药第7天、第14天、第21天、第28天和第35天对每组行泪液分泌试验、泪液蕨类结晶实验、角结膜丽丝胺绿染色、结膜印记细胞学检查、泪膜破裂时间（BUT）、角膜荧光素染色。A、B组滴玻璃酸钠滴眼液5分钟，30分钟，60分钟，90分钟行角结膜丽丝胺绿染色、角膜荧光素染色和泪液蕨类结晶实验。分别在第21天和35天氯胺酮过量随机处死每组6只兔子，取实验眼眼角膜和结膜组织，免疫荧光技术观察粘蛋白MUC5AC、MUC1的表达。扫描电子显微镜下观察角膜上皮的再生和修复。 结果： 1.皮下注射氢溴酸东莨菪碱注射液7天后，实验兔双眼角膜荧光素钠染色均阳性，泪液分泌量均低于11.0±1.59mm。 2.与对照组相比，0.1%玻璃酸钠滴眼液组第一次滴药90min内角结膜丽丝胺绿染色、角膜荧光素染色和泪液蕨类结晶评分差异均无统计学意义，0.3%玻璃酸钠滴眼液组30分钟后丽丝胺绿和荧光素钠染色评分差异有统计学意义（P0.05），泪液蕨类结晶实验90分钟内评分差异无统计学意义。 3.4组泪液分泌量整个实验期间差异无统计学意义。 4.与对照组相比，0.1%玻璃酸钠滴眼液组丽丝胺绿染色评分降低，至第28天，差异有统计学意义（P0.002），第35天统计学无差异。0.3%玻璃酸钠滴眼液组至第28天，差异有统计学意义（P0.001），并持续至实验结束。0.1%玻璃酸钠滴眼液组和0.3%玻璃酸钠滴眼液组荧光素钠染色评分降低，至第21天，差异有统计学意义（PA0.001，PB＜0.001），并持续至实验结束。 5.与对照组相比，A组泪液蕨类结晶实验评分降低，至第14天差异有统计学意义（P0.02），并持续至第28天（P0.01），B组至第14天差异有统计学意义（P0.04），并持续至实验结束。 6.与对照组相比，A组和B组泪膜破裂时间（BUT）时间延长，至第28天，差异有统计学意义（PA0.006，PB0.005），，并持续至实验结束。 7.与对照组相比，A组和B组结膜印记细胞学，至第35天，差异有统计学意义（PA0.006，PB0.005）， 8.与对照组相比， A、B组实验眼角结膜上皮Muc5Ac、Muc1表达显著高于C、D组，CD44表达低于C、D组。结论： 玻璃酸钠滴眼液不仅能够模拟泪液粘蛋白稳定泪膜、保水、保湿、润滑的作用，而且能促进角膜上皮细胞增殖和损伤修复，减轻角膜上皮炎症，恢复眼表损伤，从而有效治疗干眼。
【关键词】：玻璃酸钠滴 干眼 粘蛋白
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R777.34;R-332
【目录】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料和方法12-18
• 2.1 实验材料12-13
• 2.1.1 实验动物12
• 2.1.2 主要试剂和耗材12-13
• 2.2 实验方法13-17
• 2.2.1 动物模型建立13
• 2.2.2 观察指标及测试方法13-16
• 2.2.3 免疫荧光化学法16
• 2.2.4 扫描电镜观察16-17
• 2.3 统计学分析17-18
• 第3章 结果18-33
• 3.1 泪液分泌实验18-19
• 3.2 荧光素钠染色评分19-21
• 3.3 丽丝胺绿染色评分21-24
• 3.4 泪膜破裂时间（BUT）24
• 3.5 结膜印记细胞学检查24-25
• 3.6 泪液蕨类结晶25-26
• 3.7 免疫荧光26-31
• 3.8 扫描电镜31-33
• 第4章 讨论33-38
• 4.1 皮下注射氢溴酸东莨菪碱建立兔干眼模型33-35
• 4.2 玻璃酸钠模拟粘蛋白功能和重建生理泪膜的机制研究35-38
• 4.2.1 保水作用35-36
• 4.2.2 润滑作用36
• 4.2.3 稳定泪膜36
• 4.2.4 对细胞保护作用36-37
• 4.2.5 促进角膜上皮修复37-38
• 第5章 全文总结38-39
• 第6章 问题和展望39-40
• 致谢40-41
• 参考文献41-44
• 综述44-52
• 参考文献50-52

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