AChE缺失或抑制可减少碘酸钠诱导的视网膜色素上皮及感光细胞凋亡与caspase3表达

发布时间：2017-07-13 18:05

  本文关键词：AChE缺失或抑制可减少碘酸钠诱导的视网膜色素上皮及感光细胞凋亡与caspase3表达

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【摘要】：目的：本研究旨在研究AchE在碘酸钠诱导的RPE及感光细胞凋亡中的表达情况，并探究AchE基因敲除与抑制剂对细胞凋亡的作用。 方法：对C57BL/6小鼠尾静脉注射较高剂量NaIO3（50毫克/千克），分别在第6小时、第1天、3天、7天猝死取眼球进行蛋白印迹与免疫荧光。对小鼠分别灌胃给予不同剂量的多奈哌齐（0.5、2.5、12.5毫克/千克）预处理3天与不同剂量的柚皮苷（30、60毫克/千克）1天，，NaIO3注射后持续给药3天，猝死小鼠取眼球进行蛋白印迹与免疫荧光。分别对AChE+/+和AChE+/-小鼠尾静脉注射较低剂量NaIO3（25毫克/千克），在第3天猝死取眼球进行蛋白印迹与免疫荧光。采用TUNEL标记感光细胞凋亡情况，免疫荧光技术观察Caspase3的表达情况，同时采用蛋白印迹技术检测AchE的表达情况。 结果：较高剂量NaIO3注射显著诱导细胞凋亡，TUNEL染色发现注射后6小时即出现RPE凋亡，随后的感光细胞凋亡在第3天达到高峰，第7天有所回降。同时，蛋白印迹分析与免疫荧光结果表明AChE、Caspase3的表达也是显著升高的。AChE+/-碘酸钠注射组的TUNEL阳性细胞与AChE+/+碘酸钠注射组相比具有明显差异（P＜0.01）。与PBS灌胃组相比，给予乙酰胆碱酯酶抑制剂会显著降低凋亡细胞的程度（P＜0.01）。而且不同浓度之间具有统计学意义（P＜0.01）。免疫荧光显示在AChE基因敲除与抑制剂抑制凋亡的同时可见caspases-3的激活受抑。 结论：AChE可能是个促凋亡因子，抑制AChE表达可减少感光细胞凋亡。AChE基因敲除与抑制剂主要抑制caspases-3的激活达到抑制凋亡的效果。总之，我们研究结果说明AChE抑制剂可能为将来临床上治疗视网膜退行性疾病提供一个思路。
【关键词】：乙酰胆碱酯酶 细胞凋亡 乙酰胆碱酯酶抑制剂 碘酸钠
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R774.1
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文缩略词表7-8
• 第1章 前言8-11
• 第2章 材料与方法11-20
• 2.1 材料11-15
• 2.1.1 动物及分组11-12
• 2.1.2 PCR 所需12
• 2.1.3 抗体12
• 2.1.4 免疫荧光染色所需12
• 2.1.5 溶液配制12-14
• 2.1.6 实验仪器14-15
• 2.2 实验方法15-19
• 2.2.1 PCR 分析15-16
• 2.2.2 冰冻切片16
• 2.2.3 免疫荧光染色16-17
• 2.2.4 TUNEL 标记17
• 2.2.5 蛋白印迹17-19
• 2.3 统计学分析19-20
• 第3章 结果20-29
• 3.1 小鼠基因型鉴定20
• 3.2 感光细胞凋亡时期与 AchE 、 Caspase3表达20-22
• 3.2.1 感光细胞凋亡时期20-22
• 3.2.2 不同时期 AchE 、Caspase3表达22
• 3.3 AchE基因敲除对凋亡的影响22-25
• 3.3.1 AchE 基因敲除后凋亡的变化22-24
• 3.3.2 AchE 基因敲除后 AchE 、Caspase 3 表达变化24-25
• 3.4 AchE 抑制剂对凋亡的影响25-29
• 3.4.1 AchE 抑制剂对凋亡的变化25-27
• 3.4.2 AchE 抑制剂对 Caspase3 表达变化27-29
• 第4章 讨论29-34
• 第5章 结论34-35
• 致谢35-36
• 参考文献36-39
• 综述39-47
• 参考文献45-47

【引证文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 张坚;;奥沙利铂对人视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响[J];新乡医学院学报;2015年11期

本文编号：537846