GCaMP基因工程化的C17.2神经干细胞的钙离子成像研究

发布时间：2017-07-14 16:09

  本文关键词：GCaMP基因工程化的C17.2神经干细胞的钙离子成像研究

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【摘要】：目的研究GCa MP(属于基因编码钙指示剂/蛋白钙指示剂)基因工程化的C17.2神经干细胞的钙离子成像。方法用慢病毒转染C17.2细胞,获得稳定表达GCa MP基因的C17.2-GCa MP细胞。Real-time PCR定量检测C17.2细胞及C17.2-GCa MP细胞中神经干细胞标志物巢蛋白(nestin)的表达情况。将C17.2细胞(Fluo-4 AM染色后)和C17.2-GCa MP细胞置于定制数字荧光显微镜下进行钙离子荧光检测。结果 Real-time PCR检测结果提示C17.2细胞及C17.2-GCa MP细胞中nestin表达差异无统计学意义(P0.05)。C17.2-GCa MP细胞较Fluo-4 AM染色C17.2细胞钙离子荧光锐波(spike)波形持续时间长且相对荧光强度强(P0.05),在Fluo-4 AM染色C17.2细胞中能观察到钙离子荧光慢波(wave)波形,而C17.2-GCa MP wave波形不典型。结论 C17.2-GCa MP细胞在保持神经干细胞干性的同时能够监测细胞内钙离子变化,能够运用于神经干细胞移植治疗视网膜色素变性功能整合的研究。
【作者单位】： 第三军医大学西南医院全军眼科中心视觉损伤与再生修复重庆市重点实验室;
【关键词】： C.神经干细胞 GCaMP GECI Fluo- AM
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划,2013CB967002)~~
【分类号】：R774.13
【正文快照】： 庆市重点实验室)视网膜色素变性是一类遗传性致盲性眼病[1],药物治疗无效[2],干细胞移植治疗具有良好前景。干细胞移植治疗功能整合机制研究是干细胞移植治疗视网膜变性疾病研究的重要方面。神经元通过整合形成突触功能连接,钙离子在突触功能信号传递中发挥重要作用[3]。GCa M

【共引文献】

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