鼻咽癌细胞中S100A8与S100A9基因的克隆及其质粒构建和表达

发布时间：2017-07-17 06:05

  本文关键词：鼻咽癌细胞中S100A8与S100A9基因的克隆及其质粒构建和表达

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【摘要】：我们发现S100A8和S100A9蛋白质不仅在鼻咽癌患者血浆中水平高于健康人,而且在鼻咽癌组织及培养细胞中也存在高表达。本研究的目的是在鼻咽癌细胞中克隆S100A8和S100A9基因并构建表达质粒和在鼻咽癌细胞中表达,为内源性S100A8和S100A9蛋白质与鼻咽癌发生发展的关系研究奠定基础。PCR扩增目的基因S100A8和S100A9片段,将其插入载体p Bud CE4.1构建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后转染至人鼻咽癌细胞系(CNE1)进行表达并用Real time-PCR及Western Blot进行检测。PCR、双酶切和测序结果显示,S100A8和S100A9氨基酸序列无变异(S100A8有1个碱基突变),表达质粒S100A8-S100A9-p Bud CE4.1构建正确。Real Time-PCR和Western Blot结果显示,S100A8和S100A9基因在CNE1中正确转录与表达。成功克隆S100A8和S100A9基因并构建S100A8-S100A9-p Bud CE4.1表达质粒且可在鼻咽癌细胞中稳定表达。
【作者单位】： 广西壮族自治区疾病预防控制中心;广西医科大学生物化学与分子生物学教研室;广西医科大学医学科学实验中心;
【关键词】： 鼻咽癌 质粒pBudCE. CNE细胞系 SA SA
【基金】：国家自然科学基金(No.81260405) 广西自然科学基金(No.2011GXNSFA018233) 广西区域性高发肿瘤早期防治研究重点实验室基金项目(GK2013-A-02-02)共同资助
【分类号】：R739.63
【正文快照】： Cloning,Plasmid Construction and Expression of S100A8 and S100A9 Genein Nasopharyngeal Carcinoma CellsHe Qin1Huang Yuanjiao2,3*Han Zijian3Yan Xuemin2Cai Yan21 Guangxi Zhuang Autonomous Region Center for Disease Control and Prevention,Nanning,530021;2 Dep

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本文编号：552233