对乙酰氨基酚致小鼠听觉损伤的实验研究

发布时间：2017-08-08 10:34

  本文关键词：对乙酰氨基酚致小鼠听觉损伤的实验研究

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【摘要】：目的：探讨对乙酰氨基酚（4-Acetaminophen，APAP）对小鼠听觉的损伤作用，及其可能的损伤机制，为临床预防及减少因使用对乙酰氨基酚不当而引起的听力下降提供实验依据。 方法：1、建立对乙酰氨基酚致小鼠听力损伤模型：将耳廓反应灵敏的健康7周龄C57小鼠，体重20±2g，雌雄不分，随机分为4组，分别为低AP组（150mg/(kg·d)、中AP组（300mg/(kg·d)、高AP组（600mg/(kg·d)）组、空白对照组，检测每组于喂药第0、2、4、9天后听性脑干诱发电位(ABR)反应阈；2、通过高效液相色谱法（HPLC）测定小鼠耳蜗内淋巴液中对乙酰氨基酚药物的浓度，并使用免疫荧光法观测耳蜗基底膜内毛细胞（IHCs）形态学变化。3、选取C57小鼠20只，分为正常组C57小鼠10只，给予灌胃0.2ml/天0.9%生理盐水；实验组C57小鼠10只，给予灌胃对乙酰氨基酚300mg/kg·天。2组小鼠灌胃3天后，，行耳蜗急性分离并经木瓜蛋白酶消化获得活性良好的IHCs，行全细胞膜片钳技术记录耳蜗IHCs电生理变化情况。 结果：1、使用对乙酰氨基酚灌胃30分钟后，于C57小鼠耳蜗内淋巴液中可检测到对乙酰氨基酚，内淋巴液中对乙酰氨基酚的药物浓度与灌服剂量呈正相关。2、对乙酰氨基酚各组随给药时间延长，ABR听阈增高。低、中、高剂量组给药后9天听阈平均阈值分别为低剂量组50±11dB；中剂量组44±16dB；高剂量组55±17dB，与空白对照组进行比较，差异有统计学意义(P0.05)；3、随灌服时间延长，对乙酰氨基酚各组免疫荧光镜显示毛细胞出现不同程度缺失。4、全细胞膜片钳技术记录实验组内毛细胞较正常组内毛细胞钙离子内化电流减小，膜电容峰值及膜电容均降低。 结论：1、对乙酰氨基酚能透过血迷路屏障进入耳蜗内淋巴液中，从而直接作用于耳蜗螺旋器（corti器），破坏其中的内、外毛细胞生理功能；2、C57小鼠灌胃对乙酰氨基酚后，造成C57小鼠ABR阈值随给药浓度增加而提高，其损伤程度与使用剂量、时间呈正相关。耳蜗基底膜免疫荧光显示耳蜗毛细胞损伤，对乙酰氨基酚致小鼠听力损伤模型建立成功；3、对乙酰氨基酚造成听力损伤的机制可能有两个方面：a对乙酰氨基酚可以造成内毛细胞的直接损伤；b对乙酰氨基酚致C57小鼠耳蜗内毛细胞电生理改变异常，内毛细胞Ica2+下降，△Cm降低，从而造成听力损伤。
【关键词】：对乙酰氨基酚 内毛细胞 听力损伤 全细胞膜片钳技术
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R969.3;R764
【目录】：

• 缩略语表4-5
• Abstract5-7
• 摘要7-8
• 第一章 前言8-11
• 第二章 对乙酰氨基酚致小鼠听力损伤的实验研究11-22
• 2.1 材料与方法11-14
• 2.2 实验结果14-17
• 2.3 讨论17-21
• 2.4 小结21-22
• 第三章 对乙酰氨基酚致小鼠耳蜗内毛细胞电生理的改变22-30
• 3.1 材料与方法22-25
• 3.2 实验结果25-27
• 3.3 讨论27-29
• 3.4 小结29-30
• 全文结论30-31
• 参考文献31-34
• 文献综述 对乙酰氨基酚致听力损伤的研究进展34-43
• 参考文献41-43
• 攻读学位期间的研究成果43-44
• 致谢44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 周亚光,张学渊;阿霉素对豚鼠耳蜗外侧壁中多耐药基因1基因表达的影响[J];临床耳鼻咽喉科杂志;2005年07期

2 张欣欣,韩东一,杨伟炎,姜泗长;活性氧和耳聋[J];中华耳鼻咽喉科杂志;2002年01期

3 陈世琴;于宁;叶胜难;杨仕明;翟所强;;豚鼠耳蜗外毛细胞的快速分离及活力观察[J];中华耳科学杂志;2010年04期

4 张建英;覃文刚;;老年病人安全服药管理与对策[J];中医药管理杂志;2012年12期

本文编号：639565