微囊藻毒素-LR的生物素-亲和素-时间分辨荧光免疫分析法
本文选题:微囊藻毒素-LR + 时间分辨荧光免疫分析法 ; 参考:《环境与健康杂志》2015年01期
【摘要】:目的运用生物素-亲和素信号放大系统,建立高灵敏的微囊藻毒素-LR(MC-LR)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测方法。方法采用5μg/ml二抗Ig G包被板,样品中的MC-LR与生物素-MC-LR半抗原(1∶300)竞争限量抗MC-LR抗体(1∶1 000),用铕标记的链霉亲和素示踪,采用TRFIA法检测水样中的MC-LR含量。结果在0.1~5 ng/ml的线性范围内,得到MC-LR-TRFIA的回归方程为y=-29 132x+38 057,r=0.991 5。方法的灵敏度为0.02 ng/ml,平均回收率为80.2%~102.0%,批内和批间的RSD分别为4.3%~8.1%和9.9%~15.2%。该方法检测MC-LR与MC-YR和MC-LF的交叉率均小于10%。结论基于生物素-亲和素信号放大系统的MC-LR-TRFIA方法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于水中MC-LR浓度的检测。
[Abstract]:Objective to establish a highly sensitive time resolved fluorescence immunoassay (TRFIA) method for the detection of microcystin-LRX MC-LR by using biotin-avidin signal amplification system. Methods A 5 渭 g/ml second antibody IgG coating plate was used. The MC-LR in the sample competed with biotin -MC-LR hapten (1: 300) in a limited amount of anti MC-LR antibody (1: 1 000). The MC-LR content in water samples was determined by TRFIA with europium labeled streptavidin tracer. Results within the linear range of 0.1 ng/ml, the regression equation of MC-LR-TRFIA was yi-29 132x 38.057-0.9915. The sensitivity of the method was 0.02 ng / ml, the average recovery was 80.2% and 102.0, and the RSD in and between batches was 4.3% and 9.9%, respectively. The crossover rate of MC-LR with MC-YR and MC-LF is less than 10%. Conclusion the MC-LR-TRFIA method based on biotin-avidin signal amplification system is sensitive, specific and easy to operate. It is suitable for the detection of MC-LR concentration in water.
【作者单位】: 江苏省原子医学研究所卫生部核医学重点实验室江苏省分子核医学实验室;江南大学药学院;
【基金】:江苏省社会发展基金(BE2009631)
【分类号】:R114;O657.3
【参考文献】
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【共引文献】
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【二级参考文献】
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,本文编号:1990181
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