镉暴露对HepG2细胞NRF2信号通路影响

发布时间：2019-10-16 06:48

【摘要】：目的探讨镉暴露对HepG2细胞转录因子NF-E2相关因子2(NRF2)信号通路的影响。方法采用甲佲比色法测定CdCl_2(0、1、2.5、5、10、25、50、100、200μmol/L)处理24 h后,HepG2细胞活力变化;应用蛋白免疫印迹法检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,NRF2蛋白水平;采用RT-q PCR方法检测10μmol/L CdCl_2处理细胞2、4、6、12、24 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化,检测CdCl_2(1、2、5、10、20μmol/L)处理细胞6 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平变化。结果 HepG2细胞活力随镉处理剂量升高而降低(P0.05);与对照组(0.60±0.01)比较,1、2、5、10、20μmol/L镉处理组HepG2细胞NRF2蛋白表达水平[分别为(0.65±0.01)、(1.37±0.04)、(1.94±0.05)、(2.24±0.07)、(2.22±0.05)]均明显升高(P0.05);与对照组比较,镉处理6 h时,HepG2细胞内GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别为(45.76±7.04)、(114.21±5.23)、(59.52±1.50)、(674.13±27.12)]明显升高(P0.05);与对照组比较,5μmol/L镉处理组HepG2细胞内GCLC和GCLM m RNA水平[分别为(24.77±2.16)、(29.93±0.67)]升高,2μmol/L镉处理组HepG2细胞内HO1和AKR1C1 m RNA水平[分别(28.55±2.02)、(186.32±12.63)]升高(P0.05)。结论镉暴露能激活HepG2细胞系中NRF2信号通路。
【图文】：

on-ferroni检验;以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2．1镉暴露对HepG2细胞活力影响对照组HepG2细胞活力为(100±5.19)%，1、2.5、5、10、25、50、100、200μmol/L镉处理组细胞活力分别为(107.88±3.92)%、(100.58±3.10)%、(99.94±3.20)%、(85.12±1.68)%、(72.43±1.89)%、(55.27±0.87)%、(33.79±3.95)%和(20.51±3.12)%;随镉处理浓度增加，细胞活力逐渐降低，镉剂量大于10μmol/L时，细胞活力明显低于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。2．2镉处理对HepG2细胞中NRF2蛋白表达水平影响(图1)对照组、1、2、5、10、20μmol/LCdCl2处理组HepG2细胞中NRF2蛋白表达水平分别为(0.60±0.01)、(0.65±0.01)、(1.37±0.04)、(1.94±0.05)、(2.24±0.07)和(2.22±0.05);与对照组比较，镉处理组HepG2细胞中NRF2蛋白表达水平明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。注:1:对照组;2～6:1、2、5、10、20μmol/L染镉组。图1镉处理对HepG2细胞NRF2蛋白表达影响2．3镉处理不同时间对HepG2细胞NRF2通路下游基因mRNA表达影响(表1)与对照组比较，，各剂量镉处理组HepG2细胞中NRF2通路下游基因GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1mRNA表达水平明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05)，且均在镉处理6h时表达量出现峰值。表1镉处理不同时间对HepG2细胞NRF2下游基因mRNA表达影响(xs

本文编号：2549854