环境激素双酚A对大鼠生精细胞损伤及对TERT、NO、NOS表达的影响

发布时间：2019-11-13 05:18

【摘要】：目的：近年来，随着经济的发展和社会进步，环境的污染越来越严重，而环境的破坏也直接或间接导致了男性生殖能力的下降，男性生殖能力下降的主要表现是内在或外在因素对睾丸和精子的影响。男性生育能力的降低已直接影响到人类未来的发展，导致这种结果的因素是多种多样的，而环境激素对生殖的危害越来越受到男科医生的重视。BPA是环境激素的一种，具有雌激素样活性，是目前国内外研究的焦点，但是，对于BPA的生殖毒性，国内外学者的研究还比较少。目前对BPA生殖毒性的研究主要集中在睾丸生殖细胞在形态学方面的变化，有学者通过研究BPA染毒的孕鼠或幼鼠发现其对睾丸内生殖细胞形态和精子的产生有影响，也有研究表明环境激素可以导致雄性生殖系统发育异常。本实验利用双酚A（BPA）染毒大鼠模型观察不同剂量的BPA对雄性睾丸内生精细胞的损伤及端粒酶、端粒酶逆转录酶(TERT)、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）表达的影响，探讨BPA生殖毒性的可能作用机制。方法：选择符合试验标准的健康雄性SD大鼠48只，将其随机分为4组：对照组及染毒低剂量组、中剂量组、高剂量组。染毒方法：将BPA溶于食用玉米油，配置成2、20、200mg/(kg*d)3种浓度，灌胃体积为1ml/d，每天上午8时灌胃，对照组给予同体积的食用玉米油,连续灌胃8周，计算睾丸脏器系数，取附睾作精子密度、活动率及畸形率测定，免疫组化方法检测大鼠生精细胞TERT活性的表达；用硝酸还原酶法检测睾丸组织NO的含量；化学比色法检测睾丸组织NOS的活性。应用SPSS13.1统计软件，采用单因素方差分析(one-way ANOVA)方法，组间比较选用LSD法;采用直线相关分析描述两变量之间的关系数。检验标准：α=0.05,P0.05有统计学差异。结果：大鼠睾丸组织病理学观察：经BPA染毒的低剂量组与对照组相比变化不大；中、高剂量组生精小管排列较松散，管腔中生精细胞排列紊乱、疏松，细胞体积略有缩小；睾丸间质可见不同程度水肿，间质细胞分布稀疏。大鼠体重及睾丸、附睾脏器重量及睾丸脏器系数检测：随着BPA染毒剂量的增加，大鼠体重、右睾丸和右附睾的重量逐渐降低，染毒中、高剂量组与对照组相比上述指标均有统计学意义(P＜0.05)，且大鼠体重、右睾丸及右附睾与BPA染毒剂量呈负相关性(r=-0.844，p＜0.001； r=-0.903，p＜0.001； r=-0.605，，p＜0.001)；精子质量分析：大鼠的精子密度、活率随染毒剂量的增加而逐渐降低，中、高剂量组与对照组相比降低明显，差异有统计学意义(P＜0.05)；大鼠精子总畸形率也明显增高，与对照组比较低剂量组增高不明显(P0.05)；中、高剂量组与对照组相比有统计学意义(P＜0.05)。生精细胞TERT表达检测： TERT阳性产物在各剂量组的生精细胞中均有表达，与对照组相比均有不同程度的降低，低剂量组表达无统计学意义(P0.05)，中、高剂量组与对照组相比均有统计学意义(P＜0.05)，且TERT阳性产物表达与BPA染毒剂量呈负相关（r=-0.885，p＜0.001)，各剂量组TERT的表达与精子密度呈正相关性（r=0.831，p＜0.001）。生精细胞NO、NOS的表达检测：大鼠睾丸组织中NO的含量以及NOS活性在各剂量组均有不同程度升高，BPA染毒低剂量组与对照组相比升高不明显，差异无统计学意义(P0.05)，而染毒中、高剂量组与对照组相比升高明显，差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：一定剂量的BPA可通过抑制生精细胞TERT表达来降低端粒酶活性,促进生精细胞的损伤，使睾丸精子生成减少；BPA促使NOS活性的增强使NO的过量产生也是大鼠睾丸损伤的重要原因；BPA对大鼠有毒性效应。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R114

【参考文献】