新生期染毒双酚A对雄鼠睾丸AR表达影响

发布时间：2020-03-11 22:41

【摘要】：目的探讨哺乳期染毒双酚A对子代雄鼠成年后睾丸结构及雄激素受体(AR)表达影响。方法 20只妊娠母鼠,待分娩后随机分为双酚A高、中、低剂量组(5、0.1、0.01 mg/kg)和对照组。母鼠分娩后第3 d开始每天给小鼠颈部皮下注射相应剂量的双酚A和玉米油,持续到第21 d断奶,在第70 d处死并取材,记录体重及睾丸重量,制作精子涂片,计算精子畸形率,观察小鼠睾丸组织形态学变化,采用免疫组织化学和Western blot法检测睾丸内AR表达。结果双酚A高剂量组成年雄鼠睾丸指数(0.44±0.018)明显低于对照组(0.64±0.039)(P0.05);双酚A低、中、高剂量组成年雄鼠精子畸形率分别为(13.34±0.72)%、(16.41±0.67)%、(17.55±0.61)%,高于对照组的(2.07±0.24)%(P0.05),呈剂量效应关系;双酚A组雄鼠睾丸曲细精管直径与生精上皮厚度均明显减小(P0.05),各级生精细胞形态无明显改变;双酚A低、中、高剂量组雄鼠AR表达分别为(0.6642±0.0141)、(0.6363±0.0062)、(0.2938±0.2522),高于对照组(0.2123±0.2793)(P0.05)。结论哺乳期接触一定剂量双酚A对雄鼠睾丸发育具有明显影响,精子畸形率增加,曲细精管直径减小,生精上皮变薄,睾丸内AR表达增加。
【图文】：

睾丸AＲ表达量明显高于中、高剂量双酚A组(P＜0.05)。注:A:对照组;B、C、D:双酚A0.01、0.10、5.00mg/kg组。图1双酚A对子代成年雄鼠睾丸组织AＲ表达影响(免疫组化，×200)2.3.2Westernblot法(图2)结果显示，，低、中、高剂量双酚A组子代成年雄鼠AＲ表达量［分别为(0.6642±0.0141)、(0.6363±0.0062)、(0.2938±0.2522)］明显高于对照组(0.2123±0.2793)，差异具有统计学意义(P＜0.05);双酚A各剂量组之间雄鼠睾丸AＲ表达量也具有明显差异(P＜0.05)，随着双酚A剂量增加，睾丸组织中AＲ表达量呈下降趋势。注:A:对照组;B、C、D:双酚A0.01、0.10、5.00mg/kg组。图2双酚A对子代成年雄鼠睾丸内AＲ表达影响3讨论研究表明孕期、哺乳期接触双酚A对子代小鼠成年后体重具有影响，可造成体重增加［6－7］。本研究结果表明，中、高剂量双酚A组子代成年雄鼠体重明显增加，提示双酚A对肥胖现象有一定促进作用，但其具体作用机制尚不清楚。本研究结果还表明，哺乳期双酚A暴露可造成子代成年雄鼠睾丸系数减小，曲细精管直径、生精上皮厚度不同程度降低及精子畸形率升高，提示双酚A对睾丸的结构以及生精系统功能完整性产生了一定影响。与张玉敏等［8］研究结果相同。本研究结果显示，70日龄雄鼠睾丸细胞内AＲ受体主要表达于胞浆和胞核内，且双酚A染毒组雄鼠AＲ表达呈不同程度增加。这可能与激素的剂量效应呈U型曲线有关。研究表明，AＲ基因敲除后，小鼠前列腺、精囊、附睾及球海绵体肌缺如，睾丸缩小，雄激素水平降低［9］。正常水平的雄激素作用需要一定数量的AＲ来维持，雄激素要与AＲ结合才能发挥作用，而AＲ表达的增多将会在一定程度上加强雄激素的作用，会促进各种性征的提前发生。提示双酚A可能通过影响AＲ的表达，进一步

睾丸AＲ表达量明显高于中、高剂量双酚A组(P＜0.05)。注:A:对照组;B、C、D:双酚A0.01、0.10、5.00mg/kg组。图1双酚A对子代成年雄鼠睾丸组织AＲ表达影响(免疫组化，×200)2.3.2Westernblot法(图2)结果显示，低、中、高剂量双酚A组子代成年雄鼠AＲ表达量［分别为(0.6642±0.0141)、(0.6363±0.0062)、(0.2938±0.2522)］明显高于对照组(0.2123±0.2793)，差异具有统计学意义(P＜0.05);双酚A各剂量组之间雄鼠睾丸AＲ表达量也具有明显差异(P＜0.05)，随着双酚A剂量增加，睾丸组织中AＲ表达量呈下降趋势。注:A:对照组;B、C、D:双酚A0.01、0.10、5.00mg/kg组。图2双酚A对子代成年雄鼠睾丸内AＲ表达影响3讨论研究表明孕期、哺乳期接触双酚A对子代小鼠成年后体重具有影响，可造成体重增加［6－7］。本研究结果表明，中、高剂量双酚A组子代成年雄鼠体重明显增加，提示双酚A对肥胖现象有一定促进作用，但其具体作用机制尚不清楚。本研究结果还表明，哺乳期双酚A暴露可造成子代成年雄鼠睾丸系数减小，曲细精管直径、生精上皮厚度不同程度降低及精子畸形率升高，提示双酚A对睾丸的结构以及生精系统功能完整性产生了一定影响。与张玉敏等［8］研究结果相同。本研究结果显示，70日龄雄鼠睾丸细胞内AＲ受体主要表达于胞浆和胞核内，且双酚A染毒组雄鼠AＲ表达呈不同程度增加。这可能与激素的剂量效应呈U型曲线有关。研究表明，AＲ基因敲除后，小鼠前列腺、精囊、附睾及球海绵体肌缺如，睾丸缩小，雄激素水平降低［9］。正常水平的雄激素作用需要一定数量的AＲ来维持，雄激素要与AＲ结合才能发挥作用，而AＲ表达的增多将会在一定程度上加强雄激素的作用，会促进各种性征的提前发生。提示双酚A可能通过影响AＲ的表达，进一步

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