DEHP对大鼠孕酮合成及StAR、P450scc基因表达影响的研究

发布时间：2017-03-24 01:04

  本文关键词：DEHP对大鼠孕酮合成及StAR、P450scc基因表达影响的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)的暴露对青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影响，以及对孕酮合成的限速步骤——类固醇急性调节蛋白（StAR）、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）的基因表达的影响。通过对青春期雌性大鼠短期染毒，对参与激素合成有关基因的表达水平进行分析，初步探讨DEHP对雌性生殖毒性的可能机制。预期结果将为DEHP的生殖内分泌干扰研究提供基础资料，为阐明环境内分泌干扰物的生殖内分泌干扰机制及其危害防治研究提供重要的科学依据。 方法 1、取青春期的雌性SD大鼠32只，随机分到对照组和DEHP（低、中、高）三个实验组中，四个剂量组每组8只。按10mg/kg/d、100mg/kg/d和1000mg/kg/dDEHP分别对各实验组大鼠进行灌胃，并用溶剂(玉米油)作为对照为对照组进行灌胃。 2、连续灌胃10天，采集大鼠的血液，分离血清，测定孕酮含量；取大鼠卵巢组织提取总mRNA，逆转录PCR（Reverse Transcription Polymerase ChainReaction，RT-PCR）分析测定StAR和P450scc基因表达水平。 3、应用Excel录入数据，统计学分析使用SPSS19.0进行，以α=0.05的检验标准，判断差异是否具有统计学意义。 结果 1、模型效果 邻苯二甲酸单乙基己基酯(Mono-2-ethylhexyl phthalate，MEHP)是DEHP的初级代谢产物，大鼠血清中MEHP含量随着染毒剂量增加呈上升趋势，说明动物染毒成功。 2、大鼠体重和卵巢重量变化 随着染毒时间延长，各组大鼠体重均增加；随着染毒剂量的增高，体重增加量有减小趋势。随着染毒剂量的增加双侧卵巢重量逐渐减小，高剂量组（1000mg/kg）与其他三组比较，卵巢重量减少有统计学意义（P0.05）。 3、血清中孕酮的检测结果 低剂量组（10mg/kg）比对照组（0mg/kg）和中剂量组（100mg/kg）的血清孕酮水平略高，但差异无统计学意义；高剂量组（1000mg/kg）血清孕酮水平明显高于其他三组（P0.01）。 4、各剂量组大鼠StAR mRNA、P450scc mRNA的相对表达量 随着染毒剂量的增加，StAR mRNA和P450scc mRNA表达量降低，中剂量组（100mg/kg）和高剂量组（1000mg/kg）与对照组比较，StAR和P450scc的表达量有显著减少（P0.05）。 结论 1、DEHP可能影响青春期大鼠卵巢的发育。 2、高剂量DEHP暴露可能增加血清孕酮水平。 3、DEHP体内暴露可能降低StAR mRNA和P450scc mRNA的转录水平。
【关键词】：邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 StAR P450scc 孕酮
【学位授予单位】：武汉科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R114
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 目录9-11
• 第1章 前言11-15
• 1.1 理化特性11-12
• 1.2 研究现状12-13
• 1.3 研究目的13-15
• 第2章 材料、对象和方法15-25
• 2.1 材料15-18
• 2.1.1 主要仪器15-16
• 2.1.2 主要试剂16-17
• 2.1.3 试剂的配置17-18
• 2.2 实验对象18
• 2.3 研究方法与步骤18-24
• 2.3.1 分组18-19
• 2.3.2 取材19
• 2.3.3 RT-PCR19-22
• 2.3.4 孕酮浓度测定22
• 2.3.5 血清中 DEHP 代谢产物 MEHP 的测定22-24
• 2.4 数据分析24-25
• 第3章 结果25-30
• 3.1 模型效果25
• 3.2 大鼠体重变化25-26
• 3.3 各组大鼠卵巢重量26-27
• 3.4 大鼠孕酮含量27
• 3.5 各剂量组大鼠 StAR、P450scc mRNA 的相对表达量27-30
• 第4章 讨论30-34
• 4.1 模型效果30
• 4.2 DEHP 对大鼠体重和卵巢重量的影响30
• 4.3 DEHP 对激素分泌的影响30-32
• 4.4 DEHP 对 StAR 和 P450scc 基因表达水平的影响32
• 4.5 小结32-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-38
• 综述38-48
• 参考文献43-48
• 附录1 攻读硕士学位期间发表的论文48-49
• 附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目49

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：264844