外源过氧化氢酶对肠道组织抗氧化能力及肠道菌群的影响

发布时间：2017-03-25 01:10

  本文关键词：外源过氧化氢酶对肠道组织抗氧化能力及肠道菌群的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：膳食营养不均衡会导致机体氧化还原状态失衡,产生过量活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),改变肠道菌群结构,诱发多种慢性疾病。如何缓解膳食诱导的氧化应激,是一亟待研究的问题。本试验研究外源过氧化氢酶缓解肠道氧化应激,改善肠道菌群结构的能力。研究包括以下两部分内容:(1)外源过氧化氢酶对肠道氧化还原状态及菌群的影响。试验用50只雄性清洁级5周龄昆明种小鼠,均分为5组,分别为正常组(基础饲料)、高脂组(20%脂肪)高脂日粮添加0.9g/kg、1.2g/kg以及1.5g/kg外源CAT的低剂量组、中剂量组和高剂量组。分别饲喂10周屠宰动物,通过检测回肠中T-AOC、CAT和T-SOD等氧化还原水平来评价动物肠道氧化还原状态,测定血清、组织匀浆液中的LPS、IL-6、IFN-γ以及TNF-α,分析过氧化氢酶对炎症细胞因子水平的影响。采用T-RFLP方法分析肠道菌群状况。结果显示:高脂组小鼠体重显著高于(P0.05)正常组,过氧化氢酶干预组小鼠体重有所降低,但依然高于正常组。高脂组体脂率明显高于正常组,过氧化氢酶干预组体脂率下降,各剂量干预组间却无明显差别。与正常组相比,高脂组T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均显著降低。与高脂组比较,过氧化氢酶干预组的T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均比高脂组有所提高。三个干预组之间进行比较,干预2组显著提高,干预1组次之。肠道菌群检测结果表现出较大差异,其中T-RF60出现于高脂组和干预1、2、3组,正常组中未出现;T-RF93只在干预组中出现;T-RF199只出现在正常组和高脂组中;高脂组中未出现T-RF425、T-RF587。其中T-RF425和T-RF587属于益生菌,T-RF220对人体不利。说明而外源过氧化氢酶能够一定程度的改善高脂膳食对肠道菌群产生的不利影响。(2)外源过氧化氢酶对体外肠道菌群的影响。试验取3名志愿者的新鲜粪便样品使用磷酸盐缓冲溶液稀释离心后,取其上清液并按照4%(v/v)的比例将其接入含有不同剂量过氧化氢酶的GAM培养基中培养12h和24h后,使用高通量测序的方法对样品中的细菌群落结构进行了研究。研究发现添加过氧化氢酶会对微生物群落结构产生显著的影响,而这种变化是由梭菌属(Clostridium)、普氏菌属(Prevotella)、阿里松氏菌属(Allisonella)、巨型球菌属(Megamonas)、埃希氏杆菌属/志贺氏菌属(Escherichia/Shigella)、柯林斯菌属(Collinsella)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)等7个细菌属导致的。同时添加过氧化氢酶可以促使埃希氏杆菌属/志贺氏菌属(Escherichia/Shigella)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、乳酸球菌属(Lactococcus)、阿里松氏菌属(Allisonella)和巨型球菌属(Megasphaera)的生长,而抑制肠球菌属(Enterococcus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)的生长。外源过氧化氢酶添加可以提高高脂膳食小鼠肠道抗氧化能力、减轻其炎症反应与改善肠道菌群的结构。
【关键词】：外源过氧化氢酶 肠道菌群 高脂膳食 高通量
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 主要缩略词总汇6-9
• 第一章 绪论9-15
• 1.1 过氧化氢酶9-11
• 1.1.1 过氧化氢酶与氧化胁迫9-10
• 1.1.2 过氧化氢酶应用10-11
• 1.2 人的肠道菌群11-13
• 1.2.1 肠道的环境11-12
• 1.2.2 结肠中主要的细菌种类12
• 1.2.3 饮食对肠道微生物的影响12
• 1.2.4 能量、肥胖与代谢健康12-13
• 1.3 研究意义及主要内容13-15
• 第二章 材料与方法15-25
• 2.1 实验材料15-16
• 2.1.1 实验动物15
• 2.1.2 实验主要试剂15
• 2.1.3 主要实验设备15
• 2.1.4 主要溶液的配制15-16
• 2.2 实验方法16-25
• 2.2.1 外源过氧化氢酶对小鼠组织抗氧化能力的影响16-19
• 2.2.2 不同过氧化氢酶处理的人体来源粪便样品体外培养物微生物群落结构的研究19-23
• 2.2.3 数据分析23-25
• 第三章结果与讨论25-47
• 3.1 外源过氧化氢酶对小鼠组织抗氧化能力的影响25-30
• 3.1.1 表型及表征25
• 3.1.2 高脂膳食及过氧化氢酶干预对肠道抗氧化能力的影响25-26
• 3.1.3 T-RFLP分析10周末五组小鼠的肠道菌群26-27
• 3.1.4 高脂膳食及过氧化氢酶干预对免疫功能的影响27-30
• 3.2 不同水平过氧化氢酶对人源粪便微生物群落的影响30-47
• 3.2.1 序列丰度和多样性分析30-32
• 3.2.2 基于门属水平的不同样品中细菌群落结构的研究32-39
• 3.2.3 基于多元统计方法的不同样品菌群群落结构的比较分析39-43
• 3.2.4 与群落结构显著相关微生物的分析43-45
• 3.2.5 不同细菌属的定量分析45-47
• 主要结论与展望47-49
• 本文主要结论47
• 展望47-49
• 致谢49-51
• 参考文献51-57
• 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文57

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘昌玲,董泗建,孙曼霁;过氧化氢酶的肽片及其水解梭曼的活性[J];中国药理学与毒理学杂志;1993年02期

2 李艳平,张新,王志敏,卢大儒,黄薇,金力;过氧化氢酶基因-844C/T多态性对荧光素酶报告基因表达水平的影响[J];科学通报;2004年15期

3 张曼;;过氧化氢酶和过氧化氢在绿茶多酚化学防癌活性中的作用[J];国外医药(植物药分册);2005年01期

4 王伟;孙谧;刘万顺;;单功能过氧化氢酶的高级结构[J];中国生物化学与分子生物学报;2008年03期

5 ;肝癌诱发过程中早期肝内过氧化氢酶变化的初步观察[J];兰州医学院学报;1960年03期

6 陆领倩;袁勤生;;猪血过氧化氢酶的某些性质研究[J];生化药物杂志;1987年02期

7 姜招峰,杨世杰,周翔;血清中过氧化氢酶活力的化学发光微量分析法[J];白求恩医科大学学报;1989年01期

8 王樟龄 ,石树人;家兔注射硝酸铀酰后的尿过氧化氢酶改变[J];核防护;1976年03期

9 刘吉民，曹文华，谢绛利，付妍，郭立文，王明善，张克明;磁化水对小鼠血液过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响[J];中国医学物理学杂志;1995年04期

10 郭海燕,李克俊,高华,付强祖;工业氟暴露对机体血清微量元素和过氧化氢酶的影响研究[J];职业卫生与应急救援;2000年03期

中国重要会议论文全文数据库 前8条

1 刘贵忠;柳永亮;刘汉平;王吉华;;交变电场对过氧化氢酶吸收光谱的影响[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年

2 简嘉;李平华;;过氧化氢酶与甲基强的松龙对实验性脱髓鞘性视神经炎的抑制作用[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年

3 冷晒祥;华兆哲;堵国成;陈坚;;纺织清洁生产用过氧化氢酶发酵生产条件及酶学性质[A];第七届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2007年

4 史红霞;陆天虹;黄晓华;;稀土Eu~(3+)与过氧化氢酶的相互作用研究[A];中国化学会第26届学术年会化学生物分会场论文集[C];2008年

5 周立祥;毛为民;;过氧化氢酶TF-160的应用性能[A];传化杯第七届全国染整前处理学术研讨会论文集[C];2007年

6 张江;刘宏;谯仕彦;;过氧化氢酶在乳酸菌的表达及其在葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎模型中的作用[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集[C];2012年

7 苗升浩;孙秀发;应晨江;;虾青素对血管内皮细胞过氧化氢酶和SOD-1表达的影响[A];湖北省、武汉市营养学会第十届学术会议论文摘要汇编[C];2004年

8 李伟;;Abelson相关蛋白与过氧化氢酶相互作用机制的初步研究[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年

中国重要报纸全文数据库 前6条

1 谢纹;过氧化氢酶对棉染色的影响[N];中国纺织报;2004年

2 中国水产科学研究院;海水中细菌过氧化氢酶多样性可精确快速检测[N];中国渔业报;2014年

3 刘国信;固定化过氧化氢酶对生牛奶的保鲜研究[N];中国畜牧报;2004年

4 辽宁威兰生物技术有限责任公司;过氧化氢酶(CAT)的存在及生物活性[N];中国畜牧兽医报;2014年

5 张东旭 华兆哲;《碱性果胶酶发酵生产及应用研究》、《过氧化氢酶发酵生产及应用研究》通过专家验收[N];中国纺织报;2005年

6 人民教育出版社生物编辑室 刘真;一句话的来历[N];中国教育报;2000年

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 史训龙;重组表达过氧化氢酶及抗氧化损伤生物活性的研究[D];复旦大学;2008年

2 王群英;过氧化氢酶对肠上皮细胞的保护机制的研究[D];第一军医大学;2005年

3 施志慧;人源过氧化氢酶的重组稳定表达、PEG修饰和抗病毒性肺炎作用研究[D];复旦大学;2011年

4 王伟;南极海洋微生物N2a鉴定、系统学及一种低温过氧化氢酶BNC纯化与性质研究[D];中国海洋大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 李斌斌;过氧化氢酶基因多态性在运动员选材中应用的可行性研究[D];江西师范大学;2015年

2 王慧;锰过氧化氢酶基因的表达与优化[D];石河子大学;2015年

3 范文锋;生物酶在人发脱色过程中的技术研究[D];山东理工大学;2015年

4 于德玲;青岛文昌鱼过氧化氢酶基因的克隆与表达研究[D];鲁东大学;2016年

5 杨宁;重组副溶血弧菌过氧化氢酶catVPF1，catVPR2的克隆表达及基因功能研究[D];湖北师范大学;2016年

6 王慧;外源过氧化氢酶对肠道组织抗氧化能力及肠道菌群的影响[D];江南大学;2016年

7 姚海勇;Bacillus subtilis WSHDZ-01产过氧化氢酶的提取、纯化及性质研究[D];江南大学;2008年

8 张心齐;碱性过氧化氢酶产生菌的筛选及其酶的分离纯化与性质研究[D];江南大学;2004年

9 贺仁艳;柠檬酸对粘质沙雷氏菌产过氧化氢酶的影响及其机理[D];江南大学;2012年

10 王明星;纺织用碱性耐热过氧化氢酶的微生物法生产及保存稳定性的研究[D];江南大学;2005年

  本文关键词：外源过氧化氢酶对肠道组织抗氧化能力及肠道菌群的影响，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：266441