高苯丙氨酸对小鼠肝脏的毒性作用

发布时间：2020-05-20 05:36

【摘要】：目的:苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe)是人体必需氨基酸,可用于合成各种蛋白质,肝脏等组织可将其代谢生成酪氨酸(Tyrosine,Tyr),稳定的Phe代谢状态可以维持机体的正常生长发育。高苯丙氨酸可能引起苯丙酮尿症(Phenylketonuria,PKU)及神经系统的损害等,神经系统损害尤为明显,可导致精神障碍、智力缺陷、运动减退等。目前,无论国际还是国内,高苯丙氨酸对肝脏损伤的研究很少。本文以小鼠为实验对象,通过给不同组别C57小鼠灌胃Phe,观察其对肝脏组织生化功能及各种指标的影响,为探讨高苯丙氨酸对小鼠肝脏的毒性作用机制以及临床指导Phe的合理营养提供依据。方法:选择40只雄性健康C57小鼠,随机将其分成4组,高剂量组:4.2 mmol/kg、中剂量组:2.1 mmol/kg、低剂量组:1.05 mmol/kg、对照组:蒸馏水。于灌胃后28d摘眼球取血,静置10min,低温离心机分离血清,测定MAO和P450活性;脱臼颈椎处死小鼠,取肝脏,在肝脏组织匀浆中测定T-SOD、ROS、8-OHdG、MDA、CAT、GSH-Px和GSH等抗氧化损伤指标,ALT、AST、LDH、AKP、LAP、GSTA1、Na~+-Ka~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶等肝组织酶活性指标,PI、PC和PIPT细胞膜磷脂代谢指标,NO、NOS、TNF-α和HMGB1肝细胞毒性指标,LN、HA、HyP和PⅢNP肝组织胶原代谢指标,以及血清和肝脏中的Phe和Tyr的浓度。结果:1.小鼠体重和肝脏系数灌胃28d后,各组小鼠均未见死亡,进食和活动正常,无异常反应。各剂量组间体重无统计学差异(P0.05)。高剂量组的脏器系数高于其余各组(P0.05),中剂量和低剂量组与对照组之间无统计学差异(P0.05)。2.小鼠血清和肝脏组织中Phe和Tyr的浓度Phe灌胃28d后,各剂量组血清中Phe与对照组之间无统计学差异(P0.05);肝组织中Phe浓度低剂量组明显高于对照组(P0.05),中剂量和高剂量组与对照组之间比较无明显差异(P0.05);血清中Tyr浓度低剂量组高于对照组(P0.05),肝组织中Tyr浓度低剂量和中剂量组明显低于高剂量和对照组(P0.05),高剂量组与对照组之间比较无统计学差异(P0.05)。3.小鼠肝脏氧化损伤指标的结果Phe灌胃28d后,ROS的水平各剂量组明显低于对照组(P0.05),中剂量和高剂量组高于低剂量组(P0.05);MDA的含量各剂量组均高于对照组(P0.05);T-SOD的活力各剂量组明显低于对照组(P0.05),且随着剂量的升高T-SOD活性增高(P0.05);GSH的含量低剂量组明显低于对照组(P0.05);GSH-Px的活力各剂量组均低于对照组(P0.05),高剂量组低于低剂量组(P0.05);CAT的活力高剂量组明显低于对照组和其它各剂量组(P0.05),低剂量组明显高于对照组(P0.05)。8-OHd G的含量低剂量和高剂量组明显高于对照组(P0.05),中剂量组与对照组之间比较无统计学差异(P0.05);4.小鼠肝脏细胞因子相关指标的测定结果Phe灌胃28d后,NO的含量各剂量组明显高于对照组(P0.05),且随着剂量的升高NO增加(P0.05);NOS的活力中剂量和高剂量组高于对照组(P0.05),低剂量组和对照组之间无明显差异(P0.05);TNF-α的含量中剂量组和高剂量组明显高于低剂量组和对照组(P0.05),低剂量组与对照组之间比较无明显差异(P0.05);HMGB1的含量低剂量组和高剂量组明显高于中剂量和对照组(P0.05),中剂量组低于对照组(P0.05)。5.小鼠肝组织酶活性的变化Phe灌胃28d后,ALT的活力各剂量组明显低于对照组(P0.05),中剂量组分别与低剂量和高剂量组之间比较无明显差异(P0.05);AST的活力各剂量组明显低于对照组(P0.05),且随着剂量的升高AST减少(P0.05);GSTA1的活力各剂量组明显低于对照组(P0.05),低剂量组分别与中剂量组和高剂量组之间比较无明显差异(P0.05);AKP的活力低剂量和中剂量组明显低于对照组(P0.05),高剂量组分别与低剂量和对照组之间比较无明显差异(P0.05);LDH的活力低剂量组和中剂量组明显低于对照组(P0.05),高剂量组与对照组之间比较无统计学差异(P0.05);LAP的活力高剂量组低于其它各剂量组(P0.05),中剂量组和低剂量组分别与对照组之间比较无统计学差异(P0.05);Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP的活力高剂量组低于其它各组(P0.05),中剂量和低剂量组与对照组之间无统计学差异(P0.05);Na~+-K~+-ATP的活力各剂量组明显低于对照组(P0.05),高剂量组分别与低剂量和中剂量组之间比较无明显统计学差异(P0.05);MAO的活力中剂量和高剂量组高于低剂量和对照组(P0.05),低剂量组和对照组之间无统计学差异(P0.05);P450的活力高剂量组低于其它组(P0.05),中剂量和低剂量组与对照组之间无统计学差异(P0.05)。6.小鼠肝脏细胞膜磷脂代谢的指标结果Phe灌胃28d后,PC的含量各剂量组明显低于对照组(P0.05),中剂量组与高剂量组之间比较无明显差异(P0.05);PI的含量高剂量组高于其它各组(P0.05),低剂量组和对照组之间无明显差异(P0.05);PIPT的含量中剂量和高剂量组高于低剂量和对照组(P0.05),低剂量组和对照组之间无明显差异(P0.05)。7.小鼠肝组织胶原代谢指标的测定结果Phe灌胃28d后,HA的含量各剂量组明显高于对照组(P0.05),高剂量组高于中剂量和低剂量组(P0.05);PⅢNP的含量高剂量组高于其它各组(P0.05),低剂量组和对照组之间无明显差异(P0.05);LN的含量高剂量组高于低剂量和对照组(P0.05),中剂量和低剂量组与对照组之间无明显差异(P0.05);Hyp的含量高剂量组高于其余各组(P0.05),中剂量和低剂量组与对照组之间无明显差异(P0.05)。结论:小鼠连续灌胃Phe,可使肝脏组织发生脂质过氧化;产生肝细胞毒性,释放细胞因子;导致肝组织酶活性紊乱;干扰肝细胞膜磷脂代谢;影响肝组织胶原蛋白代谢。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R151.41

【参考文献】

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本文编号：2672149