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邻苯二甲酸二甲酯对小鼠肝脏的毒性作用

发布时间:2020-08-19 17:47
【摘要】:目的:邻苯二甲酸二甲酯(Dimethyl phthalate,DMP)是增塑剂邻苯二甲酸酯类的一种,广泛存在于水、土壤和大气中,与人们的生活密切相关。目前,国内外对DMP肝脏损伤的研究较少。本研究以小鼠为实验对象,用不同剂量的DMP灌胃C57小鼠20天和40天,观察其对肝脏组织各种功能指标的影响,为探讨DMP对小鼠肝脏的毒性作用机制提供依据。方法:选择80只雌雄各半的健康C57小鼠,根据文献随机将小鼠分成4个剂量组:2.0g/kg DMP组、1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(纯玉米油)。采用连续灌胃的方式进行染毒,灌胃体积为10ml/kg,分别于灌胃20d和40d后眶静脉窦取血后颈椎脱臼处死,取其肝脏组织,测定肝脏组织匀浆中T-SOD、GSH-Px、CAT和MDA氧化损伤指标,NO浓度和NOS酶活力指标,ALT、AST、LDH、Na+-K+-ATP和Ca2+-Mg2+-ATP肝组织代谢酶活力指标,以及肝细胞凋亡情况。结果:1.小鼠体重和肝脏系数灌胃20d和40d后,各组小鼠均未见死亡,进食和活动正常,无异常反应。各剂量组间体重和脏器系数无统计学差异(P0.05)。2.小鼠肝脏脂质过氧化损伤的测定结果灌胃20天后,雄鼠各DMP染毒组的T-SOD活力均低于对照组(P0.05);CAT活力1.0g/kg DMP组低于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组低于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);GSH-Px活力2.0g/kg DMP组低于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);MDA含量各DMP染毒组均高于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组MDA含量低于0.5g/kg DMP组(P0.05)。灌胃20天后,雌鼠各组之间的T-SOD活力无明显变化(P0.05);各DMP染毒组CAT活力均高于对照组(P0.05);各组之间的GSH-Px活力无明显变化(P0.05);2.0g/kg DMP组的MDA含量明显高于其1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05)。灌胃40天后,雄鼠各组之间的T-SOD活力无明显变化(P0.05);0.5g/kg DMP组和1.0g/kg剂量组CAT活力高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的CAT活力低于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);1.0g/kg DMP剂量组的GSH-Px活力低于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05),2.0g/kg DMP剂量组的GSH-Px活力高于1.0g/kg DMP组(P0.05);各组之间的的MDA含量无明显差异(P0.05)。灌胃40天后,雌性小鼠各DMP组的T-SOD活力均低于对照组(P0.05);2.0g/kg DMP组的T-SOD活力高于0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组;2.0g/kg DMP组的CAT活力和GSH-Px活力均高于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);各DMP染毒组的MDA含量明显高于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组的MDA含量明显高于0.5g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组(P0.05)。3.小鼠肝脏NO和NOS的测定结果灌胃20d后,雄性小鼠各DMP染毒组的NO含量明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的NO含量显著高于1.0g/kg DMP组(P0.05);雄鼠各DMP染毒组的NOS活力明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组NOS的活力显著高于0.5g/kg DMP组(P0.05),2.0g/kg DMP组NOS的活力显著高于1.0g/kg DMP组(P0.05)。雌性小鼠1.0g/kg DMP组的NO的含量明显低于2.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组NOS的活力明显低于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组NOS的活力明显低于0.5g/kg DMP组(P0.05),2.0g/kg DMP组NOS的活力显著高于0.5g/kg DMP组、1.0g/kg DMP组和对照组(P0.05)。灌胃40d后,雄性小鼠1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组NO的含量明显高于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);2.0g/kg DMP组的NOS活力显著高于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05)。雌性小鼠各DMP组的NO含量明显低于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的NO的含量低于0.5g/kg DMP组(P0.05);各DMP组的NOS活力明显低于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的NOS活力低于0.5g/kg DMP组(P0.05)。4.小鼠肝脏组织酶活力的变化灌胃20d后,雄性小鼠1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的ALT活力明显低于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的AST活力明显低于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的AST活力低于0.5g/kg DMP组(P0.05);各组之间LDH活力无明显差异(P0.05),各DMP染毒组的Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均低于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显低于0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组(P0.05);1.0g/kg DMP组的Na+-K+-ATP酶活力明显低于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的Na+-K+-ATP酶活力明显低于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05)。灌胃20d后,雌性小鼠各组之间ALT活力无明显差异(P0.05);0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组的AST活力明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的AST活力低于0.5g/kg DMP组(P0.05);各组之间LDH活力无明显差异(P0.05);0.5g/kg DMP组的Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组的Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);2.0g/kg DMP组的Na+-K+-ATP酶活力明显高于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05)。灌胃40d后,雄性小鼠2.0g/kg DMP组的ALT活力明显低于1.0g/kg DMP组、0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);0.5g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的AST活力明显低于对照组(P0.05),1.0g/kg DMP组的AST活力高于2.0g/kg DMP组和对照组(P0.05);0.5g/kg DMP组的LDH活力显著高于2.0g/kg DMP组、1.0g/kg DMP组和对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组LDH活力高于1.0g/kg DMP组和对照组(P0.05);各组肝脏Ca2+-Mg2+-ATP酶活力无明显差异(P0.05);0.5g/kg DMP组的Na+-K+-ATP酶活力高于对照组和2.0g/kg DMP组(P0.05)。灌胃40d后,雌性小鼠各组之间ALT活力无明显差异(P0.05);1.0g/kg DMP组和2.0g/kg DMP组的AST活力明显低于0.5g/kg DMP组和对照组(P0.05);各组之间的LDH活力无明显差异(P0.05);各DMP染毒组的Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力均低于对照组(P0.05)。5.肝细胞凋亡情况灌胃20d和40d后,雄性小鼠各DMP染毒组的肝脏组织细胞凋亡率明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组肝脏组织细胞凋亡率显著低于0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组(P0.05),1.0g/kg DMP组肝脏组织细胞凋亡率显著高于0.5g/kg DMP组(P0.05)。雌性小鼠各DMP染毒组的肝脏组织细胞凋亡率明显高于对照组(P0.05),2.0g/kg DMP组肝脏组织细胞凋亡率显著高于0.5g/kg DMP组和1.0g/kg DMP组(P0.05)。结论:1.雄鼠在染毒20d时肝脏组织T-SOD、GSH-Px、CAT酶活力降低,MDA含量增高,染毒40d时GSH-Px、CAT酶活力下降;雌性小鼠在染毒20d时CAT活力和MDA含量升高,在染毒40d时,T-SOD活力下降,GSH-Px、CAT酶活力和MDA含量升高。2.DMP染毒可增加雄性小鼠肝脏组织的NO浓度和NOS活力,雌性小鼠肝脏组织中的NO浓度和NOS活力下降。3.DMP可降低雄性小鼠肝组织ALT、AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力;Na+-K+-ATP酶活力在染毒20d时降低,40d时增加;在染毒40d时,可使LDH酶活力增高。雌性小鼠在染毒20d时ALT、AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力增加,在染毒40d时,AST、Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活力降低。4.DMP染毒会增加小鼠肝脏细胞的凋亡率。
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R114
【图文】:

灌胃,肝细胞凋亡


图 3-1 灌胃 20d 后对肝细胞凋亡的影响a:雄性对照组;b:雄性 0.5g/kgDMP 组;c:雄性 1.0g/kgDMP 组;d:雄性 2.0g/kgDMP 组;e:雌性对照组;f:雌性 0.5g/kgDMP 组;g:雌性 1.0g/kgDMP 组;h:雌性 2.0g/kgDMP 组;表 3-13 各组小鼠肝脏细胞凋亡率变化(n=5, x±s,% )剂量(g/kg) 雄性 雌性0 6.68±0.42 10.27±0.980.5 8.54±0.73a11.89±0.95a1.0 9.55±0.35ab12.86±1.17a2.0 7.68±0.60abc18.26±1.24abcF 25.126 50.357P <0.001 <0.001注:a:与对照比较,P<0. 05; b:与低剂量组比较,P<0. 05;c:与中剂量组比较,P<0. 053.5.2 灌胃 40 天后肝脏细胞凋亡率的测定结果灌胃 40d 后,对各组小鼠肝脏组织细胞凋亡的影响如图 3-2 和表 3-14 所示。

肝细胞凋亡,灌胃,对照组,对照比较


图 3-2 灌胃 40d 后对肝细胞凋亡的影响a:雄性对照组;b:雄性 0.5g/kgDMP 组;c:雄性 1.0g/kgDMP 组;d:雄性 2.0g/kgDMP 组;e:雌性对照组;f:雌性 0.5g/kgDMP 组;g:雌性 1.0g/kgDMP 组;h:雌性 2.0g/kgDMP 组;表 3-14 各组小鼠肝脏细胞凋亡率变化(n=5, x±s,% )剂量(g/kg) 雄性 雌性0 14.20±1.26 21.75±0.430.5 20.35±2.03a26.81±0.57a1.0 25.92±0.21ab25.30±1.96a2.0 15.98±0.16abc30.94±2.04abcF 94.511 33.898P <0.001 <0.001注:a:与对照比较,P<0. 05; b:与低剂量组比较,P<0. 05;c:与中剂量组比较,P<0. 05

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