蚊媒拟除虫菊酯类杀虫剂抗性检测及乙脑病毒携带情况研究

发布时间：2017-04-01 20:01

  本文关键词：蚊媒拟除虫菊酯类杀虫剂抗性检测及乙脑病毒携带情况研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:南水北调山东段沿线人口密集、气候温暖湿润、湖泊水系较多,适宜蚊虫的孳生繁殖,容易形成蚊媒种类的多样性;该沿线主要的家栖蚊种是淡色库蚊,目前消灭家栖蚊种常用的杀虫剂以拟除虫菊酯类为主,长期大量杀虫剂的使用和蚊虫对环境的适应使蚊虫产生抗药性,因此抗药性的早期发现和抗药性发展的监测是蚊虫防治的必要措施。虫媒病是指通过媒介昆虫叮咬敏感的脊椎动物而传播的疾病。虫媒病一直是危害人类健康的公共卫生问题,并且近年来虫媒疾病频有发生。蚊媒病毒常见的有乙脑病毒(JEV)、黄热病毒(YFV)、登革热病毒(DENV)等。流行性乙型脑炎是由乙脑病毒引起的自然疫源性疾病,主要经三带喙库蚊传播。因此开展南水北调山东段湖区泰安东平湖、任城太白湖和韩庄微山湖地区的蚊媒种群组成、抗性水平和乙脑病毒的自然感染情况,为当地蚊虫防治和乙脑疾病的预防控制提供科学依据。目的:对南水北调山东段沿线泰安东平湖、任城太白湖和韩庄微山湖地区进行蚊虫种群调查、抗性检测及乙脑病毒病原学研究,为当地蚊虫防治和乙脑病毒的预防控制提供科学依据。方法:2015年6-9月在泰安东平湖、任城太白湖和韩庄微山湖采集点进行蚊虫标本采集,标本放于笼中运回实验室,用于蚊虫拟除虫菊酯类杀虫剂抗性检测或蚊虫JEV的检测。蚊虫幼虫抗性检测采用幼虫浸渍法,成蚊抗性检测采用接触筒法;蚊虫标本研磨后,制备蚊虫标本核酸的cDNA,采用实时荧光定量PCR检测乙脑病毒核酸,将乙脑核酸检测阳性的蚊虫研磨液接种于BHK-21细胞,观察细胞病变;再采用半巢式PCR检测乙脑病毒核酸。结果:2015年6─9月共捕获蚊虫6属17类16 711只,其中任城太白湖、微山韩庄和泰安东平湖分别以三带喙库蚊(39.55%)、淡色库蚊(38.69%)和常型曼蚊(14.10%)为优势蚊种;蚊虫密度随季节消长均以8月最高。任城太白湖、微山韩庄和泰安东平湖蚊虫拟除虫菊酯类杀虫剂抗性检测分别为16.50、86.26、53.94,微山韩庄、泰安东平湖采集的蚊虫标本拟除虫菊酯杀虫剂抗性均为高抗性,任城太白湖采集的蚊虫标本拟除虫菊酯杀虫剂抗性均为中抗性。采用实时荧光定量PCR法检测到蚊虫标本中JEV阳性,细胞培养未见病变用巢式PCR在三带喙库蚊、淡色库蚊、黄色轲蚊中检测到乙脑病毒核酸,批阳性率分别为22.96%,7.58%和16.67%。C/PrM序列测序确定为乙脑病毒。结论:本次研究在南水北调山东段沿线泰安东平湖、任城太白湖和韩庄微山湖地区的进行蚊虫种群、蚊虫抗性、蚊虫JEV自然感染情况的调查。采集到6属17类蚊虫标本,其中以三带喙库蚊为当地的优势蚊种;微山韩庄、泰安东平湖采集的蚊虫标本拟除虫菊酯杀虫剂抗性均为高抗性,任城太白湖采集的蚊虫标本拟除虫菊酯杀虫剂抗性为中抗性;在三带喙库蚊、淡色库蚊、黄色轲蚊中检测到JEV核酸阳性,提示南水北调山东段存在着较高风险的JEV感染。
【关键词】：蚊虫抗性 溴氰菊酯 流行性乙型脑炎病毒 半巢式PCR 实时荧光定量PCR
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R512.32;R184.3
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 主要符号10-11
• 前言11-15
• 第一章 山东省南水北调沿线蚊虫种群与抗性15-25
• 1.1 材料与方法15-17
• 1.1.1 实验材料15-16
• 1.1.2 实验方法16-17
• 1.2 结果17-21
• 1.2.1 南水北调山东段蚊虫种群监测17-21
• 1.2.2 南水北调山东段蚊虫抗性检测21
• 1.3 讨论21-25
• 第二章 南水北调山东段蚊虫乙脑病毒携带情况25-38
• 2.1 实验材料和方法25-31
• 2.1.1 实验材料25-27
• 2.1.2 实验方法27-31
• 2.2 实验结果31-34
• 2.2.1 实时荧光定量PCR法检测南水北调山东段蚊虫乙脑病毒携带情况31
• 2.2.2 细胞接种法检测南水北调山东段蚊虫乙脑病毒携带情况31-32
• 2.2.3 巢式PCR法检测南水北调山东段蚊虫乙脑病毒携带情况32-34
• 2.3 讨论34-38
• 第三章 结论38-40
• 参考文献40-43
• 攻读学位期间发表的学术论文43-44
• 致谢44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 高晓艳;周海卫;刘红;付士红;王环宇;郭振洋;李晓龙;梁国栋;;乙脑病毒的空间播散及迁徙事件研究[J];病毒学报;2015年03期

2 郑学礼;;我国蚊媒研究概况[J];中国病原生物学杂志;2014年02期

3 林小娟;刘桂芳;张丽;李漫时;王敏;熊萍;张岩;陶泽新;王素婷;肖作奎;张伟燕;张英洁;宋立志;;山东省1986～2010年流行性乙型脑炎流行病学特征分析[J];现代预防医学;2013年13期

4 张海林;梁国栋;;中国虫媒病毒和虫媒病毒病[J];中国媒介生物学及控制杂志;2012年05期

5 孙玉杰;张海林;;中国流行性乙型脑炎病毒基因型及分布[J];中国媒介生物学及控制杂志;2012年05期

6 姜义霖;宋锋林;李长升;李宁;杜海方;李建训;樊德海;;大连口岸蚊媒调查及流行性乙型脑炎病毒自然感染情况研究[J];中国国境卫生检疫杂志;2009年05期

7 王海岩;高晓艳;宋立志;李岩;刘桂芳;王环宇;付士红;陶泽新;林晓娟;刘尧;冯蕾;刘

本文编号：281178