基于金属氧化物纳米材料富集水中诺如病毒的检测方法研究
发布时间：2020-12-07 16:53
诺如病毒是一种致病性较强的食源性及水源性病毒,该病毒常通过污染水源引起人群的急性胃肠炎的暴发。对于诺如病毒的鉴定主要是通过实时荧光定量RT-PCR的方法,因为诺如病毒无法通过细胞和组织培养法在实验室进行培养,当水中诺如病毒量较低的时就无法检测到。为了克服水体中诺如病毒的富集难题,本论文拟建立以纳米金属氧化物（纳米氧化钛、纳米氧化锆）修饰纤维素滤纸富集水中病毒的方法,通过优化有关具体构筑及检测的参数,最终建立一套能够快速、高效、简便、便宜富集检测的方法,解决水中诺如病毒检测技术的问题。1、建立了实时荧光定量RT-PCR检测诺如病毒的方法,对方法的灵敏度、特异性、稳定性进行了验证,利用临床标本对方法的实际检测效果进行了实验。将GII型诺如病毒标准质粒绘制细针绝对定量标准曲线,回归方程为Y=-3.3661x+46.441,相关系数R2值为0.9993,方法的最低检测浓度为9.1×102copies/μL,三个浓度批内和批间重复试验CT值的变异系数均小于2%,该方法具有较高灵敏度,准确性和重复性好,可以应用于水中诺如病毒富集的检测。2、通过比较纳米二...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
诺如病毒电镜图
图 2.1 不同浓度的 GII 型诺如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：从左到右标准品浓度分别为 9.1×1010～9.1×104copies/ μL） Excel 表格可绘制 CT 值与稀释倍数的对数之间关系的绝对，以拷贝数的对数为横坐标，CT 值为纵坐标绘制标准曲线：Y=—3.3661x+46.441，相关系数 R2值为 0.9993，表明线性相结果可靠，见图 2.2。标准稀释到 9.1×102copies/ μL 时，有明显的准稀释到 9.1×101copies/ μL，无扩增。因此，方法的最低检测浓opies/ μL，具有较高的灵敏度。
图 2.1 不同浓度的 GII 型诺如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：从左到右标准品浓度分别为 9.1×1010～9.1×104copies/ μL）过 Excel 表格可绘制 CT 值与稀释倍数的对数之间关系的绝线，以拷贝数的对数为横坐标，CT 值为纵坐标绘制标准曲为：Y=—3.3661x+46.441，相关系数 R2值为 0.9993，表明线性量结果可靠，见图 2.2。标准稀释到 9.1×102copies/ μL 时，有明显标准稀释到 9.1×101copies/ μL，无扩增。因此，方法的最低检测浓copies/ μL，具有较高的灵敏度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年天津市环城某区食源性疾病病原检测结果分析[J]. 孟庆贺,王淑惠,石明英. 河南预防医学杂志. 2018(11)
[2]环介导等温扩增技术在脑膜炎奈瑟菌检测中的应用[J]. 闫永飞,黄亮,赵丽萍,刘晓娟,丁国涛,胡朝辉. 医学动物防制. 2018(11)
[3]化学发光法与酶联免疫法应用于乙肝病毒血清学检验中的效果[J]. 金哲龙,张念军,王奇. 世界最新医学信息文摘. 2018(83)
[4]专家在抗诺如病毒药物研发方面取得新进展[J]. 世界最新医学信息文摘. 2018(85)
[5]诺如病毒的病原特点和感染机制研究进展[J]. 栾明春,王越,周林. 微量元素与健康研究. 2019(01)
[6]环介导等温扩增快速可视化检测B族链球菌的应用研究[J]. 王行,汪骅,张立. 国际检验医学杂志. 2018(19)
[7]2017年安庆市急性胃肠炎暴发疫情病原体诺如病毒的鉴定及基因特征分析[J]. 刘敏鸿,金爱武,曹孟婵,史永林,李贤相,徐四清. 中国病原生物学杂志. 2018(09)
[8]广西养殖牡蛎中诺如病毒的污染状况及风险评估[J]. 吕素玲,谭冬梅,姚雪婷,李秀桂. 中国食品卫生杂志. 2018(05)
[9]2017年北京市朝阳区婴幼儿腹泻病毒多病原监测结果分析[J]. 焦洋,高艳,齐啸,张士尧,张玉松,顾琳,张越,孙灵利. 国际检验医学杂志. 2018(18)
[10]聚合酶链式反应分析仪温度校准系统[J]. 余松林,王喆,沈文杰,张涛,蒋静,田昀. 计量学报. 2018(05)
硕士论文
[1]腹泻相关病毒多重检测技术的研究[D]. 刘艳.中国疾病预防控制中心 2011
[2]三种食源性病毒RT-PCR-反向斑点杂交检测方法的建立[D]. 田甜.江苏大学 2010
本文编号：2903585
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
诺如病毒电镜图
图 2.1 不同浓度的 GII 型诺如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：从左到右标准品浓度分别为 9.1×1010～9.1×104copies/ μL） Excel 表格可绘制 CT 值与稀释倍数的对数之间关系的绝对，以拷贝数的对数为横坐标，CT 值为纵坐标绘制标准曲线：Y=—3.3661x+46.441，相关系数 R2值为 0.9993，表明线性相结果可靠，见图 2.2。标准稀释到 9.1×102copies/ μL 时，有明显的准稀释到 9.1×101copies/ μL，无扩增。因此，方法的最低检测浓opies/ μL，具有较高的灵敏度。
图 2.1 不同浓度的 GII 型诺如病毒的 CT 值Fig. 2.1 different concentrations of norovirus GII of CT values（注：从左到右标准品浓度分别为 9.1×1010～9.1×104copies/ μL）过 Excel 表格可绘制 CT 值与稀释倍数的对数之间关系的绝线，以拷贝数的对数为横坐标，CT 值为纵坐标绘制标准曲为：Y=—3.3661x+46.441，相关系数 R2值为 0.9993，表明线性量结果可靠，见图 2.2。标准稀释到 9.1×102copies/ μL 时，有明显标准稀释到 9.1×101copies/ μL，无扩增。因此，方法的最低检测浓copies/ μL，具有较高的灵敏度。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年天津市环城某区食源性疾病病原检测结果分析[J]. 孟庆贺,王淑惠,石明英. 河南预防医学杂志. 2018(11)
[2]环介导等温扩增技术在脑膜炎奈瑟菌检测中的应用[J]. 闫永飞,黄亮,赵丽萍,刘晓娟,丁国涛,胡朝辉. 医学动物防制. 2018(11)
[3]化学发光法与酶联免疫法应用于乙肝病毒血清学检验中的效果[J]. 金哲龙,张念军,王奇. 世界最新医学信息文摘. 2018(83)
[4]专家在抗诺如病毒药物研发方面取得新进展[J]. 世界最新医学信息文摘. 2018(85)
[5]诺如病毒的病原特点和感染机制研究进展[J]. 栾明春,王越,周林. 微量元素与健康研究. 2019(01)
[6]环介导等温扩增快速可视化检测B族链球菌的应用研究[J]. 王行,汪骅,张立. 国际检验医学杂志. 2018(19)
[7]2017年安庆市急性胃肠炎暴发疫情病原体诺如病毒的鉴定及基因特征分析[J]. 刘敏鸿,金爱武,曹孟婵,史永林,李贤相,徐四清. 中国病原生物学杂志. 2018(09)
[8]广西养殖牡蛎中诺如病毒的污染状况及风险评估[J]. 吕素玲,谭冬梅,姚雪婷,李秀桂. 中国食品卫生杂志. 2018(05)
[9]2017年北京市朝阳区婴幼儿腹泻病毒多病原监测结果分析[J]. 焦洋,高艳,齐啸,张士尧,张玉松,顾琳,张越,孙灵利. 国际检验医学杂志. 2018(18)
[10]聚合酶链式反应分析仪温度校准系统[J]. 余松林,王喆,沈文杰,张涛,蒋静,田昀. 计量学报. 2018(05)
硕士论文
[1]腹泻相关病毒多重检测技术的研究[D]. 刘艳.中国疾病预防控制中心 2011
[2]三种食源性病毒RT-PCR-反向斑点杂交检测方法的建立[D]. 田甜.江苏大学 2010
本文编号：2903585
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