Nrf2/ARE通路在染氟雄性大鼠生殖损伤中的作用及NAC的影响
发布时间：2020-12-16 00:30
目的本课题通过建立氟染毒大鼠模型,以氟化钠（NaF）为染毒剂,以N-乙酰半胱氨酸（NAC）为干预因素,以Nrf2/ARE[核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）]信号通路为靶点,探讨氟染毒对大鼠睾丸所致的氧化应激和DNA损伤,评估Nrf2/ARE信号通路在氟化物的生殖毒性中所起作用及NAC的生殖保护作用,为氟染毒致雄性生殖损伤的中毒机制及防治措施提供实验依据。方法1.动物分组和处理60只4周龄SPF（Specific pathogen free）级SD雄性大鼠,体重100150g。将大鼠随机分为生理盐水组、NaF组、NAC组、NAC+NaF组,对应的受试物及剂量为:0.90%氯化钠溶液（10ml/kg）、25mg/kg/dNaF、150mg/kg/dNAC和25mg/kg/d NaF+150mg/kg/dNAC,处理时间为7周。2.生殖相关指标的检测计算睾丸和附睾脏器系数,采用计算机辅助精子质量分析系统检测大鼠精子密度、活动率和畸形率,ELISA法检测血清睾酮含量,采用HE（Hematoxylin and eosin）染色法观察生精小...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 主要试剂的配制
2.1.2 主要仪器与设备
2.2 实验方法
2.2.1 实验动物分组、模型建立及标本的收集
2.2.2 大鼠体重、睾丸和附睾脏器系数的分析
2.2.3 精液质量参数的测定
2.2.4 大鼠睾丸氟含量的测定
2.2.5 酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清睾酮含量
2.2.6 大鼠血清氧化应激生化指标的检测
2.2.7 睾丸组织病理形态的观察
2.2.8 酶联免疫吸附（ELISA）法测定 8-OHdG含量
2.2.9 免疫组织化学法测定睾丸中 8-OHdG的表达情况
2.2.10 线性相关分析氧化应激和DNA损伤之间的相关性
2.2.11 荧光定量PCR法检测大鼠睾丸Nrf2及其下游基因表达情况
2.2.12 蛋白质印迹法方法检测检测睾丸Nrf2及其下游蛋白表达
2.2.13 统计学处理
3 结果
3.1 不同组别大鼠体重和主要脏器系数的比较
3.2 不同组别大鼠精液质量参数的比较
3.3 不同组别大鼠睾丸氟含量的比较
3.4 不同组别大鼠血清睾酮含量的比较
3.5 不同组别大鼠血清氧化应激相关生化指标的比较
3.6 大鼠睾丸组织病理学形态评价
3.7 ELISA法测定 8-OHdG含量的结果
3.8 不同组别大鼠睾丸 8-OHdG免疫组织化学表达定位和水平
3.9 氧化应激和DNA损伤的线性相关分析结果
3.10 大鼠睾丸Nrf2及其下游基因的mRNA表达情况
3.10.1 聚合酶链式反应（PCR）的电泳结果
3.10.2 荧光定量PCR结果
3.11 大鼠睾丸Nrf2及其下游NQO1和HO-1 的蛋白表达情况
3.11.1 不同组别大鼠睾丸Nrf2蛋白表达结果
3.11.2 不同组别大鼠睾丸NQO1蛋白和HO-1 蛋白表达结果
4 讨论
4.1 氟化物暴露对雄性生殖系统的危害
4.2 氟染毒通过氧化应激机制引起DNA损伤和生殖损伤
4.3 Nrf2/ARE信号通路在氟染毒致雄性生殖损伤中的作用
4.4 NAC降低了氟化物诱导的氧化性DNA损伤而保护雄性生殖系统
4.5 NAC对氟染毒大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路的影响
4.6 本研究的优点和局限性
5 结论
参考文献
综述 Nrf2-ARE通路介导的抗氧化细胞保护作用研究进展
1 Nrf2/ARE信号通路的分子基础
2 Nrf2/ARE信号通路的作用机制
3 氧化应激所引起的机体损伤
4 Nrf2/ARE信号通路的抗氧化保护作用
4.1 Nrf2-ARE信号通路的抗炎症作用
4.2 Nrf2-ARE信号通路的抗缺血再灌注损伤作用
4.3 Nrf2-ARE信号通路的抗凋亡作用
4.4 Nrf2-ARE信号通路与肿瘤的关系
4.5 Nrf2-ARE信号通路的神经保护作用
4.6 Nrf2-ARE信号通路的抗动脉粥样硬化的心血管保护作用
4.7 Nrf2-ARE信号通路的抗糖尿病作用
5 Nrf2-ARE信号通路的激活剂和抑制剂
6 小结
参考文献
个人简历及学术论文发表情况
致谢
本文编号：2919180
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 主要试剂的配制
2.1.2 主要仪器与设备
2.2 实验方法
2.2.1 实验动物分组、模型建立及标本的收集
2.2.2 大鼠体重、睾丸和附睾脏器系数的分析
2.2.3 精液质量参数的测定
2.2.4 大鼠睾丸氟含量的测定
2.2.5 酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清睾酮含量
2.2.6 大鼠血清氧化应激生化指标的检测
2.2.7 睾丸组织病理形态的观察
2.2.8 酶联免疫吸附（ELISA）法测定 8-OHdG含量
2.2.9 免疫组织化学法测定睾丸中 8-OHdG的表达情况
2.2.10 线性相关分析氧化应激和DNA损伤之间的相关性
2.2.11 荧光定量PCR法检测大鼠睾丸Nrf2及其下游基因表达情况
2.2.12 蛋白质印迹法方法检测检测睾丸Nrf2及其下游蛋白表达
2.2.13 统计学处理
3 结果
3.1 不同组别大鼠体重和主要脏器系数的比较
3.2 不同组别大鼠精液质量参数的比较
3.3 不同组别大鼠睾丸氟含量的比较
3.4 不同组别大鼠血清睾酮含量的比较
3.5 不同组别大鼠血清氧化应激相关生化指标的比较
3.6 大鼠睾丸组织病理学形态评价
3.7 ELISA法测定 8-OHdG含量的结果
3.8 不同组别大鼠睾丸 8-OHdG免疫组织化学表达定位和水平
3.9 氧化应激和DNA损伤的线性相关分析结果
3.10 大鼠睾丸Nrf2及其下游基因的mRNA表达情况
3.10.1 聚合酶链式反应（PCR）的电泳结果
3.10.2 荧光定量PCR结果
3.11 大鼠睾丸Nrf2及其下游NQO1和HO-1 的蛋白表达情况
3.11.1 不同组别大鼠睾丸Nrf2蛋白表达结果
3.11.2 不同组别大鼠睾丸NQO1蛋白和HO-1 蛋白表达结果
4 讨论
4.1 氟化物暴露对雄性生殖系统的危害
4.2 氟染毒通过氧化应激机制引起DNA损伤和生殖损伤
4.3 Nrf2/ARE信号通路在氟染毒致雄性生殖损伤中的作用
4.4 NAC降低了氟化物诱导的氧化性DNA损伤而保护雄性生殖系统
4.5 NAC对氟染毒大鼠睾丸Nrf2/ARE信号通路的影响
4.6 本研究的优点和局限性
5 结论
参考文献
综述 Nrf2-ARE通路介导的抗氧化细胞保护作用研究进展
1 Nrf2/ARE信号通路的分子基础
2 Nrf2/ARE信号通路的作用机制
3 氧化应激所引起的机体损伤
4 Nrf2/ARE信号通路的抗氧化保护作用
4.1 Nrf2-ARE信号通路的抗炎症作用
4.2 Nrf2-ARE信号通路的抗缺血再灌注损伤作用
4.3 Nrf2-ARE信号通路的抗凋亡作用
4.4 Nrf2-ARE信号通路与肿瘤的关系
4.5 Nrf2-ARE信号通路的神经保护作用
4.6 Nrf2-ARE信号通路的抗动脉粥样硬化的心血管保护作用
4.7 Nrf2-ARE信号通路的抗糖尿病作用
5 Nrf2-ARE信号通路的激活剂和抑制剂
6 小结
参考文献
个人简历及学术论文发表情况
致谢
本文编号：2919180
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