纳米氧化辞颗粒通过扰动NRF2信号通路破坏自噬反应引起人角质形成细胞毒性

发布时间：2020-12-16 09:00

　　目的:纳米氧化锌（Zinc oxide nanoparticles,ZnO NPs）广泛用于化妆品和防晒剂中。越来越多的证据表明ZnO NPs会对人体皮肤产生不可忽视的有害作用,但是对ZnO NPs毒性作用的潜在分子机制仍然知之甚少。先前的研究表明,氧化应激和自噬反应与ZnO NPs诱导的毒性有关。核因子-E2相关因子2（Nuclear factor erythroid-2 related factor 2,NRF2）是细胞内抗氧防御系统的关键核转录因子。NRF2通路已被认为是介导化学物致皮肤损伤的重要保护途径。当前的研究旨在探讨NRF2介导的抗氧化通路可能参与ZnO NPs致人角质形成细胞毒性的作用。研究方法:1.应用透射电镜技术观察ZnO NPs的形状及粒径,并利用动态光散射仪检测ZnO NPs的流体动力学直径以及Zeta电位;2.利用CCK-8试剂盒和乳酸脱氢酶LDH试剂盒检测ZnO NPs（0-500μM）染毒24小时HaCaT细胞的存活率及LDH漏出率,并使用流式细胞仪检测ZnO NPs对HaCaT细胞的活性氧自由基（Reactive oxygen species,ROS）及... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ZnONPs的平均流体动力学直径示意图

中国医科大学硕士学位论文93实验结果3.1纳米氧化锌的表征利用动态光散射DLS和Zeta电位对ZnONPs的物理化学性质进行了表征。表3.1和图3.1显示的是ZnONPs的平均流体动力学直径为219.71nm，图3.2显示ZnONPs的Zeta电位为-15.7mV。表3.1.ZnONPs的动态散射光DLSSampleEff.Diam.(nm)BaselineIndexCountRate(kcps)DataRetained(%)ZnONPs219.718.1544.897.45图3.1ZnONPs的平均流体动力学直径示意图图3.1为动态散射光DLS检测ZnONPs颗粒的平均流体动力学直径为219.71nm。图3.2ZnONPs的Zeta电位示意图图为动态散射光DLS检测ZnONPs颗粒的Zeta电位为-15.7mV。如图3.3所示，采用透射电子显微镜对本研究中使用的ZnONPs进行表征，大

中国医科大学硕士学位论文10多数ZnONPs呈不规则大小的棒状形态，结果表明，ZnONPs的粒径在50nm左右。图3.3ZnONPs的透射电镜示意图上图为透射电镜TEM检测纳米颗粒的形状及粒径。3.2ZnONPs对HaCaT细胞生存率的影响通过检测细胞存活率和LDH漏出率共同评估ZnONPs在HaCaT细胞中的细胞毒性。将HaCaT细胞用不同浓度的ZnONPs（0-500μM）处理24小时。如图3.4（A）所示，与对照组相比，随着ZnONPs浓度升高细胞的生存力明显降低，200μMZnONPs处理组细胞存活率明显降低至78.7％。如图3.4（B）所示，在时效研究中，分别用200和500μMZnONPs处理细胞2、4、6、12和24小时。当200和500μMZnONPs处理6小时，细胞活力没有明显降低。与对照组相比，暴露于200μMZnONPs的细胞在24小时后的存活率显著降低至80.7%，暴露于500μMZnONPs的细胞在12小时后的存活率显著降低至51.4%。此外，如图3.4（C、D）所示，在浓度为200μM的ZnONPs处理的细胞中，LDH漏出量增加至对照组的4.23倍，对于经200μM和500μMZnONPs处理的HaCaT细胞，在观察的24小时内LDH漏出持续增加。


本文编号：2919901