黑枸杞对高脂诱导的ApoE -/- 小鼠非酒精性脂肪肝的作用研究

发布时间：2020-12-30 13:29

　　近年来,随着人们生活方式和饮食结构的改变,非酒精脂肪肝的发病率呈现上升的趋势,且目前缺乏有效的治疗方案,长期的药物治疗不但加重患者的经济负担并伴有毒副作用。因而从传统中草药中寻找没有毒副作用的活性成分,具有极其重要的意义。黑枸杞作为我国的传统中草药,近年来受到人们的广泛关注。研究发现,黑枸杞具有广泛的抗炎、抗衰老和显著的抗氧化等功效。本文使用醇提法对黑枸杞中的黄酮类物质进行粗提,并探索黑枸杞粗提物对非酒精性脂肪肝的作用效果和可能的机制。主要研究内容包括以下两个方面:1)采用超声波辅助醇提法,制备黑枸杞总黄酮的粗提物,并使用分光光度法,以芦丁为标准对照,测定黑枸杞粗提物中总黄酮含量和体外抗氧化活性。研究发现,在本实验条件下,黑枸杞总黄酮粗提物的提取率达2.84%,并且在一定的浓度范围内,黑枸杞总黄酮粗提物具有很强的DPPH和OH自由基清除率。2)5周龄雄性ApoE null(ApoE^-/-)小鼠,随机分成5组:正常组（NC）、高脂模型组（MOD）、高脂膳食+辛伐他汀组（SIM）、高脂膳食+黑枸杞组（LRM）、高脂膳食+辛伐他汀+黑枸杞组（SIM+LRM）。正常组给予... 

【文章来源】：江南大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略语对照表
1 绪论
    1.1 非酒精性脂肪肝概述
    1.2 非酒精性脂肪肝的发病机制
        1.2.1 胰岛素抵抗
        1.2.2 免疫反应
        1.2.3 氧化应激与脂质过氧化
        1.2.4 脂肪细胞因子
    1.3 非酒精性脂肪肝的治疗
    1.4 植物类黄酮对非酒精性脂肪肝的作用研究
    1.5 黑枸杞介绍
        1.5.1 黑枸杞的主要成分研究
        1.5.2 黑枸杞的生物活性的研究
    1.6 立题依据及意义
    1.7 主要研究内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料和试剂
    2.2 实验仪器
    2.3 动物实验
        2.3.1 实验动物
        2.3.2 动物饲料
        2.3.3 饲养条件
    2.4 试验方法和步骤
        2.4.1 黑枸杞总黄酮的制备
        2.4.2 黑枸杞粗提物中总黄酮含量的测定
        2.4.3 黑枸杞总黄酮抗氧化性的测定
        2.4.4 动物实验的设计
        2.4.5 血液样品的采集
        2.4.6 血脂生化指标的测定
        2.4.7 血清炎性因子和脂肪细胞因子的测定
        2.4.8 小鼠肝脏组织MDA含量的测定
        2.4.9 肝脏组织GSH-Px酶活性的测定
        2.4.10 小鼠组织石蜡切片的制备
        2.4.11 肝脏组织油红O染色
        2.4.12 组织切片的观察
        2.4.13 肝脏组织qPCR分析
        2.4.14 肝脏组织免疫凝胶分析
    2.5 统计学分析
3 结果与讨论
    3.1 芦丁标准曲线和黑枸杞总黄酮的提取率
    3.2 黑枸杞总黄酮粗提物的体外抗氧化性分析
        3.2.1 DPPH自由基清除率
        3.2.2 OH自由基清除率
-/-小鼠体重、进食量、肝重、肝指数和睾周白色脂肪重的变化">    3.3 ApoE^-/-小鼠体重、进食量、肝重、肝指数和睾周白色脂肪重的变化
-/-小鼠体重和进食量的变化">        3.3.1 ApoE^-/-小鼠体重和进食量的变化
-/-小鼠肝重与肝指数的变化">        3.3.2 ApoE^-/-小鼠肝重与肝指数的变化
-/-小鼠睾围白色脂肪重的变化">        3.3.3 ApoE^-/-小鼠睾围白色脂肪重的变化
-/-小鼠血清血脂生化指标和细胞因子的变化">    3.4 ApoE^-/-小鼠血清血脂生化指标和细胞因子的变化
-/-小鼠血清血脂水平的变化">        3.4.1 ApoE^-/-小鼠血清血脂水平的变化
-/-小鼠血清AST、ALT水平的变化">        3.4.2 ApoE^-/-小鼠血清AST、ALT水平的变化
-/-小鼠血清炎性因子的变化">        3.4.3 ApoE^-/-小鼠血清炎性因子的变化
-/-小鼠血清脂肪细胞因子的变化">        3.4.4 ApoE^-/-小鼠血清脂肪细胞因子的变化
-/-小鼠附睾周围白色脂肪和肝脏病理学变化">    3.5 ApoE^-/-小鼠附睾周围白色脂肪和肝脏病理学变化
-/-小鼠附睾周围白色脂肪组织的变化">        3.5.1 ApoE^-/-小鼠附睾周围白色脂肪组织的变化
-/-小鼠肝脏组织肉眼观察">        3.5.2 ApoE^-/-小鼠肝脏组织肉眼观察
-/-小鼠肝脏脂质沉积的变化">        3.5.3 ApoE^-/-小鼠肝脏脂质沉积的变化
-/-小鼠肝脏组织基因和蛋白水平的研究">    3.6 ApoE^-/-小鼠肝脏组织基因和蛋白水平的研究
-/-小鼠肝脏组织炎性因子水平的变化">        3.6.1 ApoE^-/-小鼠肝脏组织炎性因子水平的变化
-/-小鼠肝脏脂质代谢相关蛋白水平的变化">        3.6.2 ApoE^-/-小鼠肝脏脂质代谢相关蛋白水平的变化
-/-小鼠肝脏组织氧化应激水平的变化">        3.6.3 ApoE^-/-小鼠肝脏组织氧化应激水平的变化
主要结论与展望
    主要结论
    展望
致谢
参考文献
附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]Adipokines and proinflammatory cytokines, the key mediators in the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease[J]. Sanja Stojsavljevi?,Marija Gomer?i? Pal?i?,Lucija Virovi? Juki?,Lea Smir?i? Duvnjak,Marko Duvnjak.  World Journal of Gastroenterology. 2014(48)
[2]黑枸杞及其功能性成分在食品工业中的应用及开发进展[J]. 杨斌,王向未.  轻工科技. 2014(10)
[3]非酒精性脂肪肝病药物治疗进展[J]. 谭彦芳,赵彩彦.  实用肝脏病杂志. 2013(04)
[4]黑果枸杞、枸杞、黑加仑中原花青素含量对比研究[J]. 孙楠,杜连平,孙跃宁,王海英.  食品与药品. 2013(04)
[5]Fructose as a key player in the development of fatty liver disease[J]. Metin Basaranoglu,Gokcen Basaranoglu,Tevfik Sabuncu,Hakan Sentürk.  World Journal of Gastroenterology. 2013(08)
[6]黄皮叶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的降脂保肝作用研究[J]. 李晓波,张荣,王宁生,宓穗卿.  中药新药与临床药理. 2012(04)
[7]黑果枸杞总黄酮降血脂作用[J]. 李淑珍,李进.  时珍国医国药. 2012(05)
[8]Role of cytokines and chemokines in non-alcoholic fatty liver disease[J]. Vincent Braunersreuther,Giorgio Luciano Viviani,Franois Mach,Fabrizio Montecucco.  World Journal of Gastroenterology. 2012(08)
[9]Nutrition and physical activity in NAFLD:An overview of the epidemiological evidence[J]. Shira Zelber-Sagi,Vlad Ratziu,Ran Oren.  World Journal of Gastroenterology. 2011(29)
[10]黑果枸杞叶总黄酮的体外抗氧化活性研究[J]. 李进,李淑珍,冯文娟,原慧.  食品科学. 2010(13)



本文编号：2947723